
CTX细胞系(大鼠脑星形胶质细胞系)
- 来源:脑
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:标志性蛋白:GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、S100β;
CTX细胞通常是指大鼠脑部提取的原代星形胶质细胞,可能来自不同发育阶段或脑部区域,主要为I型星形胶质细胞,形态上呈现上皮细胞样,具有贴壁生长特性。CTX细胞广泛应用于基础神经生物学研究,尤其适用于药物筛选等实验需求。
CTX细胞系特性特征
标志性蛋白:GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、S100β;
CTX细胞可能表达多种与星形胶质细胞相关的表面标志物,如:CD44、GLAST(谷氨酸转运体)。
CTX细胞系参数表
细胞名称 | CTX细胞系(大鼠脑星形胶质细胞系) |
细胞类型 | I型星形胶质细胞 |
形态特征 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
细胞密度 | 通常超过1×10^6个/mL |
规格 | T25培养瓶或1mL冻存管包装 |
用途 | 仅供科研使用 |
培养基组成 | 90% DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养条件 | 温度:37℃;CO₂浓度:5%;湿度:70%-80% |
运输方式 | 干冰运输,使用1mL冻存管包装 |
复苏方法 | -80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏 |
冻存液组成 | 胎牛血清(90%)、DMSO(10%) |
冻存密度 | 推荐冻存密度为1×10^6至1×10^7个活细胞/mL |
冷冻过程 | 使用程序降温盒进行冷冻,-80℃冰箱中过夜后转入液氮储存 |
注意事项 | 所有操作应在二级生物安全台内进行,运输用的培养基不能再用于细胞培养 |
注意事项 | 仅限于科学研究,不可用于动物或人类疾病治疗 |
培养教程
CTX大鼠脑星形胶质细胞系培养教程
CTX细胞复苏步骤
取出CTX细胞冻存管放入37℃水浴中,快速摇晃以完成解冻,尽量避免细胞在水浴中长时间暴露。
将解冻后的CTX细胞悬液加入含4-6 mL完全培养基的离心管,1000 rpm离心3-5分钟,弃去上清液。
用新鲜培养基将CTX细胞重悬后,转移至含6-8 mL培养基的培养瓶中,置于37℃培养箱中过夜培养。
第二天在显微镜下观察CTX细胞的贴壁状态和生长状况,如有大量悬浮的死细胞,应及时更换培养基。
CTX细胞传代
当CTX细胞密度达到80%-90%时,需进行传代。若过密,CTX细胞的形态和活性可能受影响,建议适时传代。
洗涤:弃去上清液后,用无钙镁的PBS冲洗CTX细胞1-2次。
消化:加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,于37℃下消化1-2分钟。当大部分CTX细胞变圆并即将脱落时,加入3-4 mL含10% FBS的培养基终止消化。
离心:将悬浮的CTX细胞转入离心管,1000 rpm离心3-5分钟后弃去上清液。
分装:将CTX细胞按1:2比例分装到新培养瓶中,补充6-8 mL新鲜完全培养基,继续培养。
CTX细胞冻存
为保证实验的持续性,建议在CTX细胞培养前3代时进行一批冻存操作。
冻存液:使用90%胎牛血清和10% DMSO为冻存液。
细胞混合:将CTX细胞悬液与冻存液按1:1比例混合,分装至冻存管并标记好信息。
冷冻条件:将装有CTX细胞的冻存管置于-80℃冷冻过夜,次日转移至液氮中储存以供长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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