
35.1细胞(杂交瘤细胞抗CD2)
- 来源:杂交瘤细胞;B淋巴细胞
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:表达并分泌抗CD2单克隆抗体; 产生的抗体能够与人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)特异性结合
35.1杂交瘤细胞抗CD2是将经过佛波醇肉豆蔻酸(PMA)激活的人T淋巴细胞免疫获得的小鼠脾细胞与NSI/1骨髓瘤细胞融合而建立。35.1杂交瘤细胞能够持续产生特异性为IgG2a亚型的单克隆抗体,该抗体能够识别并结合人T细胞表面标志蛋白Tp50(CD2)。这些抗体在抑制T细胞增殖反应和细胞毒性方面有显著效果,但对抗体介导的细胞毒性反应没有抑制作用。
尽管35.1细胞来源于小鼠,但生成过程涉及人类免疫系统的细胞。具体步骤包括:使用PMA激活的人T淋巴细胞对小鼠进行免疫处理;从这些小鼠体内提取脾细胞;将这些脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合,形成能够长时间生产目标抗体的杂交瘤细胞系。
35.1细胞特性特征
35.1细胞产生针对人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)的单克隆抗体、产生的抗体属于IgG2a亚型。
35.1细胞表达并分泌抗CD2单克隆抗体、产生的抗体能够与人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)特异性结合。
产生的抗体可以抑制T细胞增殖、细胞毒性反应。
产生的抗体不抑制抗体倡导的细胞毒反应。
35.1细胞含有产生抗CD2抗体的基因序列。
35.1杂交瘤细胞产生的抗体具有针对人CD2分子的高度特异性
35.1细胞(杂交瘤细胞抗CD2)参数表
细胞名称 | 35.1细胞(杂交瘤细胞抗CD2) |
细胞别称 | 351细胞;35.1CD2; |
来源 | 佛波醇肉豆寇酸(PMA)激活的人T淋巴细胞免疫获得的脾细胞与NSI/1骨髓瘤细胞融合 |
特征 | 淋巴瘤,淋巴母细胞样,悬浮生长 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37℃, 95%空气 + 5% CO2 |
传代信息 | 比例1:2-1:4,每2-3天换液,周期24-48小时 |
细胞密度 | 3×10^5 - 5×10^5 cells/ml |
冻存条件 | 60%基础培养基 + 30%FBS + 10%DMSO |
保存方式 | 液氮储存 |
抗体类型 | IgG2a亚型 |
抗体反应 | 与人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)反应 |
抗体功能 | 抑制T细胞增殖反应和细胞毒反应,不抑制抗体倡导的细胞毒反应 |
质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
免疫原 | 佛波醇肉豆寇酸(PMA)活化的人T淋巴细胞 |
融合细胞 | 小鼠脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞 |
文献信息 | Martin PJ, et al. J. Immunol. 131: 180-185, 1983. PubMed: 6190907 |
培养教程
35.1细胞(杂交瘤细胞抗CD2)培养教程
35.1细胞复苏
解冻:将冻存的35.1细胞管在37℃水浴中快速解冻,时间为1-2分钟。
转移和离心:将解冻的35.1细胞悬液转移到含5mL完全培养基的离心管中,以1000RPM离心5分钟,弃去上清。
重悬:用4-6mL完全培养基重悬35.1细胞。
培养:将35.1细胞悬液转移到培养瓶或6cm培养皿中,置于37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。
次日处理:次日更换培养基,并检查35.1细胞密度和状态。
35.1细胞培养
培养基配方:完全培养基由90% RPMI-1640、10% FBS及1% P/S(青霉素/链霉素)组成。
培养条件:35.1细胞在37℃、95%空气+5% CO2的环境中培养。
细胞密度维持:保持35.1细胞密度在3×10^5 - 5×10^5 cells/ml之间。
35.1细胞换液
换液频率:每周进行2-3次换液。
直接补充:直接向培养瓶中加入新鲜的完全培养基。
离心换液:收集培养液,1000RPM离心5分钟,弃去上清后重悬35.1细胞于新鲜完全培养基中。
35.1细胞传代
传代时机:当35.1细胞密度达到80%-90%时进行传代。
传代比例:传代比例为1:2到1:5。
收集35.1细胞悬液,1000RPM离心8-10分钟。
弃去上清,用1-2mL新鲜完全培养基重悬35.1细胞。
按照传代比例将35.1细胞分配到新的培养瓶中,每瓶添加5-6mL完全培养基。
35.1细胞冻存
冻存液配方:55%基础培养基、40% FBS和5% DMSO。
细胞悬浮:将35.1细胞悬浮在冻存液中,每管约1×10^6细胞。
缓慢降温:使用程序降温盒或细胞冻存盒进行缓慢降温,最终将35.1细胞转移到液氮中长期保存。
STR鉴定及相关
参考文献
上一篇:SP20细胞(小鼠骨髓瘤细胞)