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货号：STM-CL-6017 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
B82细胞（小鼠肿瘤细胞系）
- 来源：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪
- 细胞特征：贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基：MEM＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：B82细胞是通过在溴脱氧尿苷（BUdR）中对L929细胞系进行逐步选择而获得的衍生株
B82小鼠肿瘤细胞系源自小鼠脂肪组织中的成纤维细胞，其前身是NCTC克隆929细胞系，B82细胞系通过在溴脱氧尿苷（BUdR）中的渐进选择过程而得到。B82细胞具有70-80%的高克隆效率，常用于染色体分析和遗传杂交研究。其核型为2n=51。
B82小鼠肿瘤细胞系参数表
| 细胞名称 | B82小鼠肿瘤细胞系 |
| 别称 | B82 (Hamprecht); B-82; GM00347; GM-347 |
| 物种来源 | 小鼠（C3H/An） |
| 组织来源 | 皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 疾病特征 | 自然永生细胞系 |
| 培养基 | MEM培养基，90%；胎牛血清（FBS），10% |
| 培养环境 | 空气，95%；二氧化碳，5%；培养温度37℃；培养湿度：70%-80% |
| 传代比例 | 1:2至1:6 |
| 传代频率 | 每周2次 |
| 细胞消化 | 0.25%胰蛋白酶，消化1-3分钟 |
| 倍增时间 | 每周2至3次 |
| 克隆效率 | 70-80% |
| 应用 | 染色体分析和遗传杂交研究 |
| 冻存条件 | 90% FBS，10% DMSO |
| 保藏机构 | ECACC; 08062522 |
| 安全等级 | BSL-1 |
培养教程
B82小鼠肿瘤细胞系培养教程
B82细胞复苏
将含有1 mL B82细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。
加入4-5 mL预热的完全培养基，混合均匀。
在1000 RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液。
用1-2 mL新鲜培养基重悬B82细胞。
将B82细胞悬液转移到含有8 mL培养基的培养瓶或10 cm培养皿中。
置于37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。
次日换液并检查B82细胞密度和状态。
B82细胞传代
当B82细胞密度达80%-90%时，进行传代：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗B82细胞1-2次。
加入1 mL 0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA消化液，37℃消化1-3分钟。
显微镜下观察，当大部分B82细胞变圆并脱落时，加入少量培养基终止消化。
补加6-8 mL培养基，轻轻打匀。
1000 RPM离心4分钟，弃去上清。
用1-2 mL新鲜培养基重悬B82细胞。
按1:2至1:6的比例将B82细胞分装到新的培养瓶中，每瓶加入8 mL完全培养基。
置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
B82细胞冻存
收集处于良好生长状态的B82细胞。
1000 RPM离心4分钟，弃去上清。
用PBS洗涤一次。
加入无血清细胞冻存液，调整B82细胞密度至5×10^6~1×10^7/mL。
每支冻存管分装1 mL B82细胞悬液，做好标识。
将冻存管放入-80℃冰箱24小时。
转入液氮中长期保存。
B82细胞系培养的特殊之处
培养基组成：B82细胞的培养基通常为MEM培养基，配以10%胎牛血清（FBS）。某些细胞系可能使用不同类型的培养基（如DMEM或RPMI）。
传代比例：B82细胞的传代比例通常为1:2至1:6，而其他细胞系可能有不同的传代比例要求。
克隆形成能力：B82细胞具有70-80%的克隆形成能力，这使其在某些实验（如遗传杂交研究）中表现出色，而其他细胞系的克隆形成能力可能较低。
冻存和复苏条件：B82细胞在冻存和复苏过程中需要特别注意DMSO的浓度和冻存步骤，确保细胞存活率较高。
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