
A9细胞(小鼠皮下结缔组织细胞)
- 来源:皮下结缔组织;疏松结缔组织和脂肪;正常
- 细胞特征:贴壁细胞,成纤维细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:A9细胞对8-氮鸟嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鸟嘌呤(0.1mM)具有抗性。
A9细胞是一种源自小鼠脂肪组织的成纤维细胞样细胞系,起源于1940年建立的L929细胞株。L929细胞株最初来自于雄性C3H/An小鼠的正常皮下乳晕和脂肪组织。(A9细胞是从野生型细胞株L中分离得到的小鼠皮下结缔组织细胞的衍生系。)
A9细胞对HAT选择培养基敏感,同时缺失了腺苷转磷酸核糖基酶与次黄嘌呤转磷酸核糖基酶。此外,A9细胞对8-氮鸟嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鸟嘌呤(0.1mM)具有抗性。
A9细胞株的一个显著特征是它们表达腺苷磷酸核糖基转移酶(APRT)和次黄嘌呤磷酸核糖基转换酶(HPRT),分别表示为APRT+和HPRT+。A9细胞属于杂交瘤细胞类型,是通过将来自小鼠(Mus musculus)的B淋巴细胞与同一物种的骨髓瘤细胞融合而形成的。这种独特的组合使得A9细胞同时表现出B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性。
由于A9细胞对伪狂犬病病毒(PRV)、印第安纳毒株的水泡性口炎病毒(VSV)和单纯疱疹病毒(HSV)等病毒的敏感性和反应,使其在病毒研究中具有重要价值。这种敏感性使得A9细胞成为研究病毒复制、发病机制以及潜在的抗病毒治疗的理想模型。在免疫学研究中,A9细胞也是一个有价值的模型,用于探究免疫反应、抗体产生、单克隆抗体产生以及杂交瘤技术等方面。此外,A9细胞的快速增殖速度(大约24小时的倍增时间)为实验和下游应用提供了充足的细胞供应。
A9细胞参数表
细胞名称 | A9细胞(小鼠皮下结缔组织细胞) |
别称 | A9; A9 (Hamprecht); A9(Hamprecht); AG 9; GM00346; GM-346; GM346 |
来源 | 皮下结缔组织,自发永生,雄性,C3H/An,100日龄 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
细胞类型 | 正常细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
培养条件 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
气相:空气,95%;二氧化碳 (CO2),5% | |
温度:37°C | |
冻存条件 | 基础培养基 + 5% DMSO + 20% FBS |
冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO | |
温度:液氮 | |
传代方法 | 1:3传代,2-3天传一代 |
推荐传代比例:1:3-1:4 | |
推荐换液频率:2-3次/周 | |
细胞特性 | 对HAT选择培养基敏感,缺失腺苷转磷酸核糖基酶(APRT)和次黄嘌呤转磷酸核糖基酶(HPRT) |
对8-氮鸟嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鸟嘌呤(0.1mM)有抗性 | |
生物安全等级 | BSL-1 |
致瘤性 | Yes, in nude mice. |
细胞污染 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性 |
背景描述 | A9细胞是从野生型细胞株L中分离得到的衍生系,具有对HAT选择培养基的敏感性,缺失了腺苷转磷酸核糖基酶与次黄嘌呤转磷酸核糖基酶,同时对特定药物具有抗性。 |
培养教程
1. 细胞接收及检查:
收到A9细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若有破损、液溢出或细胞污染,请及时联系我们并拍照记录。
使用低倍镜(4或5X物镜)下确认A9细胞的生长状态,并在10X和20X物镜下观察细胞形态,同时拍摄细胞状态照片和培养瓶外观照片,作为细胞状态的依据。
2. 细胞处理:
复苏A9细胞:
将含有1mL A9细胞悬液的冻存管在37°C水浴中快速解冻。
加入4mL培养基,混合均匀后离心,弃去上清液,补充1-2mL培养基后吹匀。
将所有A9细胞悬液加入培养瓶中培养过夜。
A9细胞传代:
若A9细胞密度达到80%-90%,可进行传代培养。
对于贴壁A9细胞,推荐传代比例为1:2。
A9细胞冻存:
待A9细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
使用冻存液(50% basal medium+40% FBS+10% DMSO)进行冻存。
3. 培养操作:
将A9细胞培养瓶置于37°C培养箱中放置约2-3小时,使细胞适应培养条件。
4. 贴壁A9细胞传代:
弃去培养上清,用PBS润洗A9细胞1-2次。
加入0.25% Trypsin-EDTA溶液消化1-2分钟,观察A9细胞消化情况。
加入培养基终止消化,按1:2到1:5的比例分配到新的培养瓶中。
5. 冻存处理:
弃去培养基,用PBS清洗瓶底,加入胰酶消化A9细胞。
离心后加入DMSO至最终浓度为10%,分配到冻存管中进行冻存。
注意事项:
培养操作需在无菌条件下进行,避免细菌和真菌的污染。
定期观察A9细胞形态和生长情况,及时进行传代和处理。
冻存液需按规定比例配制,记录A9细胞冻存位置以便下次使用。
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STR鉴定及相关
STR点位信息
Mouse STR 1-1 | 10 |
Mouse STR 1-2 | 17,18 |
Mouse STR 2-1 | 9 |
Mouse STR 3-2 | 14 |
Mouse STR 4-2 | 20.3,21.3 |
Mouse STR 5-5 | 14,15 |
Mouse STR 6-4 | 17,18 |
Mouse STR 6-7 | 12 |
Mouse STR 7-1 | 26,27 |
Mouse STR 8-1 | 16 |
Mouse STR 11-2 | 15,16,17 |
Mouse STR 12-1 | 16 |
Mouse STR 13-1 | 17 |
Mouse STR 15-3 | 25.3 |
Mouse STR 17-2 | 15 |
Mouse STR 18-3 | 16 |
Mouse STR 19-2 | 12 |
Mouse STR X-1 | 26,27 |
参考文献
- S100A8/A9蛋白对人舌鳞癌SCC-25及CAL-27细胞侵袭的影响 《贵州医科大学学报》 2019年11期
- 摘要:目的:探讨外源性S100A8/A9蛋白对人舌鳞癌细胞SCC-25及CAL-27侵袭能力的影...
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