Raji细胞（人Burkitt's淋巴瘤细胞）

Raji细胞株由Pulvertaft RJV于1963年从一位11岁黑人男孩的左上颌骨Burkitt淋巴瘤中建立。这是第一个从人类造血系统中分离出来并能够连续传代的细胞系。Raji细胞是肿瘤B淋巴细胞，呈悬浮生长的淋巴母细胞样形态，倍增时间约为24-36小时。

Raji细胞具有46条雄性二倍体染色体，偶尔会出现含有47条染色体的细胞，额外染色体通常属于“E”组，且可能存在6%的多倍体。

Raji细胞特征特性

• EBV状态：EBNA阳性，含有Epstein-Barr病毒（EBV）
  

• 病毒抗性：对脊髓灰质炎病毒和水疱性口炎病毒具有部分抗性

• 表面标志物：表达B细胞特异性标志物
  

• 病毒蛋白表达：表达EBV相关蛋白，如EBNA（Epstein-Barr病毒核抗原）

• EBV基因组：通过PCR证实该品系检测出爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）病毒DNA序列呈阳性。

• 肿瘤相关基因：可能存在Burkitt淋巴瘤相关的基因突变或重排

Raji细胞参数表

Raji细胞人Burkitt's淋巴瘤细胞培养教程

Raji细胞复苏

• 从液氮中取出Raji细胞冻存管，在37℃水浴中快速解冻。

• 将Raji细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。

• 以1000-1200 rpm离心3-5分钟以去除冷冻保护剂。

• 弃去上清，用新鲜培养基重悬Raji细胞。

• 将Raji细胞转移到T25培养瓶中，开始培养。

Raji细胞日常培养

• Raji细胞为悬浮细胞，无需胰酶消化。

• 每2-3天观察Raji细胞状态，根据细胞密度决定是否传代。

• 保持Raji细胞密度在4×10^5 - 2×10^6 cells/mL之间。

Raji细胞传代方法

• 方法一：直接补充新鲜培养基稀释Raji细胞。

• 方法二：离心收集Raji细胞，弃去旧培养基，用新鲜培养基重悬。

• 传代比例通常为1:2到1:4，具体根据Raji细胞生长状态调整。

Raji细胞冻存

• 准备冻存液：90% FBS + 10% DMSO，或55%培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。

• 收集对数生长期的Raji细胞，调整密度至约1×10^7 cells/mL。

• 将Raji细胞悬液与等体积冻存液混合。

• 分装到冻存管中，每管1 mL。

• 使用程序降温盒或-80℃冰箱缓慢降温，24小时后转入液氮中长期保存。

Raji细胞培养注意事项

• 定期检查Raji细胞的形态和生长状态。

• 保持无菌操作，预防Raji细胞培养中的污染。

• 避免Raji细胞过度生长或密度过低。

• 定期进行Raji细胞活力、无菌性和表型检测。

常见问题及解决方案

Raji细胞生长缓慢或停滞

• 原因：

• 培养基成分不足或过期，影响Raji细胞生长。

• 培养环境不适宜（温度、CO2浓度、湿度）。

• Raji细胞密度过高或过低。

  
  

• 解决方案

• 确保使用新鲜的、符合规格的培养基。

• 检查培养环境，确保温度为37℃，CO2浓度为5%，湿度为70%-80%。

• 调整Raji细胞密度至4×10^5 - 2×10^6 cells/mL。

Raji细胞污染

• 原因：

• 无菌操作不当，导致Raji细胞培养污染。

• 培养基或试剂污染。

  
  

• 解决方案：

• 严格执行无菌操作，使用无菌器具和试剂。

• 定期更换培养基，避免长期使用同一批次培养基。

• 对培养基和试剂进行无菌检测，确保Raji细胞的健康生长。

Raji细胞形态异常

• 原因：

• 培养基成分不适宜，影响Raji细胞正常形态。

• 细胞过度传代。

  
  

• 解决方案：

• 使用优化的Raji细胞专用培养基。

• 避免Raji细胞过度传代，保持适当的传代频率（每2-3天传代一次）。

Raji细胞活力低

• 原因：Raji细胞复苏不当。培养基成分不足。

  
  

• 解决方案：

• 复苏时快速解冻Raji细胞，在37℃水浴中不超过2分钟。

• 确保培养基中含有足够的营养成分和生长因子。