
小鼠雪旺氏细胞(施万细胞|原代细胞)
- 来源:小鼠大脑神经组织
- 细胞特征:贴壁 ,梭形、多角形
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:阳性表达S-100、GFAP和CD90
小鼠雪旺细胞,又称施万细胞,是一种胶质细胞,主要存在于大脑神经组织中,是周围神经系统的重要组成部分。
雪旺细胞功能非常多样、活跃,除为轴突提供支持外,还分泌多种活性物质,如神经营养因子、细胞外基质及粘附因子等,对维持神经纤维的存活、生长、再生都有意义。
小鼠雪旺细胞的形态和结构十分复杂和多样化:外表面有基膜,能够包裹在神经纤维上,形成髓鞘以保护神经元。小鼠雪旺细胞的核呈长卵圆形,核周有少量胞质,胞膜与基膜相贴形成轴突系膜。
雪旺细胞在神经元生长和连接过程中具有选择性的引导作用:一旦神经元与雪旺细胞接触,神经纤维的延伸将严格限制在Bungner带内。
小鼠雪旺细胞特性
雪旺细胞来源于小鼠的正常脑组织,GFAP免疫荧光染色阳性,细胞纯度高于90%,不含有多种病原体和微生物。
雪旺细胞通过酶解法制备,阳性表达S-100、GFAP和CD90,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
小鼠雪旺氏细胞分离自神经组织,可分为有髓和无髓神经纤维,外表面有基膜,促进神经元存活及轴突再生。
雪旺细胞的胞核呈长卵圆形,有基膜和外层胞膜,形成轴突系膜,细胞质构成髓鞘。
神经元延伸受限于与雪旺细胞的接触,限制在Bungner带内。
小鼠雪旺细胞参数表
细胞名称 | 小鼠雪旺细胞(小鼠原代细胞) |
细胞别称 | 小鼠雪旺氏细胞、施万细胞、schwann,雪旺细胞 |
组织来源 | 小鼠大脑神经组织 |
细胞鉴定 | GFAP免疫荧光染色为阳性 |
经鉴定细胞纯度 | 高于90% |
不含病原体 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
细胞生长方式 | 长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养 |
细胞制备方法 | 酶解法 |
鉴定阳性表达 | S-100、GFAP和CD90 |
细胞简介 | 小鼠雪旺氏细胞来源于小鼠大脑神经组织 |
培养方式 | 贴壁培养 |
生长环境 | 无菌环境 |
培养温度 | 37°C |
培养气氛 | 5% CO2 |
培养液量 | 通常使用足够覆盖细胞单层的培养液量。 |
培养周期 | 每隔2-3天更换培养液,定期观察细胞状态并进行传代。 |
传代方法 | 胰蛋白酶或其他适当的酶解方法。 |
冻存条件 | 冻存液中添加适当的冻存保护剂,存储温度为-80°C。 |
解冻方法 | 迅速将细胞培养瓶放入37°C的水浴中解冻,并迅速转移到含有适当培养基的培养瓶中。 |
培养教程
原代小鼠雪旺细胞培养
准备培养瓶:使用预涂覆了多聚赖氨酸的培养瓶(T-75培养瓶)。先向瓶内加入10ml无菌水,再加入15μl多聚赖氨酸原液。将培养瓶放入培养箱中,在37°C条件下孵育至少一小时以确保表面充分涂覆。
准备培养基:在无菌环境下准备完全培养基,确保添加物已充分混合。用70%酒精消毒培养基和添加物的外部表面,然后放置在无菌地方。
处理培养瓶:用无菌水冲洗预涂覆多聚赖氨酸的培养瓶两次,然后向瓶内加入20ml完全培养基。将培养瓶置于超净台中,准备融化雪旺细胞。
融化雪旺细胞:将培养瓶置于37°C水浴中,轻轻地握住并旋转小瓶直到细胞完全融化。立即将小瓶取出,用70%酒精冲洗并放置于无菌环境中。小心打开盖子,使用1ml的eppendorf吸管将细胞悬浮。
细胞接种:将悬浮雪旺细胞加入到预涂覆多聚赖氨酸的培养瓶中,推荐的接种密度应大于10,000个细胞/cm²。
培养雪旺细胞:盖上盖子后轻轻摇晃培养瓶,以确保细胞均匀分布。放置于培养箱中,至少16小时内不要移动培养物。第二天更换培养基,并每隔一天更换一次培养基。
培养维护:当培养物达到50%融合时,每天更换培养基直至培养物大约达到80%融合。
传代培养:当细胞达到90%融合时,需进行传代培养。准备预涂覆多聚赖氨酸的培养瓶,并用DPBS冲洗细胞。使用胰酶/EDTA消化液孵化细胞,收取细胞并将其移入离心管中。最后,在培养基中重悬细胞并计数,将其接种到新的培养瓶中。
安全注意事项:在处理细胞时,应注意潜在的风险。采取适当的保护措施,如戴手套和安全镜,并避免用嘴吸。操作时务必在无菌环境中进行,以确保细胞的纯度和质量。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- 乳鼠雪旺氏细胞的培养纯净和形态学研究 中华显微外科杂志 > 1991年1期
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