
An3ca细胞(人子宫内膜癌细胞)
- 来源:子宫内膜癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+15% 优质FBS+1% P/S
- 其他:雌激素受体状态:雌激素受体阴性(ER-)
AN3CA细胞系建立于1964年,来源于一名55岁女性子宫内膜癌患者的淋巴结转移组织。An3ca细胞系表现出典型的癌细胞特性,能够在体外长期传代培养,并在实验动物(如裸鼠)中产生明显的肿瘤。AN3CA细胞为雌激素受体阴性(ER-),在体内评估时表现出侵袭性致瘤潜力。
An3ca细胞接种实验动物产生明显肿瘤,但细胞的生物学特性及超微结构尚未深入研究,仅发现该细胞系促黑激素合成为阴性。
An3ca细胞表现出上皮细胞样形态,广泛用于研究各种遗传和环境因素对癌症细胞行为的影响。
An3ca细胞特性
AN3 CA细胞源自人类子宫内膜腺癌,1964年衍生自淋巴结转移组织。
An3ca细胞具有癌细胞特性,包括能够在体外长期传代培养及在实验动物中产生明显肿瘤。
AN3 CA细胞为雌激素受体阴性(ER-)。
AN3 CA细胞呈现上皮细胞形态,对此研究可以深入理解子宫内膜癌的进展机制和开发新型治疗策略。
An3ca细胞参数表
细胞名称 | An3ca细胞(人子宫内膜癌细胞) |
别称 | AN3_CA, AN3CA, AN3Ca, AN3CA, AN-3, AN3, Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma |
来源 | 子宫内膜癌患者的淋巴结转移组织 |
建系时间 | 1964年 |
种属 | 人 |
性别年龄 | 女性55岁 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
雌激素受体状态 | 雌激素受体阴性(ER-) |
促黑激素合成 | 阴性 |
致瘤性 | 在裸鼠和皮质酮处理的仓鼠颊囊中有致瘤性 |
倍增时间 | 约55小时 |
培养基 | DMEM+15% 优质FBS+1% P/S |
气相 | 95% 空气 + 5% CO2; 37°C;饱和湿度 |
传代比例 | 1:3(培养面积比),或 1:2-1:4 |
传代方式 | 消化2-3分钟 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
冻存液配方 | MEM + 10% FBS + 1X 非必需氨基酸 + 10% DMSO 或 60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
生物安全等级 | 1级 |
备注 | AN3CA细胞表现出上皮细胞样形态,并在接种实验动物后能产生明显肿瘤 。虽然其生物学特性及超微结构尚未深入研究,但已知其促黑激素合成阴性。 |
培养教程
AN3CA细胞复苏步骤
将含有1mL AN3CA细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。
加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。
在1000RPM条件下离心3-5分钟,弃去上清液,完全培养基重悬AN3CA细胞。
将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。
第二天显微镜下观察AN3CA细胞生长情况和细胞密度。
AN3CA细胞传代步骤
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗AN3CA细胞1-2次。
加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
将AN3CA细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8mL完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
AN3CA细胞冻存步骤
收集AN3CA细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
根据AN3CA细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度为5×10^6~1×10^7/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
将冻存管放入-80℃冰箱,24小时后转入液氮罐储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,14 (DSMZ=ACC-267) |
12,14,15 (ATCC=HTB-111; CLS=300119; Cosmic-CLP=910781; IZSLER=BS TCL 200; PubMed=25877200) | |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,14 |
D7S820 | 7,7.1,10 (ATCC=HTB-111; PubMed=25877200) |
7,10 (CLS=300119; Cosmic-CLP=910781; IZSLER=BS TCL 200) | |
7.1,10 (DSMZ=ACC-267) | |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12,14 |
D16S539 | 10,14 (ATCC=HTB-111; CLS=300119; DSMZ=ACC-267; PubMed=25877200) |
10,14,15 (Cosmic-CLP=910781; IZSLER=BS TCL 200) | |
D18S51 | 15,18 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 23 |
Penta D | 9,11 |
Penta E | 9,16 |
TH01 | 9.3,10 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 14,20 |
参考文献
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