原代人支气管上皮细胞专用培养基

产品百科

这款培养基适用于哪些细胞？

主要适用细胞类型
原代人支气管/气管上皮细胞（HBEC/HTEC）
来自健康供体或疾病供体（哮喘、COPD、囊性纤维化等）的原代人气管/支气管上皮细胞，用于浸没式扩增与 ALI 分化。

人支气管上皮细胞系
常见细胞系如 BEAS‑2B、16HBE14o‑ 等在文献中常用气道上皮培养基或 BEGM 类培养

其他呼吸道上皮（视产品说明而定）
部分“气管/支气管上皮细胞培养基”会标注可用于肺气管、小气道等呼吸道组织细胞（原代或细胞株），但通常仍强调人气道优先。
动物源（大鼠/小鼠/猪/羊）支气管上皮多需对应“动物专用”配方，不建议直接用人源专用培养基替代。

是否区分“扩增培养基”和“ALI 分化培养基”？

专业的人支气管上皮细胞培养基体系通常会明确区分“扩增（生长）培养基”和“ALI 分化培养基”

扩增阶段：目标是让原代 HBEC/HSAEC 快速贴壁、稳定增殖，维持基底细胞样表型，便于后续铺 Transwell。此时培养基通常偏向促增殖、抑制过早分化。
ALI 分化阶段：在细胞铺满微孔膜后进行“气提”（只保留基底侧培养基），通过特定配方诱导形成假复层粘膜纤毛上皮，出现纤毛细胞、杯状/分泌细胞等，并提升 TEER、黏蛋白分泌等指标。

实操上的关键区别
换液方式：
扩增期：顶侧 + 基底侧都加培养基（浸没）。
ALI 期：air‑lift 后只加基底侧，顶侧暴露于空气。

时间窗口：
一般建议在细胞活性好、传代次数不太高时进入 ALI（很多方案提示 P3–P4 以后分化潜力下降）。

配方差异：
ALI 培养基通常更强调分化相关因子（如视黄酸通路、特定激素/生长因子组合），而扩增培养基更强调增殖与基底细胞维持。

培养基颜色为何偏红/偏黄？

培养基颜色“偏红/偏黄”主要来自酚红（phenol red）pH 指示剂的变化，反映的是培养基 pH 的酸碱状态。

鲜红色/樱桃红：pH 在细胞适宜范围（约 7.2–7.4），通常是正常状态。
偏黄色：pH 下降（变酸），常见原因包括：细胞代谢产生乳酸、CO₂等酸性产物；细菌污染导致快速产酸；长时间不换液、密度过高。

偏紫/紫红：pH 上升（变碱），常见原因包括：培养基长时间暴露在空气中，CO₂逸出，碳酸氢盐缓冲体系失衡；培养箱 CO₂浓度偏低或瓶盖过紧导致气体交换不足。

pH 指示体系与 CO₂浓度的关系
大多数人气道上皮培养基采用碳酸氢钠（NaHCO₃）+ CO₂的缓冲系统，并加入酚红作为指示剂：
酚红在 pH 6–8 范围内灵敏变色：酸性→黄色，中性→红色，碱性→紫色。
培养箱中 CO₂与培养基中 NaHCO₃形成缓冲对，维持 pH 在弱碱性（~7.2–7.4）。

推荐 CO₂浓度取决于培养基中 NaHCO₃含量（g/L）：
NaHCO₃ < 1> 3.5 g/L → CO₂约 10%

换液频率、每次换液量、浸没期 vs ALI 期如何操作？air‑lift 时机如何判断（汇合度/天数）？

浸没扩增期：每 1–2 天换液一次，按容器常规完全更换（小孔约 300–600 μL 起）。

铺 Transwell 后浸没期：每 1–2 天换液一次，顶侧约 0.2 mL、基底侧约 0.5 mL（12‑well 参考），用扩增培养基（顶 + 底都加）。

air‑lift 时机：细胞在膜上接近满板/≥90–100% 汇合时进行，通常铺膜后 3–7 天左右。

ALI 分化期：air‑lift 后顶侧不加培养基，仅基底侧每 2 天更换 ALI 分化培养基（约 0.5 mL/孔，12‑well 参考），培养 21–28 天形成成熟模型。