
Y79细胞系(人视网膜母细胞瘤细胞)
- 来源:视网膜
- 细胞特征:悬浮生长, 圆形、成簇细胞样
- 培养基:RPMI-1640+20% FBS+1% P/S
- 其他:Y79细胞可以在软琼脂中生长,并能在兔子体内引发肿瘤
Y79细胞系是来源于视网膜母细胞瘤的多细胞簇细胞系,最初由Reid TW及其团队于1971年1月建立。Y79细胞源自一名年仅两岁半的白人女性患者的右眼切除肿瘤组织,患者有视网膜母细胞瘤的家族遗传背景。
Y79细胞系显示出多倍体特征,表现为双着丝粒、断裂、粉碎及分钟体等异常。
Y79细胞系特性特征
超微结构:Y79细胞的超微结构与原始肿瘤相似,包括核膜内折、三层膜结构、大的被膜小泡、环孔板、微管、中心粒和基粒等特征。
生长特性:Y79细胞为悬浮生长型,呈球形,通常形成葡萄串状多细胞聚集体。
增殖能力:Y79细胞具有较强的增殖能力,通常每周可以进行2-3次传代,传代比例为1:3至1:4。
同工酶:Y79细胞的同工酶特征包括AK-1(1),ES-D(1),G6PD(B),GLO-I(2),PGM1(1)。
肿瘤形成能力:Y79细胞可以在软琼脂中生长,并能在兔子体内引发肿瘤。
Y79细胞系参数表
细胞名称 | Y79细胞系(人视网膜母细胞瘤细胞) |
细胞别称 | 人视网膜母细胞瘤细胞;Y79; GM01232; GM01232E |
来源 | 人视网膜;2.5岁白人女性,具有视网膜母细胞瘤家族史 |
建立信息 | 1971年1月,由T.W. Reid及其同事建立 |
细胞特性 | 悬浮生长;圆形,成簇细胞样,葡萄串状多细胞聚集体 |
染色体特征 | 多倍体;双着丝粒、断裂、粉碎和分钟染色体异常 |
超微结构 | 核膜内折、三层膜结构、大的被膜小泡、环孔板、微管、中心粒、基粒 |
基因特征 | RB1基因部分缺失 |
同工酶 | AK-1(1),ES-D(1),G6PD(B),GLO-I(2),PGM1(1) |
培养基 | RPMI-1640 + 20% FBS + 1% 青霉素/链霉素 |
培养条件 | 37℃,95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代信息 | 密度80%-90%;比例1:3至1:4;每周2-3次;10代以内 |
冻存条件 | 无血清冻存液;液氮储存 |
细胞规格 | 1x10^6 cells/T25或1mL冻存 |
质量控制 | 支原体、细菌、真菌检测均阴性 |
生物安全等级 | BSL-1 |
应用与限制 | 用于基础研究和药物筛选;不可用于疾病治疗 |
供应信息 | 现货,约1周;仅限科研用途 |
收货处理 | 75%酒精消毒瓶壁,37℃培养箱放置2-4小时 |
特殊说明 | 细胞成团聚集生长,请勿人为分散;可在软琼脂中生长,能在兔子体内引发肿瘤 |
培养教程
Y79人视网膜母细胞瘤细胞培养教程
Y79细胞培养基准备
基础培养基:RPMI-1640
胎牛血清:添加20%优质胎牛血清(FBS)以支持Y79细胞的生长
抗生素:加入1%青霉素/链霉素(P/S)以防止Y79细胞的污染
可选培养基:直接使用Y79细胞的完全培养基(如YCM-0334),以优化Y79细胞的培养条件
Y79细胞培养条件
温度:37℃,这是Y79细胞的最佳生长温度
气相:95%空气,5%二氧化碳,适合Y79细胞的生理环境
培养容器:使用适合悬浮Y79细胞的培养瓶或培养皿
Y79细胞复苏操作
从液氮中取出Y79细胞冻存管,并迅速在37℃水浴中解冻。
将解冻后的Y79细胞悬液转移至含有预热培养基的离心管中。
以1000 RPM离心5分钟,弃去上清液以获得Y79细胞。
用新鲜培养基重悬Y79细胞,并转移到培养瓶中进行培养。
Y79细胞日常培养
每2-3天观察Y79细胞的生长状态。
注意Y79细胞以团状形式生长,切勿人为分散Y79细胞团。
Y79细胞传代操作
频率:每周传代2-3次以保持Y79细胞的活力
密度:当Y79细胞密度达到80%-90%时进行传代
比例:1:3至1:4以保持Y79细胞的最佳生长状态
步骤:
收集Y79细胞悬液,1000 RPM离心8-10分钟。
弃去上清液,用新鲜预热培养基重悬Y79细胞。
按1:3至1:4的比例将Y79细胞分装到新的培养瓶中。
Y79细胞换液
可采用半数换液方式:弃去一半的培养基,然后加入等量新鲜培养基以维持Y79细胞的生长。
Y79细胞冻存
使用无血清冻存液以保护Y79细胞。
将Y79细胞悬液与冻存液混合均匀。
分装到冻存管中,并置于-80℃冰箱或液氮中长期保存Y79细胞。
注意事项
所有操作需在无菌条件下进行,以确保Y79细胞的纯净性。
定期检查Y79细胞是否有污染,如支原体、细菌和真菌。
建议使用10代以内的Y79细胞进行实验,以确保细胞特性的稳定性。
Y79细胞自然聚集成团,不要人为分散。
额外注意
细胞计数:尽管细胞计数对于监控Y79细胞生长和确定传代时机很有用,但由于Y79细胞成簇生长,进行准确计数可能较为困难。
生长因子:标准培养基配方已包含大多数Y79细胞所需的生长因子,因此通常不需要额外添加,除非特定实验有需求。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11 (ICLC=HTL99029) |
11,12 (AddexBio=C0029001/4898; ATCC=HTB-18; CLS=300382; DepMap=ACH-001295; DSMZ=ACC-246; ECACC=86093003; JCRB=JCRB3020; RCB=RCB1645) | |
D7S820 | 8,9 |
D8S1179 | 13,16 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 13,14 |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 30,32 |
FGA | 20,22 (ATCC=HTB-18; DepMap=ACH-001295; DSMZ=ACC-246) |
22 (CLS=300382) | |
Penta D | 12 |
Penta E | 13,18 |
TH01 | 6 (JCRB=JCRB3020) |
6,9.3 (AddexBio=C0029001/4898; ATCC=HTB-18; CLS=300382; DepMap=ACH-001295; ECACC=86093003; ICLC=HTL99029; RCB=RCB1645) | |
6,10 (DSMZ=ACC-246) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15,18 |