细胞培养 
细胞工程 
细胞生物学 
参考文献 
关于思泰默 
品牌价值 
货号：STM-CL-5396 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
HCE-T细胞（人角膜上皮细胞）
- 来源：角膜
- 细胞特征：贴壁细胞，上皮细胞样
- 培养基：DMEM/F12+15% FBS+5μg/mL Insulin +10ng/mL human EGF＋1% P/S
- 其他：HCE-T细胞通过SV40-Adeno载体转化获得不朽化特性，使其能够在体外长期生长和繁殖
HCE-T细胞系是通过一位49岁女性的角膜组织进行SV40病毒转化建立，表现出典型的上皮细胞形态，且能够产生64kD角蛋白。HCE-T细胞通过应用SV40-Adeno载体的转化技术实现了永生化，在体外具有长期增殖能力。
HCE-T细胞特性特征
角蛋白表达：HCE-T细胞能够产生64kD的角蛋白。
细胞膜特性：研究表明HCE-T细胞对自然杀伤细胞具有高度敏感性，适合用作体外靶标。
基因特征：HCE-T细胞系的基因特征与角膜上皮细胞相关
HCE-T细胞表达与角膜上皮细胞功能相关的基因，如角蛋白基因。
通过转化后的HCE-T细胞系具有一定的基因稳定性，使其在实验中表现出一致的生物学特性
HCE-T细胞参数表
| 细胞名称 | HCE-T细胞（人角膜上皮细胞） |
| 别称 | HCET; Human Corneal Epithelial cells-Transformed; HCE; SV40-HCEC |
| 细胞来源 | 人源，取自49岁女性角膜 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样，贴壁生长 |
| 培养基 | DMEM/F12+15% FBS+5μg/mL Insulin +10ng/mL human EGF＋1% P/S |
| 传代比例 | 1:2至1:4 |
| 换液频率 | 每2-3天 |
| 培养条件 | 37℃，5%CO₂，pH7.2-7.4 |
| 细胞密度 | 80%-90%时传代 |
| 冻存条件 | -196℃液氮中 |
| 冻存保护剂 | 5%-15%甘油或DMSO |
| 细胞特征 | 64kD角蛋白表达 |
| 分子特征 | 表达角膜上皮相关基因 |
| 细胞背景 | SV40-Adeno转化 |
| 细胞存活率 | ≥90%（复苏后） |
| 细胞周期 | 约24小时 |
| 实验室安全等级 | BSL-1 |
| 应用领域 | 药物筛选、毒理学研究、再生医学 |
| 特定应用 | 角膜再生、眼用药安全性评估 |
| 细胞标志物 | 角蛋白、粘附蛋白 |
| 基因组特征 | 基因组稳定性，适合长期培养 |
| 增殖能力 | 高增殖能力，适合大规模培养 |
培养教程
HCE-T人角膜上皮细胞培养教程
细胞复苏
将水浴锅预热至37℃。
准备D/F12培养基，内含15%胎牛血清（FBS）及5μg/ml抗生素（如青霉素和链霉素），确保培养基适用于HCET细胞的复苏。
从液氮罐中取出冻存的HCET细胞，将其迅速置于37℃的水浴中，轻轻摇动冻存管，使HCET细胞在1-2分钟内完全解冻。
解冻后，立即将HCET细胞悬液转移至含有5ml预热好的培养基的离心管中，轻轻混匀。
以1000 rpm离心5分钟，去除冻存保护剂（如DMSO或甘油）。
将HCET细胞沉淀重悬于5-10ml新鲜培养基中，然后将细胞悬液转移至培养瓶中，置于培养箱内培养。
HCET细胞培养
将HCET细胞培养瓶放置于37℃、5% CO₂的恒温培养箱中。
每2-3天更换培养基，确保培养基新鲜，并适时观察HCET细胞的生长状况。
HCET细胞应展现出典型的上皮细胞形态，贴壁生长良好。
当HCET细胞密度达到80%-90%时，应准备进行传代操作。
HCET细胞传代
用无菌PBS缓冲液轻柔洗涤HCET细胞，去除残余的旧培养基。
加入适量的胰酶（浓度为0.05%-0.25%），轻轻摇晃培养瓶以使HCET细胞从瓶壁脱落。
观察HCET细胞完全脱落后，立即加入培养基中和胰酶以终止消化作用。
将HCET细胞悬液以1000 rpm离心5分钟，去除胰酶。
将HCET细胞沉淀重悬于新鲜培养基中，按1:2至1:4的比例分种至新的培养瓶中，继续培养。
HCET细胞冻存
当HCET细胞密度达到80%-90%时，进行细胞冻存操作。
准备好冻存液，通常为含5%-15% DMSO或甘油的培养基。
将HCET细胞沉淀重悬于冻存液中，混匀后分装至冻存管内。
使用“慢冻快融”方法：以-1至-2℃/分钟的速度缓慢冷冻至-80℃，随后将冻存管转移至液氮中进行长期保存。
注意事项
在HCET细胞操作过程中，确保所有器材和试剂均已进行无菌处理，以避免细胞污染。
HCET细胞生长过程中，应定期观察其形态和生长情况，如有异常及时调整培养条件。
详细记录每次传代、冻存的日期及HCET细胞状态，以便进行后续研究及追踪。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 9,12 (PubMed=26900324) |
| 12 (RCB=RCB2280; PubMed=29787296) | |
| D2S1338 | 19,20 |
| D3S1358 | 15,17 |
| D5S818 | 9,13 (PubMed=26900324; PubMed=29787296) |
| 13 (RCB=RCB2280) | |
| D7S820 | 10,13 |
| D8S1179 | 11,13 |
| D13S317 | 8 |
| D16S539 | 9,11 |
| D18S51 | 13 (PubMed=29787296) |
| 13,15 (PubMed=26900324) | |
| D19S433 | 13,14 |
| D21S11 | 27,30 |
| FGA | 20 |
| Penta D | 12,15 |
| Penta E | 15,16 |
| TH01 | 7,8 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 18,19 |
