
SK-N-MC细胞(人神经上皮瘤细胞)
- 来源:脑;眼眶上区神经上皮瘤转移灶
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:90%MEM+10%FBS+1%P/S
- 其他:SK-N-MC细胞具有中度的多巴胺-β-羟化酶活性,可以通过甲醛诱导荧光指示检测细胞内的儿茶酚胺
SK-N-MC细胞是一种人类神经源性细胞系,最早于1971年9月由Biedler JL分离自一位14岁白种女童的眼眶上区神经上皮瘤转移灶。最初被认为是神经母细胞瘤细胞系,但后续研究表明该细胞系实际上源于Askin肿瘤。常用于神经系统疾病及肿瘤生物学研究。
SK-N-MC细胞是一种假二倍体细胞系,雌性(XX)染色体,染色体数目主要在二倍体范围内,模式染色体数为46。在染色体组成方面,SK-N-MC细胞表现出多种异常,缺失N3和N10染色体,部分染色体如N1、N2、N4等为单体,同时出现多个标记染色体,包括1p+、11q+等。其中特定标记染色体与R.C.Seeger等研究中提到的相符。
SK-N-MC细胞特性特征
酶活性:SK-N-MC细胞具有中度的多巴胺-β-羟化酶活性,能够合成和代谢儿茶酚胺。
荧光诱导:用甲醛处理后可诱导出荧光,表明SK-N-MC细胞内存在儿茶酚胺。
抗原与基因特征:血型:O型血;Rh+。
同工酶表达:AK-1,1;ES-D,2;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,2;PGM1,1;PGM3,1-2
致瘤性:SK-N-MC细胞在仓鼠的脸颊和裸小鼠身上形成肿瘤。
转移性:主要发生在眶上区
SK-N-MC细胞参数表
细胞名称 | SK-N-MC人神经上皮瘤细胞(ATCC: HTB-10) |
别称 | SKNMC; SK-NM-C; SK-NMC |
来源 | 脑;眼眶上区神经上皮瘤转移灶 |
种属 | 人 |
年龄性别 | 14岁,女性 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | ~32-48小时 |
无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
安全性等级 | 1 |
运输方式 | 干冰运输或复苏发货 |
培养基组成 | MEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳 |
传代比例 | 1:3 - 1:4 |
换液频率 | 2~3次/周 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;保存于液氮 |
染色体特征 | 假二倍体,通常为43~46,XX |
标记染色体 | 包括1p+、der(3)t(2;3)(q24;q27)、del(4)(p12)等 |
酶活性 | 中度多巴胺-β-羟化酶活性 |
荧光诱导特性 | 可用甲醛诱导出荧光,表明细胞内存在儿茶酚胺 |
抗原表达 | O型血;Rh+ |
同工酶表达 | AK-1, 1;ES-D, 2;G6PD, B;GLO-I, 1-2;Me-2, 2;PGM1, 1;PGM3, 1-2 |
致瘤性 | 在仓鼠和裸小鼠身上形成肿瘤 |
转移性 | 主要发生在眶上区 |
培养教程
SK-N-MC人神经上皮瘤细胞培养教程
SK-N-MC细胞复苏
将水浴锅预热至37℃,并准备4 mL完全培养基(MEM + 10% FBS + 1% P/S)。
迅速将SK-N-MC细胞的冻存管放入37℃水浴中,解冻时间应控制在1分钟左右。
解冻后,立即用4 mL完全培养基稀释细胞悬液,轻轻混匀,以确保SK-N-MC细胞均匀分布。
在1000 RPM条件下离心4分钟,弃去上清,以去除解冻过程中的杂质。
用1-2 mL新鲜培养基重悬SK-N-MC细胞,并将细胞悬液转移至培养瓶中。
将培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中过夜培养,确保SK-N-MC细胞能够顺利贴壁。
SK-N-MC细胞传代
当SK-N-MC细胞的密度达到80%-90%时,进行传代操作。
弃去旧的培养基,用无钙镁的PBS轻轻洗涤SK-N-MC细胞1-2次,以去除残留的培养基成分。
加入1 mL消化液(0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA),覆盖SK-N-MC细胞表面,并放置于37℃培养箱中1-2分钟。
观察SK-N-MC细胞变圆并脱落后,立即加入完全培养基终止消化过程。
在1000 RPM条件下离心4分钟,弃去上清,确保SK-N-MC细胞的完整性。
用新鲜培养基重悬SK-N-MC细胞,并按1:2的比例分装到新的培养瓶中,补加8 mL完全培养基。
SK-N-MC细胞冻存
当SK-N-MC细胞生长状态良好时,准备进行细胞冻存。冻存液配方为55%培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。
弃去培养基后,用PBS清洗SK-N-MC细胞,然后加入胰酶进行消化。
细胞回缩脱落后,加入冻存液终止消化反应。
在1000 RPM条件下离心4分钟,弃去上清后,用冻存液重悬SK-N-MC细胞,确保DMSO浓度为10%。
将SK-N-MC细胞悬液分装至冻存管中,并使用程序降温盒在-80℃预冻2小时,随后转移至液氮中长期保存。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 17,21 |
D3S1358 | 15 (ATCC=HTB-10; CLS=300340; KCLB=30010; PubMed=19787792; PubMed=30879952) |
15,16 (CCRID; DSMZ=ACC-203; PubMed=24312454; PubMed=25010205) | |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 8 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13,14 (ATCC=HTB-10; CCRID; CLS=300340; DSMZ=ACC-203; PubMed=24312454; PubMed=25010205) |
14 (PubMed=19787792) | |
D19S433 | 13,15.2 (ATCC=HTB-10; CCRID; PubMed=19787792; PubMed=24312454; PubMed=25010205) |
13,16 (DSMZ=ACC-203) | |
D21S11 | 30,31.2 (ATCC=HTB-10; CLS=300340; COG; DSMZ=ACC-203; PubMed=19787792; PubMed=24312454; PubMed=25010205) |
30,31.2,32.2 (CCRID) | |
FGA | 21,25 |
Penta D | 8,9,13 (DSMZ=ACC-203) |
9,13 (ATCC=HTB-10; CLS=300340) | |
Penta E | 16,18 |
SE33 | 16 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 9,11 (ATCC=HTB-10; CCRID; CLS=300340; COG; DSMZ=ACC-203; KCLB=30010; PubMed=24312454; PubMed=25010205; PubMed=30879952) |
11 (PubMed=19787792) | |
vWA | 17,18 |