
rl95-2细胞(人子宫内膜癌细胞)
- 来源:子宫内膜
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM/F12+5μg/ml Insulin+10% FBS+1% P/S
- 其他:表达特征:雌激素受体阳性;表达α角蛋白;具微绒毛
RL95-2细胞是一种上皮样人子宫内膜癌细胞,来源于一名65岁白人女性患者的子宫内膜腺癌组织,由DL Way于1983年建立。rl95-2细胞常用于癌症研究,具有特征性结构,包括α角蛋白、明确的连接复合体、张力丝和表面微绒毛。rl95-2细胞表达雌激素受体,是阳性标记的细胞系。
rl95-2细胞特性特征
分子特征:表达α角蛋白;细胞表面具有微绒毛;具有明确的连接复合体和张力丝;
表达特征:雌激素受体阳性(estrogen receptor positive)
生长特性:贴壁生长;极容易形成细胞团,不易消化成单个细胞;贴壁速度较慢;倾向于团状生长,不会完全覆盖培养皿
rl95-2细胞参数表
细胞名称 | RL95-2人子宫内膜癌细胞 (Human Endometrial Cancer Cells) |
别称 | RL-95-2; RL-952; RL952; RL95 |
来源 | 人源;65岁女性;子宫内膜腺癌 |
建立信息 | 1983年由DL Way建立;细胞代数10代以内 |
形态特征 | 上皮细胞样;贴壁生长 |
培养基 | 89% DMEM/F-12 + 10% FBS + 0.005mg/ml 胰岛素 + 1%双抗 |
培养环境 | 37℃;95%空气 + 5%CO2;湿度70-80% |
传代信息 | 比例1:2至1:4;每周2-3次;密度达80%以上 |
生长参数 | 倍增时间约22小时;贴壁较慢;易抱团生长 |
特殊现象 | 培养中可能有少量漂浮细胞;不易消化成单个细胞 |
表达特征 | 雌激素受体阳性;表达α角蛋白;具微绒毛 |
结构特征 | 具有连接复合体和张力丝 |
安全等级 | 生物安全等级1级 |
规格与检测 | 1×10^6 cells/T25瓶或1mL管;支原体阴性;STR已鉴定 |
保藏信息 | ATCC (CRL-1671);中科院分子细胞科学中心 |
限制与特性 | 仅用于科研;易成团;不易消化成单细胞 |
运输方式 | T25瓶(常温)或冻存管(干冰) |
收货处理 | T25瓶:37℃培养2-4h;冻存管:液氮或直接复苏 |
保存条件 | T25瓶:37℃培养箱;冻存管:液氮 |
供应与处理 | 现货1周左右;收货后按规定处理 |
传代建议 | 首次1:2;密度80%-90%可传代 |
冻存方法 | 90%血清+10% DMSO;现配;梯度降温;液氮储存 |
培养教程
rl95-2人子宫内膜癌细胞系培养教程
冻存RL95-2细胞的复苏
在37℃水浴中快速解冻RL95-2细胞冻存管,约1-2分钟。
使用75%酒精消毒管壁后,在无菌操作台内操作RL95-2细胞。
将RL95-2细胞悬液转入含有9mL完全培养基的15mL离心管,1000rpm离心5分钟。
弃去上清,用新鲜培养基重悬RL95-2细胞,转移到T25培养瓶。
将RL95-2细胞置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
RL95-2细胞接收后的处理
收到RL95-2细胞的T25瓶后,用75%酒精消毒瓶壁,并放入37℃培养箱2-3小时。
显微镜下检查RL95-2细胞状态,确保无污染且RL95-2细胞状态良好。
如果RL95-2细胞密度低于60%,弃去旧培养基,加入6-8mL新鲜培养基继续培养。
当RL95-2细胞密度达70%-80%以上时,可进行传代。
RL95-2细胞传代操作
传代比例:首次传代比例建议为1:2,即一个T25瓶RL95-2细胞分为两个T25瓶或两个6cm培养皿。
弃去RL95-2细胞的旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育2-5分钟,观察RL95-2细胞开始脱落。
加入完全培养基终止消化,轻轻吹打RL95-2细胞使其脱离瓶壁。
将RL95-2细胞悬液转移到离心管中,1000rpm离心5分钟。
弃去上清,加入新鲜培养基重悬RL95-2细胞,并按1:2比例分装到新T25瓶中。
放入培养箱中继续培养RL95-2细胞。
RL95-2细胞冻存操作
当RL95-2细胞密度达80%-90%时,弃去培养基,用PBS冲洗。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化RL95-2细胞,终止消化后离心收集细胞。
重悬于冻存液(90% FBS + 10% DMSO)中,分装到RL95-2细胞冻存管。
逐步降温:先放置于-80℃过夜,然后转入液氮中长期保存RL95-2细胞。
RL95-2细胞注意事项
运输用培养基:运输过程中使用的RL95-2细胞培养基不能再用于培养,请换用新配制的完全培养基。
细胞状态观察:每次传代前后都要显微镜下观察RL95-2细胞状态,确保健康无污染。
贴壁细胞:RL95-2细胞贴壁较慢,消化处理后24小时内尽量不要移动培养瓶,以免影响贴壁。
特殊现象:RL95-2细胞培养过程中可能有少量细胞漂浮,属于正常现象。
RL95-2细胞优化措施
消化时间控制:严格控制RL95-2细胞消化时间(2-5分钟),密切观察细胞脱落情况,及时终止消化。
轻柔操作:消化后使用含血清的培养基轻轻吹打RL95-2细胞,避免过度用力。
过滤处理:若RL95-2细胞悬液中有明显细胞团,使用40μm或70μm的细胞筛网过滤。
降低接种密度:初次传代建议1:2比例,避免RL95-2细胞接种密度过高。
培养基调整:可增加血清浓度至15-20%以促进RL95-2细胞贴壁。
静置培养:接种后24小时内不要移动培养瓶,确保RL95-2细胞充分贴壁。
及时换液:首次接种后48-72小时更换培养基,以去除未贴壁RL95-2细胞。
定期观察:每日观察RL95-2细胞生长状态,及时处理细胞团。
提前传代:当RL95-2细胞密度达70-80%时进行传代,防止过度生长。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D1S1656 | 13,19.3 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 22,23 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 10,14 |
D10S1248 | 14,15 |
D12S391 | 15,21 |
D13S317 | 8,12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 10,14 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,29 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 20,22 |
Penta D | 9 |
Penta E | 5,11 |
TH01 | 9,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,20 |