
C2C12细胞(小鼠成肌细胞)
- 来源:骨骼肌
- 细胞特征:贴壁细胞,成肌细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:C2C12细胞能够在高血清条件下快速增殖,并在低血清条件下分化为肌母细胞,进一步融合形成多核肌管
C2C12细胞系是具有持续增殖和分化潜能的小鼠细胞亚克隆,源于1977年由以色列魏茨曼科学研究所的D. Yaffe和O. Saxel从正常C3H小鼠的股骨肌肉中提取。C2C12细胞是在小鼠遭受压碎性损伤后的肌肉组织中分离。
C2C12细胞不携带鼠痘病毒染色体数在69至77之间。C2C12细胞系具有贴壁生长的特性,呈现放射状的细胞形态,并由许多沿多个方向延伸的长纤维构成。在高血清条件下,C2C12细胞能够迅速增殖;在低血清条件下,它们能够分化为肌母细胞,并进一步融合形成多核肌管,表现出特征性的肌肉蛋白表达。因此,C2C12细胞成为研究肌肉发育和分化的重要模型。
C2C12细胞特性特征
c2c12细胞在低血清条件下会分化成肌肉束,形成可收缩的肌管
c2c12细胞能够快速分化为表达特征性肌蛋白的肌管
用骨形成蛋白2(BMP-2)处理可使其分化途径从成肌细胞转向成骨细胞
c2c12细胞经检测鼠痘病毒呈阴性
应用特点:c2c12细胞是一种理想的转染宿主、可用于3D细胞培养、是研究肌肉发育、分化及相关机制的重要模型
C2C12细胞参数表
细胞名称 | C2C12细胞(小鼠成肌细胞) |
别名 | C2c12; C2-C12; C12 |
来源 | 小鼠C3H大腿肌肉(1977年,魏茨曼科学研究所) |
细胞类型 | 自发永生化细胞 |
细胞形态 | 成肌细胞样 |
染色体数 | 69-77 |
生物安全等级 | 1 |
生长特性 | 贴壁型细胞 |
倍增时间 | 12-24小时 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
推荐传代比例 | 1:3 - 1:4 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
播种密度 | 1 x 10⁴ cells/cm² |
气相/温度 | 95%空气 + 5% CO₂ / 37°C |
细胞外酸化率 | 可用于评估细胞代谢和线粒体功能 |
冻存液 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮 |
冻存建议 | 采用缓慢冷冻方法,每分钟降低1°C |
分化潜能 | 能够分化为肌母细胞,形成多核肌管,表达特征性肌蛋白 |
特殊处理 | 用BMP-2处理可使分化途径转变为成骨细胞 |
细胞转染宿主 | 是 |
细胞检测 | 鼠痘病毒检测呈阴性 |
细胞存储机构 | ATCC; CRL-1772; BCRC 60083; BCRJ 0058; DSMZ ACC-565 |
细胞特征 | 细胞在低血清条件下可分化为肌肉束,形成可收缩的肌管 |
代谢底物吸收 | 能吸收氧、葡萄糖、脂肪酸、谷氨酰胺等 |
培养教程
C2C12小鼠成肌细胞培养教程
细胞复苏
将冻存的C2C12细胞管从液氮罐中取出,迅速放入37°C水浴中复苏,直至管内仅残留少量冰块。
将复苏的C2C12细胞悬液转移至预热的完全培养基中(DMEM + 10% FBS + 1% P/S),轻轻吹打均匀以混匀。
将C2C12细胞悬液转移到15 mL离心管中,缓慢加入5 mL预热的培养基。
在1000 rpm下离心5分钟,弃去上清液,用5 mL预热的培养基重悬C2C12细胞。
细胞播种
将重悬的C2C12细胞接种到已用培养基湿润的培养瓶中,播种密度设为1×10⁴ cells/cm²。
轻轻摇动培养瓶,使C2C12细胞均匀分布。
将培养瓶置于37°C、5% CO₂的培养箱中培养。
细胞传代
当C2C12细胞达到80-90%的汇合度时,进行传代操作。
弃去旧培养基,用预热的PBS轻轻冲洗C2C12细胞1-2次。
添加适量预热的传代酶(如Accutase),在37°C下孵育2-3分钟。
轻轻吹打以促使C2C12细胞脱离培养瓶底。
加入2-3倍体积的完全培养基以终止酶的活性。
将C2C12细胞悬液转移到离心管中,1000 rpm离心5分钟。
弃去上清液,用预热的培养基重悬C2C12细胞,并按1:3至1:4的比例接种至新的培养瓶中。
将新接种的培养瓶放入37°C、5% CO₂的培养箱中继续培养。
细胞培养
每2-3天更换一次培养基,以保持C2C12细胞在对数生长期。
定期观察C2C12细胞的生长情况,确保其处于最佳生长状态。
当C2C12细胞达到所需密度或分化程度时,即可进行相关实验或处理。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- 马度米星铵致H9c2细胞和C2C12骨骼肌细胞毒性作用机制研究 《南京农业大学》 2015年
- 摘要:...铵对心肌和骨骼肌细胞的毒性作用机制,本研究采用H9c2和C2C12细胞作为模型,考察...
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