
A20细胞系(小鼠B细胞淋巴瘤细胞)
- 来源:B淋巴细胞;淋巴瘤
- 细胞特征:悬浮,聚团生长,圆形至多形细胞悬浮生长,单个或部分小集合,少数细胞轻微贴壁
- 培养基:RPMI-1640+0.05mM β-mercaptoethanol+10% FBS+1% P/S
- 其他:A20细胞可以呈递同种异体抗原和蛋白质抗原
A20细胞是一种源自一只老年BALB/cAnN小鼠(自发网状细胞肿瘤)的B细胞淋巴瘤细胞系,首次于1979年被鉴定。A20细胞具有二倍体特征,其染色体数目在33到38之间,模态数为37。
A20细胞系悬浮生长、细胞呈球形,表面光滑,中心部分较暗,而边缘较明亮。
A20细胞特性特征
免疫球蛋白表达:表面免疫球蛋白(sIg+)的表达水平依赖于培养条件。在Click培养基中生长时,表面免疫球蛋白表达很少;然而,在RPMI 1640培养基中生长时,表达大量表面免疫球蛋白。
抗原呈递:A20细胞可以呈递同种异体抗原和蛋白质抗原,适合作为转染宿主用于研究抗原呈递机制。
基因表达:表达I-A+(MHC II类分子)和表面免疫球蛋白(sIg+)。
标记表达:表达Fc受
致瘤性:A20细胞具有致瘤性
病毒检测:A20细胞鼠痘病毒呈阴性
A20细胞参数表
细胞名称 | A20细胞系(小鼠B细胞淋巴瘤细胞) |
细胞别称 | A-20; |
别名 | ATCC TIB-208 |
来源 | BALB/cAnN小鼠自发性网状细胞肿瘤 |
发现年份 | 1979年 |
细胞类型 | B细胞淋巴瘤细胞系 |
形态 | 淋巴母细胞样,球状,表面光滑,中心部分较暗边缘明显 |
生长特性 | 悬浮生长;聚团,少数细胞轻微贴壁 |
致瘤性 | 具有致瘤性 |
基础培养基 | RPMI-1640,0% FBS,0.05 mM β-巯基乙醇,1% 青霉素-链霉素 |
培养条件 | 37℃,95%空气,5% CO2 |
传代比例 | 建议1:2(首次传代) |
培养密度 | 1×10^5-1×10^6 cells/mL |
换液频率 | 每2-3天 |
抗原表达 | I-A+ (MHC II类分子) |
基因表达 | 表面免疫球蛋白(sIg+) |
表面标记 | Fc受体 |
免疫球蛋白表达 | 在Click培养基中低表达,在RPMI 1640中高表达 |
抗原呈递能力 | 可呈递同种异体抗原和蛋白质抗原 |
病毒检测 | 鼠痘病毒阴性 |
应用 | 免疫学研究,转染宿主,疫苗靶点选择,抗肿瘤免疫机制研究,药物筛选 |
保存方法 | 液氮长期保存;-80℃保存2个月有效 |
运输条件 | 室温3-5天有效(活细胞);干冰运输(冻存细胞) |
细胞鉴定 | 经过STR鉴定 |
培养教程
A20小鼠B细胞淋巴瘤细胞培养教程
A20细胞复苏
从液氮中取出冻存的A20细胞。
在37℃水浴中快速解冻(约1-2分钟)。
将A20细胞悬液缓慢转移到含有6-9 mL完全培养基的离心管中。
1000 rpm离心5分钟,弃上清。
用新鲜完全培养基重悬A20细胞,转移到培养瓶中。
A20细胞传代
每2-3天观察A20细胞生长状况。
当A20细胞密度达到1×10^6 cells/mL时进行传代,建议传代比例为1:2(首次传代)。
收集A20细胞悬液,1000 rpm离心5分钟。
弃上清,用新鲜完全培养基重悬A20细胞。
将A20细胞分装到新的培养瓶中。
A20细胞冻存
收集对数生长期的A20细胞。
1000 rpm离心5分钟,弃上清。
用含5/10% DMSO的完全培养基重悬A20细胞。
将A20细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒,将A20细胞缓慢降温至-80℃。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
定期检查A20细胞的形态和生长状况,保持无菌操作,避免污染。
不要让A20细胞过度生长或密度过高,定期进行细胞鉴定,确保A20细胞特性未发生改变。
A20细胞生长监测
显微镜观察:使用倒置显微镜定期观察A20细胞形态和密度。A20细胞悬浮生长,形态为球形,表面光滑。
细胞计数:每2-3天进行细胞计数,记录A20细胞密度变化,保持A20细胞密度在1×10^5-1×10^6 cells/mL之间。
培养基颜色:观察培养基颜色变化,培养基变黄表明需要更换新鲜培养基。
细胞活力:使用台盼蓝染色法检测A20细胞活力,活A20细胞不着色,死A20细胞呈蓝色。
生长曲线:绘制A20细胞生长曲线,监测A20细胞的对数生长期和平台期。
倍增时间:计算A20细胞倍增时间,正常A20细胞的倍增时间约为48-72小时。
细胞聚集:观察是否有A20细胞聚集现象,过度聚集可能影响A20细胞生长。
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STR鉴定及相关
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Mouse STR 7-1 | 25.2 |
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Mouse STR 11-2 | 17 |
Mouse STR 12-1 | 16 |
Mouse STR 13-1 | 16.2,17.2 |
Mouse STR 15-3 | 22.3 |
Mouse STR 17-2 | 16,17 |
Mouse STR 18-3 | 15,16,18 |
Mouse STR 19-2 | 14 |
Mouse STR X-1 | 25 |
参考文献
上一篇:EL4细胞系(小鼠淋巴瘤细胞系)