
HEM15a细胞(人永生化子宫内膜异位细胞-内膜间质细胞) (暂不提供)
- 来源:子宫
- 细胞特征:贴壁细胞 ,梭形
- 培养基:DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
- 其他:hEM15A细胞表达雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)
hEM15A细胞系是从一位33岁女性子宫内膜异位症患者的在位内膜间质细胞中提取并经过永生化处理后建立。HEM15a细胞能够在体外长期增殖,具有稳定的生长特性。hEM15A细胞保留了子宫内膜间质细胞的特征,适用于研究子宫内膜异位症的病理机制及其相关治疗方法。HEM15a细胞为深入理解子宫内膜异位症的生物学特性、发病机制以及开发潜在治疗策略提供了关键的研究工具。
HEM15a内膜间质细胞特性特征
激素受体表达:hEM15A细胞表达雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR),对性激素的反应能力。
基因组稳定性:hEM15A细胞在多代传代中保持了较高的基因组稳定性,适合长期实验使用。
转录组特征:研究表明,HEM15a细胞系可能表达与子宫内膜异位症相关的多种基因,包括炎症因子和生长因子,这些基因参与调控细胞增殖、迁移及凋亡等过程。
疾病模型:HEM15a细胞为研究子宫内膜异位症的病理机制提供了重要的实验模型,有助于探索其发病机制及相关信号通路。
药物筛选:HEM15a细胞可用于评估新药物对子宫内膜异位症的治疗效果,为临床治疗提供潜在的新策略
HEM15a人永生化子宫内膜异位细胞参数表
细胞名称 | HEM15a细胞(人子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞) |
细胞别称 | hEM 15A;hEM15A |
组织来源 | 人子宫 |
疾病特征 | 子宫内膜异位症 |
细胞形态 | 梭形 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
传代比例 | 1:2至1:6,每周2-3次 |
传代密度 | 细胞密度达80%-90%时进行传代 |
传代方法 | 使用不含钙、镁的PBS润洗后加消化液进行消化 |
培养基 | DMEM/F12 + 10%-15% FBS + 1% 双抗(PS) |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
倍增时间 | 每周2至3次 |
冻存条件 | 90%完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测 | 阴性 |
细菌真菌检测 | 阴性 |
病原体检测 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
使用权限 | 仅限于科学研究,不可用于动物或人类疾病的治疗产品 |
安全性说明 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞视为有潜在生物危害性,需在二级生物安全台内操作。 |
保藏机构 | CCTCC; GDC0601,GeneCopoeia; SL430 |
培养教程
HEM15a人永生化子宫内膜异位细胞内膜间质细胞培养教程
细胞复苏
确认hEM15A细胞的冻存管标识,并准备好培养基,推荐使用DMEM/F12培养基,加入10%胎牛血清(FBS)和1%双抗(青霉素和链霉素)。
将hEM15A细胞冻存管置于37℃水浴中快速摇晃解冻,直到细胞完全融化(约1-2分钟)。随后,将4 mL预先准备好的培养基加入解冻的hEM15A细胞中,轻轻混合均匀。
在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液。加入1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹匀,使hEM15A细胞重悬。
将hEM15A细胞悬液转移到T25培养瓶中,或加入10 cm培养皿中(约8 mL培养基),然后放入37℃、5% CO₂的培养箱中,过夜培养。
次日检查hEM15A细胞的生长状态和密度,确保细胞适合继续培养。
细胞传代
当hEM15A细胞的密度达到80%-90%时,可以进行传代。准备新的培养瓶和培养基。
弃去旧培养基,使用不含钙、镁的PBS冲洗hEM15A细胞1-2次。加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),置于37℃培养箱中消化1-2分钟。在显微镜下观察,若大部分hEM15A细胞变圆并脱落,立即轻敲几下培养瓶,加2-3 mL完全培养基以终止消化。
将消化后的hEM15A细胞悬液转移至无菌离心管中,以1000 RPM离心5分钟,弃去上清液,补加适量的新鲜培养基(1-2 mL),轻轻吹匀。
将hEM15A细胞悬液按1:2至1:6的比例分装到新的培养瓶或培养皿中,每个瓶中加入8 mL培养基,随后放回37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。
细胞冻存
配制冻存液,采用90%胎牛血清和10% DMSO的混合液(现用现配)。
当hEM15A细胞生长良好时,弃去培养基,使用PBS冲洗细胞后加入胰酶进行消化。消化后终止反应并离心收集hEM15A细胞。
用冻存液重悬hEM15A细胞,确保混合均匀。按每个冻存管大于1×10^6个细胞的标准分配至冻存管中,并做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中(-80℃冰箱中至少2小时),随后转移至液氮中储存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 19,25 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 10,11 |
D6S1043 | 14,18 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 10,13 |
D12S391 | 21,22 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 10,12 |
D18S51 | 15,17 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22,23 |
Penta E | 14,16 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,18 |