细胞冻存设备

冻存瓶
有两种材质的冻存瓶可供选择:玻璃或塑料。玻璃瓶较难操作;需要在使用前进行消毒,而且难打开。但是玻璃材质是长期(多年)储存珍贵培养物的首选,一旦正确密封,玻璃瓶可以存储进行长期的保存。思泰默使用玻璃瓶储存种子库存,这些库存放置在液氮罐的下层。塑料瓶用于储存分发库存。
塑料冻存瓶有两种类型:一种是带有内螺纹和硅胶垫圈的塑料小瓶,另一种是带有外螺纹的塑料小瓶。内螺纹版本是第一个商业化的版本,但与外螺纹版本相比有一些缺点。例如,虽然硅胶垫圈提供了极好的密封,但它需要拧紧到恰到好处;太紧或太松,小瓶就会泄漏。
速冻室
有几种方法可以实现每分钟-1℃的冷却速度。最好的方法是使用计算机控制的可编程电子冷冻装置(如CryoMedFreeze),它可以严格保持这一冷却速度。这是思泰默专门使用的方法。这种设备相对昂贵,只有最敏感的细胞才绝对需要。
一种成本较低的方法是将冷冻保存瓶放入隔热室,并在-70℃或更低温度的机械冷冻机中冷却24小时。市面上有几种冷冻室,其冷却速度非常接近理想的每分钟-1°℃(MrFrosty,Nalgene 5100-0001;或StrataCooler,Agilent Technologies 401349)。或者,可以将小瓶放入壁厚15毫米(3/4英寸)且容量为1L的聚苯乙烯塑料盒中,盒内可填充纸、棉绒或泡沫花生以进行隔热。
液氮冷冻储存
长期储存所需的超低温(低于-130℃)可以通过专用电冰箱或更常见的液氮罐来维持。液氮储存系统有两种基本类型:将小瓶浸入液体中和将小瓶保持在液体上方的气相中。液相系统容纳更多的氮气,因此需要的维护较少。然而,总有可能一些液体会进入密封不当的小瓶中,这些小瓶在取出时可能会爆炸。因此强烈建议在气相系统中储存。
气相系统在容器内产生垂直温度梯度。底部液氮的温度为-196℃,而顶部的温度则取决于底部液氮的量以及容器打开的时间。为确保细胞安全储存,请确保容器中有足够的液氮,使顶部的温度为-130℃或更低。所有储存系统都应配备温度报警器。
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