
EL4细胞系(小鼠淋巴瘤细胞系)
- 来源:T淋巴细胞;淋巴瘤
- 细胞特征:贴壁细胞 , 淋巴母细胞
- 培养基:DMEM+10% HS+1% P/S
- 其他:抗原表达: H-2b、Thy-1.2
EL4细胞系是一种T淋巴细胞来源的小鼠淋巴瘤细胞系,在1970年通过在C57BL/6小鼠体内应用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽诱导淋巴瘤建立,广泛应用于免疫学和肿瘤学研究。
EL4细胞特性特征
抗原表达: H-2b、Thy-1.2
对药物的反应:对0.1 mM皮质醇具有抗性;对20 μg/mL PHA敏感。
亚系信息
EL4.IL-2: 产生高水平白介素-2(IL-2)。
EL4.IL-2: 对0.1 mM 5-溴-2'-脱氧尿苷(BUdR)具有抗性。
EL4.BU.1.OUAr.1.1: 对0.1 mM 5-溴-2'-脱氧尿苷和1 mM哇巴因具有抗性。
病毒检测: EL4细胞缺乏鼠痘病毒(阴性)。
EL4小鼠淋巴瘤细胞参数表
细胞名称 | EL4细胞系(小鼠淋巴瘤细胞系) |
别称 | EL-4, EL 4, E.L.4 |
种属来源 | 小鼠 |
组织来源 | T淋巴细胞;淋巴瘤 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
生物安全等级 | 1 |
抗原表达 | H-2b; Thy-1.2 |
特殊性质 | 对0.1 mM氢化可的松具有抗性;对20 μg/mL PHA敏感 |
亚株特性 | EL4.IL-2可产生高水平IL-2;EL4.BU.1.OUAr.1.1对BUdR和哇巴因具有抗性 |
病毒检测 | 肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性 |
培养基 | DMEM (含NaHCO3 1.5g/L) + 10% 马血清 + 1% 双抗 |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代密度 | 80%-90%细胞密度时进行传代 |
传代比例 | 1:2 - 1:4 |
细胞密度调整 | 2x10^5 ~ 4.0x10^5 个细胞/mL |
冻存液体系 | 50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO 或 90% 血清 + 10% DMSO |
冻存密度 | 1x10^6 ~ 1x10^7 个活细胞/mL |
储存条件 | 液氮储存 |
支原体检测 | 阴性 |
细胞代数 | 10代以内 |
细胞规格 | 1x10^6 cells/T25或1mL冻存管 |
运输方式 | 干冰运输(冻存管)或常温运输(T25瓶) |
用途限制 | 仅供科研使用,禁止用于动物或人类疾病治疗产品 |
培养教程
EL4小鼠淋巴瘤细胞培养教程
EL4细胞复苏
从液氮中取出冻存的EL4细胞,立即放入37℃水浴中解冻。
解冻后,将细胞悬液转移至含4 mL预热培养基的离心管中。
以1000 rpm离心3-5分钟,弃上清液。
用1-2 mL新鲜培养基重悬EL4细胞。
将细胞转移到培养瓶或培养皿中,添加适量培养基。
常规培养
EL4细胞为悬浮生长细胞,不需要胰酶消化。
保持细胞密度在2 x 10^5 ~ 4.0 x 10^5个细胞/mL。
每2-3天更换培养基或传代一次。
EL4细胞传代方法
当EL4细胞密度达到80%-90%时进行传代。
传代比例建议为1:2 - 1:4。
收集细胞悬液,1000 rpm离心3-5分钟。
弃上清液,用新鲜培养基重悬EL4细胞。
将细胞按所需密度分配至新的培养瓶中。
换液步骤
收集EL4细胞悬液,1000 rpm离心3-5分钟。
弃上清液,用新鲜预热的完全培养基重悬细胞。
将EL4细胞转移回培养瓶中。
细胞冻存
使用冻存液:50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO。
调整EL4细胞密度至1 x 10^6 ~ 1 x 10^7个活细胞/mL。
将细胞悬液分装至冻存管中,每管1 mL。
使用程序降温盒或-80℃冰箱缓慢降温,24小时后转入液氮中长期保存。
常见问题及解决方案:
细胞聚集:
EL4细胞虽然为悬浮生长,但在培养过程中可能出现细胞聚集。
解决方案:轻轻吹打EL4细胞悬液,使用细胞筛网过滤去除大的细胞团,适当调整细胞密度。
细胞沉降:
EL4细胞在培养中可能会出现部分细胞沉降。
解决方案:定期轻摇培养瓶,使用旋转培养系统或摇床保持细胞悬浮状态。
细胞活力下降:
长期培养或处理不当可能导致EL4细胞活力下降。
解决方案:定期检测细胞活力,避免过度消化或机械损伤,保持细胞的完整性。
细胞异质性增加:
长期培养可能导致EL4细胞群体中的异质性增加。
解决方案:定期进行单克隆分离,使用流式细胞仪进行细胞分选以保持细胞群体的纯度。
细胞污染:
细菌或真菌污染可能影响EL4细胞的生长状态。
解决方案:严格遵守无菌操作规程,定期检查培养环境和设备的无菌状态,适当添加抗生素,及时处理受污染的细胞。
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