
HBE135-E6E7人支气管上皮细胞
- 来源:肺;支气管
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:HBE135-E6E7 细胞专用培养基
- 其他:永生化HBE细胞表达高水平的表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子α(TGF-α)和双调蛋白(AR)mRNA,但不表达表皮生长因子(EGF
HBE135-E6E7人支气管上皮细胞系来源于一位54岁男性的正常支气管上皮细胞,患者因鳞状细胞癌接受了肺叶切除手术。研究人员从其支气管上提取细胞,并通过使用携带人乳头瘤病毒(HPV)E6和E7基因的重组逆转录病毒(LXSN16E6E7)感染原代细胞,成功实现了HBE135细胞永生化。在含有0.4mg/mL G418的选择性培养基中,筛选出带有HPV基因的细胞。
HBE135-E6E7细胞系被广泛用于肺癌及支气管上皮细胞的生长和分化研究。HBE135-E6E7细胞系(ATCC编号:CRL-2741)为研究肺癌发生机制及其潜在治疗方法提供重要的实验平台。
HBE135-E6E7细胞特性特征
基因表达:HBE135-E6E7细胞系表达高水平的表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子α(TGF-α)和双调蛋白(AR)mRNA,但不表达表皮生长因子(EGF)。这种基因表达模式使其成为研究肺癌及相关疾病的重要模型。
永生化机制:HBE135-E6E7细胞通过HPV-16 E6/E7基因的表达实现永生化,这两个基因的表达抑制了细胞周期调控相关蛋白(如p53和Rb),从而使细胞能够无限增殖。
HBE135-E6E7细胞系广泛应用于支气管上皮细胞的生长、分化及其在肺癌发生发展中的研究。
HBE135-E6E7细胞还可作为cDNA微阵列研究的参考,用于分析与临床结果或肿瘤生物学相关的癌症图谱。
HBE135-E6E7人支气管上皮细胞参数表
细胞名称 | HBE135-E6E7(人支气管上皮细胞) |
细胞别称 | HBE 135-E6E7; HBE 135-E6/E7 |
来源 | 正常人支气管上皮细胞(54岁男性,因鳞状细胞癌接受肺叶切除术) |
ATCC货号 | CRL-2741 |
细胞形态 | 上皮细胞样,呈贴壁生长 |
细胞数量 | >1x10^6 细胞 |
生物安全等级 | BSL-2 |
用途 | 仅供科研使用 |
转化机制 | 通过HPV E6/E7基因的表达实现永生化 |
基因特征 | 表达高水平的EGFR、TGF-α和AR mRNA,不表达EGF |
培养基 | HBE135-E6E7 细胞专用培养基 |
传代比例 | 1:2 - 1:3;每2-3次/周 |
培养环境 | 95%空气,5%二氧化碳;培养温度 37℃;湿度 70%-80% |
存储条件 | -80℃或液氮中保存 |
细胞检测 | 细菌检测 阴性;真菌检测 阴性;支原体检测 阴性 |
细胞生长状态 | 形态正常,生长良好 |
增殖特性 | 细胞在体外可持续增殖,适合长期培养 |
应用领域 | 呼吸系统疾病研究、肺癌研究、药物筛选、病毒学研究等 |
参考文献 | 可作为cDNA微阵列研究的参考,用于分析与临床结果或肿瘤生物学相关的癌症图谱。 |
培养教程
HBE135-E6E7人支气管上皮细胞培养教程
HBE135-E6E7细胞复苏
收到HBE135-E6E7细胞后,检查包装是否完好。外壁用75%酒精消毒,确保无污染。
将HBE135-E6E7细胞瓶置于37℃培养箱内静置2-3小时,使细胞适应培养环境。
显微镜下观察HBE135-E6E7细胞的贴壁情况,确保细胞状态正常。
若HBE135-E6E7细胞的生长密度低于60%,应去除运输培养基,加入6-8 mL新配制的完全培养基。
若细胞密度达到70%-80%,可以进行传代操作。
HBE135-E6E7细胞传代
当HBE135-E6E7细胞生长密度达到70%-80%时,建议进行传代。传代比例为1:2至1:3。
使用PBS轻轻洗涤HBE135-E6E7细胞,去除残留的培养基。
加入0.25%胰酶消化细胞,待HBE135-E6E7细胞变圆和脱壁后,轻轻吹打悬浮。
加入新鲜培养基,将HBE135-E6E7细胞重新分装到新的培养瓶中。
传代时,必须用新鲜的培养基替换运输用培养基,确保HBE135-E6E7细胞的正常增殖。
传代后的HBE135-E6E7细胞需放回37℃的培养箱中,维持其增殖和生长。
HBE135-E6E7细胞冻存
HBE135-E6E7细胞在良好生长状态时可进行冻存。冻存液推荐使用含10% DMSO和90% FBS的混合液,将HBE135-E6E7细胞悬浮后分装至冻存管中。
将装有HBE135-E6E7细胞的冻存管在-80℃冰箱中预冻过夜,随后转移至液氮罐中保存,以确保HBE135-E6E7细胞的长期储存。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 9,11 |
D2S1338 | 16,17 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 13,16 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 24,25 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 12,16 |
TH01 | 5,6 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 16,17 |
参考文献
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