
大鼠支气管上皮细胞(原代细胞)
- 来源:支气管组织
- 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
- 培养基:原代细胞专用培养基
大鼠支气管上皮细胞是从大鼠的支气管组织中分离出上皮细胞,利用特定的酶解和分离技术提取细胞而获取。
大鼠支气管上皮细胞具有贴壁生长特性,呈铺路石状或不规则形态。
大鼠支气管细胞及其特征
支气管上皮细胞的组成:由纤毛、无纤毛和能分泌黏液的细胞组成。
主要功能:形成物理屏障,防止有毒物质侵入;产生和分泌化学介质和细胞因子,构建宿主防御系统。
细胞构成:基细胞、杯状细胞和纤毛细胞,形成基底柱状结构,并清除黏液纤毛。
生理变化:包括支气管炎、支气管扩张和支气管癌。
气管结构:包括软骨、肌肉、结缔组织和黏膜构成,气管软骨为"C"字形。
细胞特性:组织来源于正常气管组织;通过广谱角蛋白免疫荧光染色鉴定;细胞纯度高于90%;不含有多种病原体和细菌;细胞生长方式为铺路石状、不规则细胞,贴壁培养。
大鼠支气管上皮细胞参数表
细胞名称 | 大鼠支气管上皮细胞(原代细胞) |
组织来源 | SD大鼠(出生3-4周),5-7只 |
规格 | 5×10^5 cells/T25培养瓶 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养基 | 原代上皮细胞专用培养基 |
细胞污染 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性 |
组织来源 | 正常支气管组织 |
生长状态 | 贴壁生长 |
细胞特性 | 组织来源于实验动物的正常气管组织; 经鉴定细胞纯度高于90%; 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌; 细胞生长方式为铺路石状、不规则细胞 |
细胞鉴定 | 广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性 |
传代特性 | 可传1-2代 |
培养条件 | 37℃,CO2: 5% |
重要性 | 在呼吸系统疾病的发病机制、药物筛选和基础生物学研究中具有重要作用 |
适用领域 | 基础生物学研究、呼吸系统疾病模型构建、药物筛选、毒理学评估 |
培养教程
大鼠支气管上皮细胞培养
传代步骤
当细胞密度达到80%-90%时,即可进行传代培养。
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,在37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察细胞消化情况,待大部分细胞变圆并脱落时,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入少量培养基终止消化。
补加6-8ml/瓶的培养基,轻轻打匀后吸出,进行1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液。
补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。
在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。
将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜,或者加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤
当细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
弃去培养基后,用PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,待细胞变圆脱落后加入2ml完全培养基终止消化。
使用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%,按每1ml的数量分配到冻存管中,置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时后转入液氮灌储存。
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