
NU-DUL-1细胞(人弥漫性组织细胞性淋巴瘤)
- 来源:腹膜积液
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:LN-1+;LN-2+;LN-3+(抗HLA-Dr);BA-1+(CD24);CALLA(J5)(常见ALL抗原;CD10)+;
NU-DUL-1细胞系源自1985年从一名43岁白人男性的腹膜积液中分离,该患者被确诊为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。NU-DUL-1细胞系以悬浮方式生长,具有典型的淋巴母细胞形态。NU-DUL-1细胞系在研究未分化淋巴瘤的细胞生物学特性、基因组重排和分子机制方面,具有重要的实验价值。
NU-DUL-1细胞系的染色体核型为亚二倍体,带有复杂的染色体异常,包括14号染色体的易位,但与11号或18号染色体无关,可能代表一种新的易位变异。此外,推测该细胞系Y染色体缺失。基于染色体和遗传分析,NU-DUL-1细胞系为研究DLBCL中特殊的基因组重排提供了一个新的模型。
NU-DUL-1细胞特性特征
抗原表达:LN-1+、LN-2+、LN-3+(抗HLA-Dr);BA-1+(CD24);CALLA(J5)+(CD10);BA-2-(CD9);OKM1-(髓系标志物);Leu-7-(自然杀伤T细胞标志物);
多个T细胞标志物(如OKT-3、OKT-4等)呈阴性;EBNA-(爱泼斯坦-巴尔核抗原)阴性
免疫表型:NU-DUL-1细胞表达早期B细胞分化的标志物,显示出未分化淋巴瘤的特征。
sIg:NU-DUL-1细胞系对表面免疫球蛋白(sIg)呈阴性。
NU-DUL-1细胞系还表现出与恶性脑脊液的关联,表明其可能具有高度侵袭性或转移性特征
NU-DUL-1细胞参数表
细胞名称 | NU-DUL-1细胞(人弥漫性组织细胞性淋巴瘤) |
别称 | NUDUL-1; NUDUL1 |
种属 | 人 |
性别/年龄 | 男 / 43岁 |
组织来源 | 腹腔积液(来源于转移部位:恶性脑脊液) |
疾病类型 | 弥漫性大B细胞淋巴瘤 |
细胞类型 | 淋巴细胞 |
形态特征 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
倍增时间 | 约30-36小时,每周2-3次 |
培养基和添加剂 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% P/S(抗生素) |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳;湿度:70%-80% |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO 或推荐无血清冻存液(CX001) |
传代比例/消化方法 | 建议1:2传代,使用0.25%胰蛋白酶消化 |
生物安全等级 | BSL-1 |
抗原表达 | LN-1+、LN-2+、LN-3+(抗HLA-Dr)、BA-1+(CD24)、CALLA(J5)+(CD10)、BA-2-(CD9)、OKM1-、Leu-7-、EBNA-(阴性) |
基因表达 | sIg-(阴性),表达早期B细胞分化标志物 |
保藏机构 | ATCC; CRL-2969; DSMZ; ACC |
用途 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
备注 | 悬浮细胞,注意离心收集细胞悬液,请勿直接倒掉培养液;显微镜下确认细胞状态。 |
培养教程
NU-DUL-1人弥漫性组织细胞性淋巴瘤培养教程
NU-DUL-1细胞复苏步骤
从液氮中取出NU-DUL-1细胞冻存管后,立即放入37℃的水浴中迅速解冻,持续1-2分钟,轻轻摇晃以加速解冻过程。
准备完全培养基:RPMI-1640培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素(P/S)。
解冻完成后,缓慢将NU-DUL-1细胞悬液加入到5 mL预热的完全培养基中,确保混合均匀。
将混合后的NU-DUL-1细胞悬液在1000 RPM下离心3-5分钟,弃去上清。
加入4-6 mL新鲜的完全培养基,轻轻吹打混匀,以确保NU-DUL-1细胞均匀分布。
将NU-DUL-1细胞悬液转移至T25培养瓶中,并放入37℃、5% CO₂的培养箱中过夜培养。
NU-DUL-1细胞传代操作
传代时机:当NU-DUL-1细胞密度达到80%-90%时,需进行传代。
弃去上清液,使用无钙、无镁的PBS(磷酸盐缓冲液)缓冲液洗涤NU-DUL-1细胞1-2次。
根据NU-DUL-1细胞状态,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA混合溶液,消化1-2分钟,并使用显微镜观察细胞脱落情况。
当细胞大部分变圆脱落时,立即终止消化,加入含10% FBS的完全培养基。
将消化后的NU-DUL-1细胞在1000 RPM下离心3-5分钟,弃去上清。
重悬NU-DUL-1细胞于新鲜培养基中,并根据所需的细胞密度,以1:2至1:5的比例分配至新培养瓶。
NU-DUL-1细胞冻存步骤
使用90%胎牛血清和10%二甲基亚砜(DMSO)制备NU-DUL-1细胞的冻存液。
收集生长状态良好的NU-DUL-1细胞,在1000 RPM下离心3-5分钟,弃去上清。
将NU-DUL-1细胞重悬于冻存液中,按1 mL/冻存管的量分装。
逐步降低温度,将冻存管置于程序性降温盒中,随后放入液氮中长期保存。
注意事项
NU-DUL-1细胞为悬浮细胞,操作时需避免直接倾倒,建议通过离心收集以减少细胞损失。
保持NU-DUL-1细胞培养环境的无菌操作,定期检查培养基的颜色和细胞生长情况,及时更换培养基以维持良好的生长环境。
传代时避免过度消化,确保NU-DUL-1细胞活性保持最佳状态。
进行复苏、冻存或传代操作时,建议拍照记录NU-DUL-1细胞状态,确保操作的可追溯性。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 12,14 |
D7S820 | 11,13 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 8,13 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 13,14 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 22 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 10,13 |
TH01 | 9,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 |