
GIST-T1细胞系(人胃肠道间质瘤细胞系)
- 来源:胃肠道
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:GIST-T1细胞系携带kit基因外显子11的突变;这种突变是GIST中最常见的基因变化之一。
GIST-T1细胞是从一位47岁女性患者的胃肠道间质瘤(GIST)组织中分离出的细胞,该患者因胃部肿瘤接受了手术治疗。GIST-T1细胞系是GIST研究中的重要模型,用于探索此类肿瘤的发病机制及治疗方法。
GIST-T1细胞呈梭形,表达间质瘤特异性标志物;由于其携带的特定基因突变和高度可移植性,GIST-T1细胞系广泛用于GIST的基础和临床研究,特别是用于靶向药物(如伊马替尼)的敏感性测试和耐药机制的探索。其稳定的遗传特征和肿瘤形成能力为研究GIST的生物学行为以及新疗法开发提供了理想的实验平台。
GIST-T1细胞系特性特征
形态特征:GIST-T1细胞呈现梭形,具有典型的间质瘤细胞形态。
增殖活性:GIST-T1细胞系显示出高度的增殖能力,在体外培养时能够快速生长,并能在裸鼠体内形成肿瘤,且与原发肿瘤的组织学特征相似。
GIST-T1细胞强烈表达CD117,这是一种重要的间质瘤标志物,常用于GIST的诊断。
GIST-T1细胞系也表达DOG1,这是一种在GIST中高度特异性的标志物,有助于进一步确认肿瘤的性质。
突变情况:GIST-T1细胞系携带kit基因外显子11的突变。这种突变是GIST中最常见的基因变化之一,通常与肿瘤的发生和进展密切相关。
信号通路:由于kit基因突变,GIST-T1细胞可能表现出异常的信号传导活性,这为研究靶向治疗提供了基础
GIST-T1细胞系参数表
细胞名称 | GIST-T1细胞系(人胃肠道间质瘤细胞系) |
别名 | GIST-T-1; GISTT1; T1 |
细胞来源 | 47岁女性GIST患者胃肠道间质瘤组织 |
细胞类型 | 间质瘤细胞 |
形态特征 | 梭形 |
标志物表达 | CD117(c-kit)阳性, DOG1阳性 |
基因特征 | kit基因外显子11突变 |
常见症状 | 腹痛、恶心、呕吐、消化道出血、腹部肿块等 |
恶性判定标准 | 肿瘤大小、核分裂率、浸润和转移情况 |
转移特征 | 多见于腹腔种植和血行转移,鲜有淋巴结转移 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
温度 | 37°C |
湿度 | 95% |
CO2浓度 | 5% |
传代方式 | 胰酶消化 |
传代频率 | 3-4天/次 |
增倍时间 | 约48小时 |
增殖能力 | 高度增殖,能在体外快速生长 |
成瘤性 | 可在裸鼠皮下形成肿瘤,与原发肿瘤相似 |
药物敏感性 | 对伊马替尼敏感 |
基因检测 | kit基因突变检测是GIST诊断的重要环节 |
影像学检查 | CT、MRI、超声波、内镜等用于肿瘤定位和评估大小 |
活检方法 | 细针抽吸活检或手术取样进行病理检查 |
培养教程
GIST-T1人胃肠道间质瘤细胞系培养教程
GIST-T1细胞的解冻
从液氮罐中取出冻存的GIST-T1细胞管,立即置于37°C的水浴中,轻轻摇动,直到GIST-T1细胞完全解冻(约1-2分钟)。
迅速将解冻的GIST-T1细胞转移至含有10% FBS的RPMI-1640培养基中,混匀后进行离心(1000 rpm,5分钟)。
丢弃上清,重悬GIST-T1细胞于新鲜培养基中,准备接种。
GIST-T1细胞的接种
接种密度:GIST-T1细胞应以1×10^5个细胞/mL的密度接种在培养瓶中。
培养条件:在37°C、5% CO₂的恒温培养箱中培养GIST-T1细胞,确保培养环境稳定以促进其正常生长。
GIST-T1细胞的传代
传代频率:当GIST-T1细胞达到70%-80%汇合时进行传代,通常每3-4天传代一次。
用无钙镁的PBS缓冲液轻轻洗涤GIST-T1细胞,去除残留培养基。
加入0.25%胰蛋白酶溶液,消化GIST-T1细胞1-3分钟,观察细胞逐渐从培养瓶壁上脱落。
使用新鲜培养基终止胰酶反应,离心去除胰酶。
重新将GIST-T1细胞重悬于培养基中并接种到新的培养瓶中。
GIST-T1细胞的维护与观察
显微镜观察:应定期使用倒置显微镜观察GIST-T1细胞的形态,确保其生长状态良好且无污染。
培养基更换:每2-3天更换一次培养基,以保持GIST-T1细胞的健康状态,避免代谢废物的积累。
GIST-T1细胞的冷冻保存
当GIST-T1细胞达到对数生长期并密度适当时,收集细胞并用含10%二甲基亚砜(DMSO)和90% FBS的冷冻液重悬。
将GIST-T1细胞悬液分装至冻存管中,先在−80°C下预冷冻24小时,然后转移至液氮罐中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
上一篇:SGC7901细胞(人胃癌细胞)
下一篇:NUGC3细胞(人胃癌细胞)