
AV3人宫颈癌细胞
- 来源:宫颈癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:AV3细胞通过免疫过氧化物酶染色,细胞对角蛋白呈阳性。
AV3人宫颈癌细胞最初被认为来源于正常羊膜,但随后根据同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹,发现是通过HeLa细胞污染建立的。
AV3细胞通过免疫过氧化物酶染色,细胞对角蛋白呈阳性。
基因表达:免疫过氧化物酶染色角蛋白阳性
同工酶:G6PD,A
注:该系的细胞含有HeLa标记染色体,并通过HeLa污染来源
AV3人宫颈癌细胞参数表
名称 | AV3人宫颈癌细胞(经STR鉴定) |
别称 | AV3;人宫颈癌细胞 |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 宫颈 |
细胞类型 | 宫颈癌细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
细胞起源 | 最初认为来自正常羊膜,后确认是HeLa细胞污染 |
HeLa污染证据 | 同工酶分析、HeLa标记染色体、DNA指纹 |
基因表达 | 免疫过氧化物酶染色角蛋白阳性 |
同工酶 | G6PD型A |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性 |
传代方法 | 1:3~1:6 |
传代情况 | P23 |
细胞代数 | 10代以内 |
培养基 | 90% MEM + 10% FBS |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5%二氧化碳;温度:37°C;湿度:70%-80% |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
免疫过氧化物酶染色 | 细胞对角蛋白呈阳性 |
细胞特性 | 含有HeLa标记染色体,通过HeLa污染来源 |
生物安全等级 | 1 |
冻存液 | 90%血清,10%DMSO,现用现配 |
供应限制 | 仅供科学研究使用 |
培养教程
AV3人宫颈癌细胞培养
细胞复苏
从液氮罐中取出冻存管,迅速在37°C水浴中解冻。
用70%乙醇消毒冻存管外部后,在无菌条件下打开。
将细胞悬液转移到15mL离心管中,加入5mL预热的培养基,混匀。
以800rpm离心5分钟,弃上清,重悬于5mL培养基中,转移至T25培养瓶中。
将培养瓶置于37°C,5% CO2培养箱中,24小时后更换新鲜培养基。
细胞传代
当细胞达到70%-80%汇合时,去除旧培养基,用PBS冲洗细胞一次。
加入2mL胰蛋白酶-EDTA,37°C孵育2-5分钟,观察细胞脱离。
加入培养基中和胰蛋白酶,吹打细胞悬液。
将细胞悬液转移至15mL离心管,以800rpm离心5分钟,弃上清。
按1:3~1:6比例重悬细胞,转移至新的T25培养瓶中。
将新培养瓶置于37°C,5% CO2培养箱中。
细胞冻存
按传代步骤收集细胞。
重悬于预冷冻存液中,浓度为1x10^6 cells/mL。
分装至冻存管,每管1mL。
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80°C冰箱过夜。
次日转移至液氮罐中长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12,13 |
D13S317 | 13.3 (ATCC=CCL-21) |
14 (ECACC=88102402; IZSLER=BS CL 3) | |
D16S539 | 9,10 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 27,28 |
FGA | 18,21 |
Penta D | 8,15 |
Penta E | 7,17 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,12 |
vWA | 16,18 |
vWA | 16,17 |
参考文献
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