
YAC-1细胞(小鼠淋巴瘤细胞系)
- 来源:淋巴瘤
- 细胞特征:悬浮细胞,淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:YAC-1细胞系由莫洛尼氏白血病病毒诱导产生,具有高度转化性和肿瘤形成能力
YAC-1细胞系是一种从AKR小鼠中分离出来的淋巴瘤细胞,最早由Kiessling等人在1975年建立。YAC-1细胞是通过将莫洛尼小鼠白血病病毒(Mo-MuLV)接种到新生A/Sn小鼠体内后诱导产生的。YAC-1细胞形态类似于淋巴母细胞,具有悬浮生长的特性,并且表现出高度转化和肿瘤形成的能力。由于YAC-1细胞对自然杀伤(NK)细胞的活性非常敏感,因此常被用作检测NK细胞活性的模型。
YAC-1细胞特性特征
永生法:莫洛尼小鼠白血病病毒(Mo-MuLV)诱导
生长特性:YAC-1细胞高度转化性,具有强大的肿瘤形成能力
病毒状态:YAC-1细胞对鼠痘病毒呈阴性,确保其在实验中的纯度和可靠性。
抗原表达:YAC-1细胞表达多种与NK细胞相关的抗原,能够被特定的抗体识别,适合用于免疫学研究。
免疫表型:YAC-1细胞对自然杀伤(NK)细胞的活性敏感、常用作NK细胞的靶细胞
基因组特征:YAC-1细胞携带多个整合的莫洛尼氏白血病病毒的基因,这些基因可能影响细胞的增殖和转化特性
YAC-1细胞参数表
细胞名称 | YAC-1细胞(小鼠淋巴瘤细胞) |
别名 | Yac-1; YAC |
细胞来源 | Mo-MuLV诱导的A/Sn小鼠淋巴瘤 |
细胞物种 | 小鼠 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
培养基 | RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) |
培养条件 | 温度:37°C;气相:空气95%,二氧化碳5% |
传代方法 | 1:2 传代 |
适宜细胞密度 | 1-5 x 10^6 细胞/mL |
冻存条件 | 无血清细胞冻存液 |
冻存方法 | 8% DMSO + 92% 胎牛血清 |
病毒状态 | 鼠痘病毒阴性 |
特征抗原 | 表达NK细胞相关抗原(如NKG2D, CD16等) |
基因特征 | 整合Mo-MuLV基因 |
检测 | 支原体检测阴性 |
细胞增殖速率 | 通常在24小时内可增殖2-3倍 |
转化状态 | 高度转化性,具有肿瘤形成能力 |
细胞存活率 | 复苏后细胞存活率通常在80%以上 |
应用 | NK细胞活性检测、肿瘤免疫研究、细胞间相互作用研究 |
存储温度 | -80°C(长期存储) |
传代周期 | 每2-3天传代一次 |
培养瓶类型 | T25或T75培养瓶 |
注意事项 | 仅供科研使用,不可用于医药、临床等领域 |
培养教程
YAC-1小鼠淋巴瘤细胞培养教程
YAC1细胞复苏
将冻存的YAC1细胞悬液(约1mL)迅速置于37°C水浴中解冻,轻轻摇动以加速解冻过程。
解冻后,立即加入5mL预热的完全培养基,轻轻混匀后,置于1000 RPM离心机中离心5分钟。
小心弃去上清液,加入4-6mL新鲜完全培养基,充分吹打使YAC1细胞重新悬浮。
将YAC1细胞悬液转移至培养瓶或6cm培养皿中,置于培养箱中过夜培养。
次日更换培养基,并检查YAC1细胞的密度和状态。
YAC1细胞传代
当YAC1细胞的密度达到80%-90%时,可以进行传代。
将培养基转移至离心管中,加入适量PBS轻轻洗涤YAC1细胞。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,并在37°C孵育2-3分钟。轻拍培养瓶以帮助YAC1细胞脱离。
加入等量的完全培养基终止消化,并吹打使YAC1细胞形成单细胞悬液。
以1:2至1:3的比例接种至新的培养瓶中,并加入适量新鲜的完全培养基。
将YAC1细胞置于37°C、5% CO₂培养箱中继续培养。
YAC1细胞培养基更换
每2-3天更换一次新鲜的完全培养基,以维持YAC1细胞的最佳生长状态。
更换培养基时,注意避免吸到YAC1细胞,确保YAC1细胞悬浮在培养基中。
加入预热至37°C的新鲜完全培养基,继续培养YAC1细胞。
YAC1细胞冻存
收集处于对数生长期的YAC1细胞,并通过离心法收集YAC1细胞。
使用无血清冻存液重悬YAC1细胞,并将YAC1细胞密度调整至5×10⁶至1×10⁷ cells/mL。
将YAC1细胞悬液分装至冻存管中,密封并标记清楚。
先将YAC1细胞冻存管置于-80°C冰箱中进行缓慢冻存,24小时后转移至液氮罐中进行长期保存。
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