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货号：STM-CL-8158 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
CRFK细胞（猫肾细胞）
- 来源：肾，皮层；正常
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：CRFK细胞可以传代多达10代，CRFK细胞不含牛病毒性痢疾(BVD)病毒
CRFK（猫肾细胞）细胞系由RA Van Deusen于1962年从一只12周龄雌性家猫的肾脏皮层分离建立，是一种永生化的上皮样细胞，具有贴壁生长的特性。CRFK细胞广泛应用于病毒学研究、疫苗生产以及抗病毒药物筛选等领域，也常作为基因转染研究的宿主细胞，成为研究猫科病毒感染机制和开发相关治疗方法的重要工具。CRFK猫肾细胞该细胞系由RA Van Deusen保藏，是合适的转染宿主。
CRFK细胞特性特征
CRFK细胞对多种病毒表现出敏感性：猫泛白细胞减少症病毒（FPLV）、猫杯状病毒、呼肠孤病毒（猫）、猫疱疹病毒1型、犬细小病毒、狂犬病病毒
CRFK细胞不含牛病毒性腹泻（BVD）病毒，具有较高的实验安全性
CRFK细胞系在基因表达方面具有稳定性，适合用于转染实验和基因功能研究。作为转染宿主，它能够有效表达外源基因。
CRFK细胞参数表
| 细胞名称 | CRFK细胞（猫肾细胞） |
| 细胞别称 | CrFK; Crfk; Crandell Reese Feline Kidney; Crandell Feline Kidney; CCC; Crandell'sCat Cell |
| ATCC货号 | ATCC: CCL-94 |
| 供体信息 | 雌性家猫，12周龄 |
| 组织来源 | 肾脏皮层 |
| 细胞形态 | 上皮样（多角形或梭形） |
| 细胞类型 | 自发永生化细胞 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
| 病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检测均为阴性 |
| 培养基 | MEM（改良的最小必需培养基） + 10% FBS + 1% P/S |
| 培养环境 | 温度：37°C；CO₂浓度：5%；空气：95% |
| 换液频次 | 每2-3天更换一次 |
| 传代比例 | 1:3至1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 消化时间 | 2-3分钟 |
| 冻存液配方 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
| 冻存条件 | 液氮存储 |
培养教程
CRFK细胞（猫肾细胞）培养教程
CRFK细胞的传代步骤
所有操作均需在生物安全柜内进行，以确保CRFK细胞培养的无菌环境。
准备完全培养基、PBS（磷酸盐缓冲液）和0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液。
使用无菌吸管吸出CRFK细胞培养瓶中的旧培养基。
加入约2 ml的PBS，轻轻摇晃培养瓶以清洗CRFK细胞表面，随后吸出PBS。
加入约1 ml的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，轻轻摇动使其覆盖CRFK细胞表面。
在显微镜下观察，消化时间为2-3分钟，直到CRFK细胞呈圆形并逐渐脱落。
当CRFK细胞大部分脱落时，加入3 ml含血清的培养基，以中和胰蛋白酶作用。
轻轻吹打混匀，使CRFK细胞悬浮成为单细胞状态。
将CRFK细胞悬液转移至离心管中，以1200 rpm离心3分钟，弃去上清液。
加入新鲜的完全培养基重悬CRFK细胞。
按1:3至1:4的比例将CRFK细胞接种至新的培养瓶中。
拧松瓶盖或使用透气瓶盖，将培养瓶放置于37°C、5% CO₂的培养箱中继续培养。
CRFK细胞的冻存步骤
配制CRFK细胞冻存液，常用配方为：55%完全培养基 + 40%胎牛血清 + 5% DMSO（二甲基亚砜）。
按照传代步骤收集CRFK细胞沉淀，并加入冻存液重悬。
将CRFK细胞悬液分装至冻存管中，放入程序冷冻盒中，缓慢降温至-80°C。
隔夜后将冻存管转移至液氮中长期保存。
CRFK细胞培养的注意事项
胰蛋白酶的消化时间需根据CRFK细胞密度和状态灵活调整，避免过度消化损伤细胞。
在传代过程中，应避免过度吹打，以防止产生气泡影响CRFK细胞的生长。
定期检查CRFK细胞的生长状态，确保无污染，并根据细胞密度及时进行传代操作。