大鼠卵巢成纤维细胞（原代细胞）

大鼠卵巢成纤维细胞（Rat Ovarian Fibroblasts）来源于大鼠卵巢组织，属于成纤维细胞类型，广泛应用于生物医学研究和细胞培养实验。

卵巢成纤维细胞通常呈长梭形或星形，具有明显的突起，能够形成单层贴壁生长。在适宜的培养基中，它们能够迅速增殖，并在传代过程中保持其特性。大鼠卵巢是雌性动物的主要生殖器官，负责产生卵子和合成类固醇激素。卵巢的外部有上皮组织覆盖，下方为结缔组织，内部结构分为皮质和髓质，包含卵泡、结缔组织、血管、淋巴管和神经。卵巢成纤维细胞主要分布于卵巢表面，具有修复和重塑卵巢损伤的功能。在卵巢炎症过程中，它们有助于控制炎症扩散，保持组织稳态。分离后的卵巢成纤维细胞最初呈圆形并具有较好的折光性，随着时间推移，细胞逐渐伸展成梭形或星形，形成网状结构，并且生长迅速，最终在培养中形成紧密排列的细胞群体。大鼠卵巢成纤维细胞是研究卵巢生理、组织修复及细胞功能的理想模型。

大鼠卵巢成纤维细胞特性特征

• 细胞形态：大鼠卵巢成纤维细胞通常呈现为长梭形，具有明显的突起，能够形成单层贴壁生长。

• 细胞核：细胞核呈规则的卵圆形，核仁明显，细胞质透明。

• 传代能力：可以进行多代传代，通常可传3-5代而保持其特性。

• 蛋白质合成：具有明显的蛋白质合成和分泌活动，参与组织修复和重塑。

• 基因表达：相关研究显示，大鼠卵巢成纤维细胞在不同情况下会调节多种基因的表达，以适应生理或病理状态。例如，它们可能会对炎症反应、细胞凋亡等过程产生影响

大鼠卵巢成纤维细胞参数表

原代大鼠卵巢成纤维细胞培养教程

细胞复苏

• 提前将培养基（如 DMEM/F12 + 10% FBS + 1% 胶原蛋白生长补充剂 + 1% 青霉素-链霉素溶液）预热至37°C。
  

• 确保生物安全柜已准备好，操作台和工具使用75%酒精进行消毒。

• 从液氮或-80°C冰箱中取出冻存管，立即放入37°C的水浴中进行解冻，轻轻摇动，通常在1-2分钟内完成。
  

• 解冻后，迅速将细胞悬液转移至含有5 mL预热培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 在室温下，离心管以1000 rpm进行离心5分钟，去除上清液。

• 轻轻吹打混匀细胞沉淀，重悬于适量新鲜培养基中（约1-2 mL）。

• 将细胞悬液转移至预先准备好的培养瓶中，放入37°C、5% CO₂的培养箱内培养。

细胞传代

• 每2-3天观察Rof细胞的生长状态，当细胞融合度达到70%-80%时进行传代。
  

• 吸出培养瓶中的旧培养基，用PBS缓冲液轻轻洗涤一次，去除残留培养基和死细胞。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶消化液（约1 mL），轻轻摇动，确保胰蛋白酶覆盖整个瓶底。

• 将培养瓶放入37°C的培养箱中孵育2-5分钟，观察细胞是否开始脱落。

• 当细胞开始脱落时，立即加入等体积的新鲜培养基以终止消化反应。

• 将细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心5分钟，去除上清液。

• 重悬细胞沉淀于适量新鲜培养基中，按照1:3的传代比例，将细胞分配至新的培养瓶中。

细胞冻存

• 准备冻存液：基础培养基 + 10% DMSO + 20% FBS。
  

• 当Rof细胞融合度达到70%-80%时，按照传代步骤收集细胞，并将细胞重悬于冻存液中。
  

• 将重悬后的细胞分装至冻存管中，每管约1 mL。

• 将冻存管放入-80°C冰箱内进行初步冷冻，通常在该温度下冷冻过夜。

• 隔天，将冻存管转移至液氮罐中进行长期保存。