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rl95-2细胞(人子宫内膜癌细胞)货号:STM-CL-5305 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

rl95-2细胞(人子宫内膜癌细胞)

  • 来源:子宫内膜
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM/F12+5μg/ml Insulin+10% FBS+1% P/S
  • 其他:表达特征:雌激素受体阳性;表达α角蛋白;具微绒毛
价格:¥ 1,300.00
提供STR鉴定报告

RL95-2细胞是一种上皮样人子宫内膜癌细胞,来源于一名65岁白人女性患者的子宫内膜腺癌组织,由DL Way于1983年建立。rl95-2细胞常用于癌症研究,具有特征性结构,包括α角蛋白、明确的连接复合体、张力丝和表面微绒毛。rl95-2细胞表达雌激素受体,是阳性标记的细胞系。

rl95-2细胞特性特征

  • 分子特征:表达α角蛋白;细胞表面具有微绒毛;具有明确的连接复合体和张力丝;

  • 表达特征:雌激素受体阳性(estrogen receptor positive)

  • 生长特性:贴壁生长;极容易形成细胞团,不易消化成单个细胞;贴壁速度较慢;倾向于团状生长,不会完全覆盖培养皿

rl95-2细胞参数表

细胞名称RL95-2人子宫内膜癌细胞 (Human Endometrial Cancer Cells)
别称RL-95-2; RL-952; RL952; RL95
来源人源;65岁女性;子宫内膜腺癌
建立信息1983年由DL Way建立;细胞代数10代以内
形态特征上皮细胞样;贴壁生长
培养基89% DMEM/F-12 + 10% FBS + 0.005mg/ml 胰岛素 + 1%双抗
培养环境37℃;95%空气 + 5%CO2;湿度70-80%
传代信息比例1:2至1:4;每周2-3次;密度达80%以上
生长参数倍增时间约22小时;贴壁较慢;易抱团生长
特殊现象培养中可能有少量漂浮细胞;不易消化成单个细胞
表达特征雌激素受体阳性;表达α角蛋白;具微绒毛
结构特征具有连接复合体和张力丝
安全等级生物安全等级1级
规格与检测1×10^6 cells/T25瓶或1mL管;支原体阴性;STR已鉴定
保藏信息ATCC (CRL-1671);中科院分子细胞科学中心
限制与特性仅用于科研;易成团;不易消化成单细胞
运输方式T25瓶(常温)或冻存管(干冰)
收货处理T25瓶:37℃培养2-4h;冻存管:液氮或直接复苏
保存条件T25瓶:37℃培养箱;冻存管:液氮
供应与处理现货1周左右;收货后按规定处理
传代建议首次1:2;密度80%-90%可传代
冻存方法90%血清+10% DMSO;现配;梯度降温;液氮储存

培养教程

rl95-2人子宫内膜癌细胞系培养教程

冻存RL95-2细胞的复苏

  • 在37℃水浴中快速解冻RL95-2细胞冻存管,约1-2分钟。

  • 使用75%酒精消毒管壁后,在无菌操作台内操作RL95-2细胞。

  • 将RL95-2细胞悬液转入含有9mL完全培养基的15mL离心管,1000rpm离心5分钟。

  • 弃去上清,用新鲜培养基重悬RL95-2细胞,转移到T25培养瓶。

  • 将RL95-2细胞置于37℃、5% CO2培养箱中培养。

RL95-2细胞接收后的处理

  • 收到RL95-2细胞的T25瓶后,用75%酒精消毒瓶壁,并放入37℃培养箱2-3小时。

  • 显微镜下检查RL95-2细胞状态,确保无污染且RL95-2细胞状态良好。

  • 如果RL95-2细胞密度低于60%,弃去旧培养基,加入6-8mL新鲜培养基继续培养。

  • 当RL95-2细胞密度达70%-80%以上时,可进行传代。

RL95-2细胞传代操作

传代比例:首次传代比例建议为1:2,即一个T25瓶RL95-2细胞分为两个T25瓶或两个6cm培养皿。

  • 弃去RL95-2细胞的旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞。

  • 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育2-5分钟,观察RL95-2细胞开始脱落。

  • 加入完全培养基终止消化,轻轻吹打RL95-2细胞使其脱离瓶壁。

  • 将RL95-2细胞悬液转移到离心管中,1000rpm离心5分钟。

  • 弃去上清,加入新鲜培养基重悬RL95-2细胞,并按1:2比例分装到新T25瓶中。

  • 放入培养箱中继续培养RL95-2细胞。

RL95-2细胞冻存操作

  • 当RL95-2细胞密度达80%-90%时,弃去培养基,用PBS冲洗。

  • 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化RL95-2细胞,终止消化后离心收集细胞。

  • 重悬于冻存液(90% FBS + 10% DMSO)中,分装到RL95-2细胞冻存管。

  • 逐步降温:先放置于-80℃过夜,然后转入液氮中长期保存RL95-2细胞。

RL95-2细胞注意事项

  • 运输用培养基:运输过程中使用的RL95-2细胞培养基不能再用于培养,请换用新配制的完全培养基。

  • 细胞状态观察:每次传代前后都要显微镜下观察RL95-2细胞状态,确保健康无污染。

  • 贴壁细胞:RL95-2细胞贴壁较慢,消化处理后24小时内尽量不要移动培养瓶,以免影响贴壁。

  • 特殊现象:RL95-2细胞培养过程中可能有少量细胞漂浮,属于正常现象。

RL95-2细胞优化措施

  • 消化时间控制:严格控制RL95-2细胞消化时间(2-5分钟),密切观察细胞脱落情况,及时终止消化。

  • 轻柔操作:消化后使用含血清的培养基轻轻吹打RL95-2细胞,避免过度用力。

  • 过滤处理:若RL95-2细胞悬液中有明显细胞团,使用40μm或70μm的细胞筛网过滤。

  • 降低接种密度:初次传代建议1:2比例,避免RL95-2细胞接种密度过高。

  • 培养基调整:可增加血清浓度至15-20%以促进RL95-2细胞贴壁。

  • 静置培养:接种后24小时内不要移动培养瓶,确保RL95-2细胞充分贴壁。

  • 及时换液:首次接种后48-72小时更换培养基,以去除未贴壁RL95-2细胞。

  • 定期观察:每日观察RL95-2细胞生长状态,及时处理细胞团。

  • 提前传代:当RL95-2细胞密度达70-80%时进行传代,防止过度生长。

相关资料

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STR鉴定及相关

AmelogeninX
CSF1PO10,11
D1S165613,19.3
D2S44111,14
D2S133822,23
D3S135814,16
D5S81810,11
D7S82010
D8S117910,14
D10S124814,15
D12S39115,21
D13S3178,12
D16S53911,13
D18S5110,14
D19S43315
D21S1128,29
D22S104515
FGA20,22
Penta D9
Penta E5,11
TH019,9.3
TPOX8
vWA16,20

参考文献

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