
人原代支气管上皮细胞
- 来源:支气管组织;呼吸道黏膜表面的细胞
- 细胞特征:贴壁,上皮细胞样
- 培养基:原代上皮细胞专用培养基
- 其他:人支气管上皮细胞形态多样,可为单层或多层立方状、柱状上皮细胞,表面覆盖微绒毛和纤毛
人支气管上皮细胞是一种位于呼吸道黏膜表面的细胞,是呼吸系统中不可或缺的一部分,是气道黏膜层的主要组成成分。
人支气管上皮细胞形态多样,可呈现出单层或多层立方状、柱状上皮细胞,表面覆盖着微绒毛和纤毛等结构。这些微绒毛和纤毛的存在有助于分泌黏液并有效清除气道中的异物。是呼吸道的第一道防线,阻止外界有害物质如微生物、颗粒物和化学物质进入肺部。除了形成屏障外,它们还参与各种生理过程,如免疫调节、分泌黏液以及气道的修复和重塑。
人支气管上皮细胞特性
人支气管上皮细胞来源呼吸道黏膜表面的细胞。
人支气管上皮细胞形态多样,可为单层或多层立方状、柱状上皮细胞,表面覆盖微绒毛和纤毛。
人支气管包括形成气道的外部保护屏障、阻止有害物质进入肺部、免疫调节、黏液分泌、气道修复和重塑。
人支气管上皮细胞通常从正常的支气管组织中获得。
人支气管上皮细胞参数表
细胞名称 | 人原代支气管上皮细胞 |
种属来源 | 人类 |
类型 | 上皮细胞 |
位置 | 呼吸道黏膜表面 |
形态 | 单层或多层立方状、柱状上皮细胞 |
表面特征 | 覆盖微绒毛和纤毛 |
细胞功能 | 构建气道外部保护屏障;阻止有害物质进入肺部;免疫调节;黏液分泌;气道修复和重塑 |
培养方法 | 体外培养 |
培养温度 | 37°C |
培养基质 | 细胞培养基 |
使用建议 | 在培养基质中进行细胞培养,并注意细胞培养的温度和CO2含量 |
分离和培养 | 经细胞培养技术进行分离和培养,确保来源的纯净性和可靠性 |
应用领域 | 3D细胞培养;毒理学 |
培养教程
人原代支气管上皮细胞分离与培养
实验材料:
手术切除的含支气管的正常肺组织
胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA
6孔培养板:用多聚赖氨酸包被
不含Ca2+ 和Mg2+的1×PBS(pH=7.2),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4
手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊
离心管(15ml、50ml)
实验方法:
用含双抗的1×PBS(pH=7.2)反复清洗手术切除的肺组织;
使用眼科剪小心剪下肺叶中的白色支气管组织;
用含双抗的1×PBS(pH=7.2)反复冲洗支气管组织;
将支气管组织剪成1mm3左右大小的组织块;
用含双抗的1×PBS(pH=7.2)反复清洗组织块;
将组织块转入15ml离心管中,离心2min,去除1×PBS(pH=7.2);
加入组织块4-5倍体积的胰酶,37℃水浴中消化30min,不时震荡;
消化完成后,加入胶原酶Ⅱ,37℃水浴中消化1h,不时震荡;
小心吸出上层悬液,转入另一离心管中;
离心5min,倾去上层液体,加入培养基重悬细胞,转入6孔板中,37℃、5%CO2的培养箱中培养。
培养基准备:
角质细胞无血清培养基或者KM,添加对应因子,再添加0.005mg/ml胰岛素、500ng/ml氢化可的松、1%P/S来培养细胞。
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
冻存液:90%血清,10%DMSO,液氮储存。
细胞处理:
将含有细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞,加入含6-8ml完全培养基的培养瓶中,37℃培养过夜;
若细胞密度达80%-90%,进行传代培养。
细胞冻存:
加入含10%FBS的培养基来终止消化,将细胞悬液分装入培养瓶中,37℃培养过夜;
第二天观察细胞生长情况和细胞密度,进行传代培养。
如果需要冻存细胞,建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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