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大鼠真皮微血管内皮细胞(原代细胞)货号:STM-CE-3102 规格:5×10⁵cells/T25细胞培养瓶

大鼠真皮微血管内皮细胞(原代细胞)

  • 来源:皮肤组织
  • 细胞特征:贴壁 , 内皮细胞样
  • 培养基:原代细胞专用培养基
  • 其他:真皮微血管内皮细胞的体外分离培养技术困难
价格:¥ 3,800.00

大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长和创面愈合过程中起着非常重要的作用。真皮微血管内皮细胞,由于其体外分离培养技术困难,相关研究受到了一定限制。

大鼠真皮微血管内皮细胞特性

  • 大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织。

  • 真皮位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结构包括胶原蛋白、弹性纤维以及基质。

  • 真皮由乳头层与网状层组成。

  • 微血管内皮细胞在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合等过程中有重要作用。

  • 创面愈合研究中,真皮微血管内皮细胞的体外分离培养技术困难,限制了相关研究。

原代大鼠真皮微血管内皮细胞参数表

产品名称大鼠真皮微血管内皮细胞(原代细胞)
组织来源真皮组织
产品规格5×10^5 cells/T25 细胞培养瓶
细胞简介大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织。
方法简介

胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法,最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备。

细胞经CD31/vWF免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上。

包被条件PLL (0.1mg/ml), 明胶 (0.1%)
培养基原代细胞专用培养基
换液频率每2-3天换液一次
生长特性贴壁
细胞形态内皮细胞样
传代特性可传2-3代
传代比例1:2
消化液0.25% 胰蛋白酶
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%;37℃
抗原鉴定CD31/vWF
生物安全等级1

培养教程

大鼠真皮微血管内皮细胞培养

  • 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态。

贴壁细胞消化

  • 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。

  • 添加1mL 0.25%胰蛋白酶消化液至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶使消化液覆盖整个瓶底,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3分钟。待细胞回缩变圆后,加入5mL完全培养基终止消化。

  • 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

  • 待细胞完全贴壁后,培养观察,并按换液频率更换新鲜培养基。

细胞收货脱落

  • 收集所有细胞悬液,1000rpm离心5分钟,保留沉淀。

  • 添加0.5mL 0.25%胰蛋白酶消化液至离心管中,重悬沉淀,37℃消化3分钟(或4℃冰箱静置5-7分钟),然后加入5mL完全培养基终止消化。

  • 1000rpm离心5分钟,丢弃上清,用5mL完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。

  • 待细胞完全贴壁后,培养观察,按换液频率更换新鲜培养基。

细胞实验

对于贴壁的原代细胞,在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原I(2-5μg/cm²)、多聚赖氨酸(PLL,0.1mg/mL)、明胶(0.1%)等。


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参考文献

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