
CHL细胞(中国仓鼠肺成纤维细胞)
- 来源:仓鼠肺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:CHL细胞表达多种基因,包括人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA),在研究纤溶过程和相关疾病时具有重要价值
中国仓鼠肺细胞(CHL)是一种由一日龄雌性中国仓鼠(Cricetulus griseus)肺组织衍生的成纤维样贴壁细胞系,最早由Koyama等人在1970年建立,经过自发性永生化处理后形成了稳定的增殖能力。CHL细胞呈成纤维细胞样形态,具有良好的贴壁生长特性,适应性较强。CHL细胞系因其对化学物质的高度敏感性,被广泛应用于染色体畸变检测、基因表达研究、药物筛选和毒理学评估等生物医学研究领域,是细胞毒性和遗传毒性研究中的重要工具。
CHL细胞特性特征
关键基因: CHL细胞表达多种基因,包括人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA),这使其在研究纤溶过程和相关疾病时具有重要价值。
生物标志物: CHL细胞在化学诱导染色体畸变实验中表现出对多种化学物质的敏感性,是检测染色体异常的重要模型
CHL细胞参数表
细胞名称 | CHL细胞(中国仓鼠肺成纤维细胞) |
细胞别称 | Chinese Hamster Lung |
来源 | 肺;自发永生;雌性;1日龄;来源于1日龄雌性中国仓鼠的肺组织 |
细胞形态 | 贴壁生长,呈现成纤维细胞样形态 |
细胞类型 | 正常细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ECACC |
生物安全等级 | BSL-1 |
致瘤性 | 无 |
培养条件 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO₂;饱和湿度 |
换液周期 | 每2-3天;定期更换培养基 |
传代比例 | 1:2 - 1:4;根据细胞生长情况调整 |
传代周期 | 每24-48小时 |
冻存液配方 | 90% FBS + 10% DMSO |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
培养教程
中国仓鼠肺成纤维细胞CHL培养教程
复苏步骤
预热培养基:在37℃水浴中预热5 ml完全培养基,以利于CHL细胞的复苏。
解冻细胞:从液氮罐中取出冻存的CHL细胞管,立即置于37℃水浴中,轻轻摇动,快速解冻(约1分钟)。
离心清洗:将解冻后的CHL细胞悬液转入15 ml离心管,加入预热的完全培养基混匀,1000 rpm离心5分钟。
重悬细胞:弃去上清液,加入2 ml完全培养基轻轻重悬CHL细胞。
接种培养:将重悬后的CHL细胞转移至T25培养瓶,补足至10 ml完全培养基,置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
贴壁观察:复苏24小时后,观察CHL细胞贴壁情况,若发现未贴壁细胞,可弃去培养基并更换新鲜培养基。
CHL细胞传代
生长状态检查:当CHL细胞达到80%-90%汇合度时即可进行传代操作。
PBS洗涤:吸弃旧培养基,加入1 ml无菌PBS轻轻冲洗CHL细胞一次,以去除残余的培养基和血清。
胰酶消化:加入1 ml胰酶确保均匀覆盖,置于37℃培养箱中消化2-3分钟,观察CHL细胞皱缩但尚未完全脱落。
终止消化:加入2-3 ml完全培养基中和胰酶,用手轻拍培养瓶底部,帮助CHL细胞脱落。
离心收集:将CHL细胞悬液转入15 ml离心管,1000 rpm离心5分钟,吸弃上清。
重悬和分瓶:用完全培养基重悬CHL细胞,按1:2或1:4的比例接种至新的T25培养瓶或其他规格的培养瓶中。
CHL细胞冻存
收集细胞:按传代步骤获得CHL细胞沉淀,并计数细胞浓度(约200-300万/ml)。
重悬细胞:用预冷冻存液轻轻重悬CHL细胞,将细胞悬液转入标记好的冻存管中。
程序冻存:将冻存管置于程序冻存盒中,在-80℃冰箱中过夜,再转入液氮保存。若无程序冻存盒,可将CHL细胞冻存管置于泡沫盒中,在4℃静置5-10分钟后转入-80℃冰箱。
注意事项
消化和传代过程中避免气泡产生,以防对CHL细胞造成损伤。
胰酶消化时间需精确控制,过长或过短可能影响CHL细胞状态。
定期检查CHL细胞生长状态,及时更换培养基和传代,以维持细胞的健康生长。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- 养精种玉汤对CHL细胞株染色体畸变影响研究 时珍国医国药 > 2010年2期
- 摘要:目的 探讨养精种玉汤对CHL细胞株染色体畸变的影响,对其遗传安全性进行研究.方法 采用CH...
- 多西环素及其4种杂质对CHL细胞株的细胞毒性和遗传毒性 中国药理学会药检药理专业委员会第十一届学术研讨会
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- 染色体畸变实验用CHL细胞培养方法 《哈尔滨医药》 2003年04期
- 摘要:染色体畸变实验用CHL细胞培养方法
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