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人原代输尿管上皮细胞货号:STM-CE-1104 规格:5×10⁵cells/T25细胞培养瓶

人原代输尿管上皮细胞

  • 来源:尿道组织;人输尿管组织
  • 细胞特征:贴壁,上皮细胞样
  • 培养基:原代上皮细胞专用培养基
  • 其他:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性,细胞纯度高于90%
价格:¥ 7,200.00

人原代输尿管上皮细胞源自正常人输尿管组织。

输尿管是一对细长的管道,连接着肾脏和膀胱,其结构包括筋膜层、肌肉层和粘膜层。粘膜层含有移行上皮细胞,通常有4-5层。输尿管上皮细胞是输尿管生物学研究的基础,也是尿路上皮肿瘤和输尿管损伤等研究的重要对象。

输尿管上皮细胞特性

  • 输尿管连接着肾脏和膀胱,呈扁圆柱状,约25-35厘米长,直径约为0.5-0.7厘米。

  • 输尿管的结构包括三层管壁:筋膜层、肌肉层和粘膜层。粘膜层内含有移行上皮细胞,通常呈4-5层。

  • 人输尿管上皮细胞是输尿管生物学研究的基础。

  • 经过广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色鉴定,确定其为输尿管上皮细胞,细胞纯度高于90%。

  • 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等病原体。

  • 输尿管上皮细胞生长方式为上皮样,适合于贴壁培养。

  • 人输尿管上皮细胞在尿路上皮肿瘤、输尿管损伤和组织工程学研究等领域有广泛应用。

输尿管上皮细胞参数表

细胞类型人输尿管上皮细胞(人原代细胞)
细胞来源正常人输尿管组织
结构特征输尿管呈扁圆柱状,管径约0.5-0.7厘米,全长约25-35厘米,由筋膜层、肌肉层和粘膜层组成,粘膜层含有移行上皮细胞(通常4-5层)
细胞鉴定广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性,细胞纯度高于90%
无病原体不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等病原体
生长方式上皮样,贴壁培养
应用领域尿路上皮肿瘤、输尿管损伤和组织工程学研究等
培养条件气相:95%空气,5%二氧化碳;温度:37摄氏度;湿度:70%-80%
培养基配置原代细胞专用培养基,含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 
冻存条件90%FBS,10% DMSO
倍增时间每周2至3次
换液频率2-3天一次

培养教程

人原代输尿管上皮细胞培养教程

准备工作

  • 准备PBS(磷酸盐缓冲盐水)和0.25%胰酶。

  • 准备含血清的完全培养基并预热至37摄氏度。

传代步骤:

  • 从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃。

  • 用PBS轻轻冲洗细胞,每10cm²培养表面积使用约2mL PBS。轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后轻柔摇晃容器数次。

  • 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入0.25%胰酶(试剂量应足以覆盖细胞层)。轻轻摇晃容器,使试剂完全覆盖细胞层,对于T25细胞培养瓶留约200 μL。

  • 将培养容器放在培养箱中孵育5分钟左右,在显微镜下观察细胞解离情况。

  • 当细胞解离程度≥90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽,加入所用胰酶两倍体积的完全培养基,吹打细胞层表面数次,使培养基分散。

  • 将细胞转移到无菌离心管中,以200×g的离心力离心3-5分钟。

  • 用最少体积的完全培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,再将细胞放回培养箱。

注意事项:

  1. 细胞密度越高越难消化,一般0.25%胰酶消化3-5分钟。

  2. 当细胞难以消化时,可通过延长消化时间或分次消化。

  3. 分次消化步骤:使用预热的PBS和胰酶进行消化,直到细胞块中间全部收缩变圆。

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