
SU-DHL-4细胞(人B淋巴瘤细胞)
- 来源:腹腔积液
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:蛋白质表达: 较高表达水平:Bax, Bak, AIF (凋亡诱导因子) ;高活性:Caspase-9
SU-DHL-4细胞系是一种来自38岁白人男性患者腹膜积液的人B淋巴瘤细胞系,具体表现为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。SU-DHL-4细胞系于1976年建立,是研究B细胞淋巴瘤的重要模型。SU-DHL-4细胞具有14号和18号染色体之间的易位,并且其BCL-2基因发生了显著的重排。
SU-DHL-4细胞特征特性
SU-DHL-4细胞免疫球蛋白表达:阳性:IgG+, Kappa+;阴性:IgM-, IgA-, IgD-, Lambda-
较高蛋白质表达水平:Bax, Bak, AIF (凋亡诱导因子);高活性:Caspase-9
SU-DHL-4细胞对爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)呈阴性
SU-DHL-4细胞对念珠菌摄入呈阴性
SU-DHL-4细胞参数表
细胞名称 | SU-DHL-4细胞(人B淋巴瘤细胞) |
细胞别称 | SUDHL4; Sudhl4; SUDHL-4; Sudhl-4; SuDHL 4; SUD-4; SUD4; SU4; StanfordUniversity-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4; DHL-4; DHL4 |
细胞类型 | 人弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞 |
来源 | 38岁白人男性腹膜渗出物 |
建立时间 | 1976年 |
形态生长特性 | 淋巴母细胞样; 悬浮生长 |
倍增时间 | 约40小时 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 青霉素-链霉素 |
培养环境 | 37°C, 5% CO2 |
传代 | 80-90%传代 |
推荐接种密度 | 3-5 x 10^5 cells/mL |
冻存条件 | 完全培养基 + 5-10% DMSO,液氮储存 |
染色体/基因 | t(14;18)染色体易位 / BCL-2基因重排 |
免疫球蛋白 | IgG+, Kappa+, IgM-, IgA-, IgD-, Lambda- |
表面标记 | CD19+, CD20+, CD10+ (待确认) |
蛋白/酶表达 | 高表达:Bax, Bak, AIF / 高caspase-9活性 |
病毒/功能特征 | EBV阴性 / 念珠菌摄入阴性 |
研究用途 | 淋巴瘤研究、药物筛选、免疫学研究、BCL-2靶向研究 |
模型系统 | 体外DLBCL模型、异种移植模型(待确认) |
鉴定/检测 | STR分析 / 细菌、真菌、支原体检测 |
细胞活力 | 推荐>90% |
安全等级 | BSL-1; 遵循标准细胞培养安全规程 |
关键文献 | Epstein AL, et al. Cancer. 1976;37:2158-76. |
培养教程
SU-DHL-4人B淋巴瘤细胞培养教程
细胞复苏
从液氮中取出SUDHL4细胞冻存管,迅速置于37°C水浴中解冻,并轻轻摇动管子加速解冻。
解冻后,用75%酒精消毒管壁。在无菌条件下,将SUDHL4细胞悬液转移到含有10 mL完全培养基的离心管中。
以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。
加入适量新鲜培养基重悬SUDHL4细胞,并转移至T25培养瓶中。
将培养瓶置于37°C、5% CO2培养箱中培养。
细胞传代
当SUDHL4细胞密度达到80%-90%时,进行传代。
将SUDHL4细胞悬液转移到离心管中,以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。
用新鲜培养基重悬SUDHL4细胞,按1:2或1:3的比例进行传代。
将重悬后的SUDHL4细胞转移到新的培养瓶中,继续在37°C、5% CO2培养箱中培养。
冻存步骤
将培养中的SUDHL4细胞悬液转移到离心管中,以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。
用PBS洗涤SUDHL4细胞,再次离心,并弃去上清液。
使用完全培养基加10% DMSO作为冻存液。
将SUDHL4细胞重悬于冻存液中,细胞浓度约为1 x 10^6个SUDHL4细胞/mL。
将SUDHL4细胞悬液分装到冻存管中,每管1 mL。
逐步降温:将冻存管放入程序降温盒中,置于-80°C冰箱中过夜。
第二天,将冻存管转移到液氮中进行长期保存。
注意事项
无菌操作:确保所有操作在无菌条件下进行,以防止SUDHL4细胞污染。
细胞观察:定期观察SUDHL4细胞状态,确保细胞形态正常且无污染。
质量控制:定期进行细菌、真菌和支原体检测,以确保SUDHL4细胞培养的质量和安全性。
如何确保SUDHL4细胞在培养过程中保持高活性
使用优化的培养基:采用为SUDHL4细胞系优化的完全培养基,经过多次实验验证,能够加速SUDHL4细胞生长并优化细胞状态,保持细胞的高活性。
定期传代
传代密度:当SUDHL4细胞密度达到80%-90%时传代。
传代方法:将SUDHL4细胞悬液转移到离心管中,以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。加入新鲜培养基重悬SUDHL4细胞,按1:2或1:3的比例传代。
质量控制
无菌操作:确保所有操作在无菌条件下进行,以避免SUDHL4细胞污染。
定期检测:进行细菌、真菌和支原体检测,确保培养环境无污染。
细胞状态观察:定期显微镜下观察SUDHL4细胞形态,确保细胞状态正常。
SUDHL4细胞的传代密度对生长的影响
传代密度的影响
适宜传代密度:当SUDHL4细胞密度达到80%-90%时传代,以保证细胞在最佳状态下生长,避免过度拥挤或过于稀疏。
过高密度:过高的密度可能会因为营养和空间限制导致SUDHL4细胞增殖受限,增加细胞凋亡并降低生长速率。
过低密度:过低的密度会减少SUDHL4细胞间信号传递,可能导致增殖缓慢,甚至影响细胞活力。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17,19 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 14,16 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 19,21 |
Penta D | 9,14 |
Penta E | 7,11 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 9,11 |
vWA | 18,19 |
参考文献
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