
小鼠卵巢成纤维细胞(原代细胞)
- 来源:卵巢组织
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:原代成纤维细胞专用培养基
- 其他:小鼠卵巢成纤维细胞能够合成和分泌多种细胞外基质成分,如胶原蛋白和糖胺聚糖
原代小鼠卵巢成纤维细胞(Mouse Ovarian Fibroblasts, MOF)来源于小鼠卵巢组织,常见实验品种包括C57BL/6和BALB/c等,广泛用于生殖生物学和细胞生物学研究。
小鼠卵巢成纤维细胞通常选择3周龄、体重10-15克的未成熟雌性小鼠,通过注射孕马血清促性腺激素(PMSG,8 IU)刺激卵泡发育,随后采用颈椎脱臼法处死小鼠,迅速取出卵巢,并用无菌PBS溶液清洗去除血污和脂肪组织。在显微镜下去除卵巢周围包膜并刺破卵泡,释放颗粒细胞和卵母细胞,通过过滤、离心等步骤分离获得高纯度成纤维细胞。
小鼠卵巢成纤维细胞形态特征包括体积较大、核椭圆形、胞质透明,具有合成和分泌细胞外基质(如胶原蛋白和糖胺聚糖)的功能,在卵巢损伤修复及炎症控制中发挥重要作用。原代小鼠卵巢成纤维细胞因其易于体外培养,且能保持特有功能,成为研究卵巢发育、疾病模型及药物筛选的重要工具,广泛应用于生殖生物学、组织工程和再生医学等领域。
小鼠卵巢成纤维细胞特性特征
标志蛋白:小鼠卵巢成纤维细胞通常表达多种特定的标志蛋白,如波形蛋白(Vimentin),用于鉴定其成纤维细胞的性质。
细胞外基质合成:能够合成和分泌多种细胞外基质成分,如胶原蛋白和糖胺聚糖,这些成分对维持卵巢的结构和功能至关重要。
组织修复:在卵巢损伤后,成纤维细胞能够参与修复和重塑过程,对组织缺损有重要的修复作用。
炎症反应调节:在卵巢炎症时,小鼠卵巢成纤维细胞能够控制炎症扩散,发挥免疫调节作用。
基因表达谱:研究表明,小鼠卵巢成纤维细胞表达与生殖功能、细胞增殖、凋亡及炎症反应相关的多种基因。例如,它们可能上调与胶原合成相关的基因,同时下调与凋亡相关的基因,以适应不同的生理和病理状态
小鼠卵巢成纤维细胞参数表
细胞名称 | 小鼠卵巢成纤维细胞(原代细胞) |
英文名称 | Mouse ovarian fibroblast cells |
来源 | 小鼠卵巢组织 |
细胞形态 | 纺锤形或星形,细胞核清晰 |
细胞大小 | 直径约为20-30微米 |
细胞密度 | 通常为5×10^5 cells/T25瓶 |
纯度 | ≥99% |
培养基 | 原代细胞专用培养基 |
培养温度 | 37°C |
CO₂浓度 | 5% |
培养容器 | 胶原蛋白涂层的培养瓶或培养皿 |
初始接种密度 | 5×10^5 cells/mL |
换液频率 | 每2-3天更换一次培养基 |
贴壁时间 | 30分钟后开始贴壁,6小时基本贴壁完成 |
标志蛋白 | 波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) |
基因表达特征 | 表达与生殖功能、细胞增殖、凋亡相关的基因 |
组织修复能力 | 能够参与卵巢损伤后的修复和重塑 |
炎症调节能力 | 在卵巢炎症时有效控制炎症扩散 |
生长特性 | 生长迅速,5-7天内达到融合状态 |
细胞代数 | 通常可传代约3-5代 |
存活率 | 通常在传代后保持较高的存活率(>90%) |
注意事项 | 建议用多聚赖氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)对接种培养皿包被处理 |
培养教程
原代小鼠卵巢成纤维细胞培养教程
消化与传代操作
当细胞融合达到70%-80%时,加入不含酚红的胰蛋白酶消化细胞(约3分钟)。
消化完成后,加入等量完全培养基中和酶活性,并转移至离心管中,以1000 rpm离心5分钟。
弃去上清液,用PBS洗涤细胞3次以除去残余酶液,随后重悬细胞。
按1:2比例接种至新培养瓶,提供充足空间以保证小鼠卵巢成纤维细胞的后续增殖。
传代培养注意事项
每次传代后需密切观察细胞形态,记录细胞增殖和贴壁情况。典型的小鼠卵巢成纤维细胞呈纺锤形或星形。
小鼠卵巢成纤维细胞通常可传代3代,若细胞增殖缓慢或形态异常,应考虑调整培养条件或重新分离细胞。
注意事项
全程操作需保持无菌,避免细胞被污染(如细菌、支原体等)。
及时更换培养基,避免细胞长期暴露于代谢废物较高的环境中。
实验废液和废弃材料需按生物安全要求进行处理,保证实验室环境的安全性。
相关资料
- 解析Skov3细胞生长机制:癌细胞增殖的分子调控与信号通路探究
- Skov3细胞是一种源自人类卵巢癌的细胞系,被广泛用于癌症生物学研究。理解Skov3细胞的...
- 查看完整内容 >
STR鉴定及相关
参考文献
- PGE2对NR8383巨噬细胞株促进HUVEC细胞迁移和成管能力调控作用的实验研究 《南方医科大学》 2016年
- 摘要:...管生成仅存在于育龄期正常女性生殖系统,其贯穿于整个卵巢周期和子宫内膜周期的始终,表现...
- PCSK9在PCOS卵巢组织中表达变化及对KGN细胞脂质摄取的影响 《南华大学》 2021年
- 摘要:...草溶菌素9(Proprotein convertase subtilisin/kex...
- 槲皮黄酮调控Hedgehog通路抑制人卵巢癌细胞株A2780增殖、侵袭、迁移的体外实验 《中医学报》 2020年09期
- 摘要:...:通过体外实验研究分析槲皮黄酮通过调控Hedgehog通路对人卵巢癌细胞株A2780...
- 基于人卵巢颗粒细胞KGN建立的卵泡刺激素体外生物活性效价测定法 中国新药杂志 > 2021年14期
- 摘要:目的:基于哺乳动物体内激素具有刺激卵巢颗粒细胞产生黄体酮(孕酮)的机理,建立尿促性素(hu...
- 过表达FOXK2对卵巢癌SK-OV-3细胞恶性生物学行为的影响 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2020年04期
- 摘要:目的:探讨过表达叉头框转录因子FOXK2对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖、迁移、侵袭、黏附...
- 查看完整内容 >