U937细胞系（人组织细胞淋巴瘤细胞）

U-937细胞系是由Nilsson K实验室于1974年首次建立的。U937细胞系源自一位37岁白人男性恶性组织细胞性淋巴瘤患者的胸腔积液样本。
U-937细胞是单核细胞前体，具有单核细胞和组织细胞的特征。

研究表明U-937细胞可以通过人类混合淋巴细胞培养物的上清液诱导分化为终末单核细胞。然而，PCR和细胞遗传学分析发现，许多U-937库存中被人类髓系白血病细胞系K-562污染，最早的库存污染水平达0.6%。因此，自1994年3月起，除专利需要外，该细胞系已停止销售。

U937细胞系特性特征

• u937细胞产生溶菌酶和β2-微球蛋白、受PMA刺激后可产生TNF-α、表达补体受体C3R

• u937细胞表达Fas抗原，对TNF和抗Fas抗体敏感

• u937细胞不合成免疫球蛋白、EBV（EB病毒）阴性

• U937细胞可被多种因子诱导分化为终末单核细胞，包括：人混合淋巴细胞培养上清、佛波酯（PMA）、维生素D3、γ-干扰素（γ-IFN）、肿瘤坏死因子（TNF）、维甲酸

• u937细胞属于髓系细胞，可组成性地分泌大量细胞因子和趋化因子

• 肿瘤坏死因子-α和重组GM-CSF可独立促进U937细胞中白介素-10的产生

• u937细胞是少数几种表达许多单核细胞特征的细胞系之一

U937细胞系参数表

U937人组织细胞淋巴瘤细胞系培养教程

U937细胞复苏步骤

• 解冻：将冻存的U937细胞快速在37°C水浴中解冻。

  
  

• 转移和离心：

• 将解冻后的U937细胞悬液转移到含15mL预热的培养基的50mL离心管中。

• 在800rpm下离心5分钟，以去除冻存液。

• 重悬细胞：弃去上清液，用5mL新鲜培养基重悬U937细胞。

• 培养：将U937细胞转移至25cm²培养瓶中，置于培养箱中培养。

U937细胞常规培养

• 悬浮生长：U937细胞为悬浮生长，不需酶消化即可传代。

• 密度控制：保持U937细胞密度在1×10^5 - 1×10^6 cells/mL之间。

• 传代周期：每3-4天传代一次，传代比例为1:3到1:5。

U937细胞传代步骤

• 细胞悬浮：轻轻吹打培养瓶使U937细胞悬浮均匀。

• 转移：取适量U937细胞悬液加入新的培养瓶中。

• 添加培养基：加入新鲜培养基至适当体积以支持U937细胞生长。

U937细胞计数

• 计数工具：使用血球计数板或自动细胞计数仪。

• 密度调整：确保U937细胞密度在理想范围内。

U937细胞冻存

• 收集细胞：选择对数生长期的U937细胞进行冻存。

• 调整密度：将U937细胞密度调整至1-2×10^6 cells/mL。

• 冻存液：使用无血清冻存液（例如，10% DMSO in FBS）。

• 降温过程：以1°C/min的速率降温，最终转移至液氮中长期保存U937细胞。

U937细胞培养注意事项

• 细胞密度控制：保持适宜密度以确保U937细胞的良好生长。

• 培养基更换：每3-4天或根据生长情况及时更换培养基以支持U937细胞。

• 避免细胞聚集：轻轻摇晃培养瓶以防止U937细胞聚集成团。

• 防止污染：采用无菌操作，培养基中可加入抗生素保护U937细胞。

• 细胞活力监测：定期使用台盼蓝染色法检测U937细胞活力，保持在95%以上。

• 适时传代：防止过度生长，确保U937细胞状态良好。

• 细胞纯度：每3-4个月进行一次STR鉴定，确保U937细胞纯度。

• 培养条件稳定：保持U937细胞培养环境的稳定性，避免频繁开关培养箱。

• 状态观察：每日观察U937细胞形态和生长状态，记录异常。