
ramos细胞系(人B淋巴细胞瘤细胞系)
- 来源:B淋巴细胞
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:表达白细胞介素4(IL-4)和低亲和力IgE(CD23)
Ramos [RA 1] 细胞系是一种人类B淋巴细胞瘤系,源自一位3岁白人男性伯基特淋巴瘤患者(美国)的B淋巴细胞,是从患者的血液中分离。ramos细胞系广泛用于免疫学领域的研究。亲本系Ramos [RA 1] 细胞和其衍生系Ramos.2G6.4C10在每个细胞中均拥有约1500个IL-4结合位点。
ramos细胞系特征
EBV状态:Ramos细胞为EBV(Epstein-Barr病毒)阴性,这意味着它们不含有EBV病毒。对爱泼斯坦-巴尔病毒呈阴性。
受体表达:ramos细胞表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23),每个细胞表面大约有1500个IL-4的结合位点。
免疫球蛋白:Ramos细胞分泌IgM(λ链),并表达膜型和分泌型的免疫球蛋白(表面和分泌型)。
致瘤性:ramos细胞在裸鼠体内形成肿瘤。
ramos细胞系参数表
细胞名称 | Ramos细胞系(人B淋巴细胞瘤细胞系) |
英文名称 | Human B lymphoma cells |
细胞别称 | Ramos [RA 1];RAMOS; Ramos 1; RA 1; RA.1; Ra #1; Ra No. 1; Ramos(RA1); Ramos-RA1; Ramos (RA 1); Ramos (RA) |
种属来源 | 人(Homo sapiens) |
组织来源 | B淋巴细胞 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | Burkitt淋巴瘤 |
供体信息 | 3岁白人男性 |
建系时间 | 1972年 |
生物安全 | 1级 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长,细胞大小约10-12μm |
倍增时间 | 约48小时,饱和密度1-2×10^6 cells/mL,克隆形成率约30-40% (软琼脂) |
培养基 | RPMI-1640,10% 胎牛血清 (FBS),1% 青霉素/链霉素 (P/S) |
培养环境 | 37°C,5% CO2 |
传代比例 | 1:2 至 1:4,换液频率每2-3天,最佳密度3×10^5-5×10^5 cells/mL |
冻存液 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,储存温度液氮中长期保存 |
EBV状态 | EBV阴性 |
受体表达 | IL-4受体, 低亲和性IgE受体 (CD23),IL-4结合位点约1500个/细胞 |
免疫球蛋白 | 分泌IgM (λ链),表达膜型和分泌型 |
染色体数 | 46,基因突变c-myc转位 t(8;14) |
CD抗原 | CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD77+ |
其他标记 | HLA-DR+, sIgM+, sIgD- |
细胞因子 | IL-6, IL-10 |
药物敏感 | 对多种化疗药物敏感 |
主要用途 | B细胞功能研究, 免疫球蛋白表达研究, 细胞信号转导研究, 抗体生产, 药物筛选 |
支原体检测 | 阴性 |
细菌真菌 | 阴性 |
细胞鉴定 | STR分析确认 |
保藏信息 | ATCC编号 CRL-1596;DSMZ编号 ACC-603;ECACC编号 85030802, 91030710 |
培养教程
ramos人B淋巴细胞瘤细胞系培养教程
传代步骤
观察细胞:使用倒置显微镜检查Ramos细胞的形态和生长状态,确保细胞处于对数生长期。
离心细胞:将培养瓶中的Ramos细胞悬液转移至离心管中,以1200 rpm(约250 g)离心3分钟。
弃去上清:小心吸去上清液,保留Ramos细胞沉淀。
重悬细胞:加入适量的新鲜培养基,轻轻吹打使Ramos细胞重新悬浮均匀。
计数细胞:使用细胞计数板或自动细胞计数仪计数Ramos细胞,确保细胞密度在3×10^5至5×10^5 cells/mL。
接种细胞:将Ramos细胞悬液按1:2至1:4的比例接种到新的培养瓶中,加入足量的新鲜培养基。
培养细胞:将培养瓶放入培养箱中继续培养Ramos细胞,保持适宜的生长环境。
冻存方法
制备冻存液:配制冻存液,成分为55%基础培养基、40%胎牛血清(FBS)和5%二甲基亚硫酰胺(DMSO),适用于Ramos细胞的冻存。
收集细胞:离心Ramos细胞悬液,弃去上清液,保留细胞沉淀。
重悬细胞:用制备好的冻存液重悬Ramos细胞,并分装到冻存管中。
缓慢降温:将冻存管置于-80°C冰箱中预冻24小时,然后转移至液氮中长期保存Ramos细胞。
复苏方法
快速解冻:将冻存管置于37°C水浴中快速解冻(约1-2分钟),以恢复Ramos细胞的活性。
加入培养基:将解冻后的Ramos细胞悬液缓慢加入预热的培养基中,混匀。
离心细胞:以1200 rpm离心3分钟,弃去上清。
重悬细胞:用新鲜培养基重悬Ramos细胞,并将其转移到培养瓶中。
培养细胞:将培养瓶放入37°C,5% CO2培养箱中继续培养Ramos细胞。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D1S1656 | 12,15.3 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 14,15 |
D5S818 | 7,12 |
D6S1043 | 13,15 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 13 (CLS=302007) |
13,16 (ATCC=CRL-1596; CCRID; DepMap=ACH-001636; DSMZ=ACC-603; Technion Genomics Center BCF; PubMed=20922763; PubMed=25877200) | |
D10S1248 | 14,15 |
D12S391 | 19,22 |
D13S317 | 12,13,14 (CLS=302007) |
13,14 (ATCC=CRL-1596; CCRID; COG; DepMap=ACH-001636; DSMZ=ACC-603; ECACC=85030802; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB9119; KCLB=21596; PubMed=20922763; PubMed=25877200) | |
D16S539 | 10,13 |
D18S51 | 14,15 (CLS=302007; DSMZ=ACC-603) |
15 (ATCC=CRL-1596; CCRID; DepMap=ACH-001636; Technion Genomics Center BCF; PubMed=20922763; PubMed=25877200) | |
D19S433 | 14,15.2 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 20,24 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 6,8,21 (CLS=302007) |
8,21 (ATCC=CRL-1596; CCRID; DepMap=ACH-001636; DSMZ=ACC-603; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) | |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 15,16 |