
SVEC4-10细胞(小鼠淋巴结内皮细胞)
- 来源:腋窝淋巴结
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10%FBS+1% P/S
- 其他:SVEC4-10细胞系通过SV40转化获得了持续增殖的能力,表现出与正常内皮细胞相似的分化特性
SVEC4-10细胞系来源于通过SV40病毒(菌株4A)转化成年雄性C3H/HeJ小鼠腋窝淋巴结中的血管内皮细胞。SVEC4-10细胞系具备无限增殖的能力,在体外培养中无需添加特殊生长因子便能持续生长。
SVEC4-10细胞表现出良好的分化能力,能够对多种细胞因子和细胞外基质信号(如白细胞介素、肿瘤坏死因子α)作出反应,表现出类似于正常内皮细胞的管状分化。
SVEC4-10细胞系能够与小鼠淋巴细胞特异性结合,并表达主要组织相容性复合体I类抗原H-2k,同时对抗SV40 H-2k CTL克隆敏感,易发生裂解反应。SVEC4-10细胞还表达血管细胞粘附分子(VCAM)和SV40T抗原,染色结果呈阳性。这些特性使得SVEC4-10细胞在3D细胞培养、淋巴系统研究、免疫学和血管生物学研究中具有重要的应用价值。
SVEC4-10细胞特性特征
无限增殖:SVEC4-10细胞能够在没有特殊添加剂的情况下持续生长,显示出良好的增殖能力。在长期实验中使用该细胞系而无需频繁添加生长因子。
在合成基底膜上,SVEC4-10细胞能够形成管状分支结构,类似于正常内皮细胞的分化特性。
在肿瘤坏死因子α(TNF-α)的诱导下,SVEC4-10细胞能够发生可逆的向纺锤形形态转变。
SVEC4-10细胞表达H-2k抗原,这使得它们能够与小鼠淋巴细胞特异性结合。SVEC4-10细胞表达VCAM,有助于细胞间的粘附和信号传递。
SVEC4-10细胞对干扰素γ(IFN-γ)的刺激能够诱导MHC II类抗原的表达,表现出与正常内皮细胞相似的反应。此外,它们对某些白细胞介素和细胞外基质信号表现出反应,促进管状分化。
SVEC4-10细胞对SV40 T抗原呈阳性染色,显示出其转化特性。
SVEC4-10细胞参数表
细胞名称 | SVEC4-10细胞(小鼠淋巴结内皮细胞) |
别称 | SVEC 4-10 |
物种 | 小鼠 |
细胞来源 | 成年雄性C3H/HeJ小鼠的腋窝淋巴结内皮细胞 |
转化方式 | SV40(4A株)病毒转化 |
细胞类型 | 内皮细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37°C,5% CO2 |
传代信息 | 传代比例:1:2 - 1:3;频率:每周2-3次;细胞密度:1×10^6 cells/T25培养瓶 |
细胞状态 | 细胞活性高,状态良好 |
无限增殖 | 在没有特殊添加剂的情况下可无限增殖 |
分化能力 | 在合成基底膜上形成管状分支结构 |
形态变化 | 在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导下发生可逆的向纺锤形形态转变 |
免疫表型 | 表达主要组织相容性复合体I类抗原H-2k,易被抗SV40 H-2k CTL克隆裂解 |
细胞因子反应 | 对干扰素γ(IFN-γ)刺激诱导MHC II类抗原的表达,响应白细胞介素和细胞外基质信号 |
SV40转化特征 | 对SV40 T抗原呈阳性染色 |
应用领域 | 淋巴系统、免疫学、血管生物学、癌症研究等 |
培养教程
SVEC4-10小鼠淋巴结内皮细胞培养教程
传代操作
吸去 SVEC4-10细胞 培养基,用PBS缓冲液洗涤细胞层2次。
加入预热的胰酶-EDTA溶液(0.25%胰酶,0.02%EDTA),在37°C下孵育2-3分钟,直到 SVEC4-10细胞 层开始脱落。
加入等量的完全培养基终止消化反应,确保 SVEC4-10细胞 的完整性。
将 SVEC4-10细胞 悬液移入离心管,1000rpm离心5分钟。
小心吸去上清,用完全培养基重悬 SVEC4-10细胞。
按1:2-1:3的比例将 SVEC4-10细胞 接种到新的培养瓶中。
每周传代2-3次,确保 SVEC4-10细胞 维持健康的生长状态。
细胞复苏
从液氮中取出冻存的 SVEC4-10细胞管,迅速置于37°C水浴中,轻轻摇晃至冰块完全融化。
将 SVEC4-10细胞 悬液移入15mL离心管,加入5-10mL预热的完全培养基。
以1000rpm离心5分钟,去除冻存保护剂。
小心吸去上清,用预热的完全培养基重悬SVEC4-10细胞。
将 SVEC4-10细胞 悬液接种到T25培养瓶中,加入适量培养基。
将 SVEC4-10细胞 置于37°C、5% CO2培养箱中孵育,直至 SVEC4-10细胞 复苏并达到适宜的生长状态。
注意事项
操作过程中必须严格遵循无菌技术,避免 SVEC4-10细胞 培养过程中的污染。
胰酶消化时间需根据实际情况调整,确保 SVEC4-10细胞 不受过度处理影响。
传代过程中,应轻柔操作,避免对SVEC4-10细胞 造成机械损伤。
定期观察 SVEC4-10细胞 的生长情况,及时更换培养基和传代。
在 SVEC4-10细胞 冻存前,确保细胞处于良好的生长状态,且细胞密度适中。
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