
大鼠气管上皮细胞(RTE细胞、原代气管表皮细胞)
- 来源:气管
- 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:气管上皮细胞是气道与外界环境接触的第一道防线,参与气道炎症及免疫反应
大鼠气管上皮细胞是从大鼠气管组织中分离。大鼠气管是一种重要的呼吸器官组织,属于呼吸道系统的一部分。在体外培养的过程中,大鼠气管上皮细胞能够维持其形态结构和功能活动的相似性,与体内组织具有很高的相似性。
气管上皮细胞相关特性
气管是呼吸器官的一部分,由软骨、肌肉、结缔组织和粘膜构成。
气管上皮细胞是气道与外界环境接触的第一道防线,参与气道炎症及免疫反应。
气管上皮细胞可分泌粘液,纤毛上皮细胞通过纤毛运动将粘液与灰尘排出,起到净化空气的作用。
在气管中,近端下呼吸道的上皮表面主要是纤毛上皮细胞,而远端下呼吸道则主要由Clara细胞和基底细胞组成。
大鼠气管上皮细胞参数表
细胞名称 | 大鼠气管上皮细胞(原代细胞) |
细胞类型 | 气管上皮细胞 |
来源 | 大鼠正常气管组织 |
气管功能 | 作为气道与外界环境接触的第一道防线 参与气道炎症及免疫反应 分泌粘液,纤毛运动将粘液与吸入的灰尘排出,清洁呼吸空气 |
细胞鉴定 | 广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性 |
细胞纯度 | 高于90% |
污染检测 | 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
细胞生长方式 | 铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养 |
培养基 | 原代上皮细胞专用培养基 |
传代方法 | 约80-90%的密度传代 |
培养条件 | 温度:37°C - 湿度:5% CO2的培养箱中 |
应用 | 基础研究和临床研究中极为重要,用于理解气道生理和病理过程,探索呼吸系统疾病治疗新方法,评估药物毒性和有效性 |
培养教程
大鼠气管上皮细胞培养操作步骤
细胞稳定
取出25cm²培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态。
细胞传代
待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
传代操作
吸出25cm²培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,37℃温浴3分钟左右;在倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀,按1:2的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养。
待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
细胞状态观察
观察大鼠正常气管上皮细胞;检查培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,拍照并及时与技术支持联系。
用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,在显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态;建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
贴壁细胞操作
若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达到80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
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