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12z细胞(永生化人子宫内膜异位症细胞)货号:STM-CL-5641 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

12z细胞(永生化人子宫内膜异位症细胞)

  • 来源:子宫内膜
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM-F12+ FBS 10% +P/S 1%
  • 其他:12z细胞表达多种与子宫内膜异位症相关的标志物,如SV40T、细胞角蛋白、波形蛋白、N-钙黏蛋白、雌激素受体α和β、孕激素受体及芳香化酶P450
价格:¥ 3,800.00
提供STR鉴定报告

12Z细胞系是一种源自37岁女性患者子宫内膜组织的永生化人子宫内膜异位症细胞系。在患者腹腔镜手术中提取了子宫内膜样组织,随后通过SV40病毒转染使细胞获得永生化特性,能够在体外条件下无限增殖。12Z细胞属于转化的上皮样细胞,是研究子宫内膜异位症病理机制的重要模型。12Z细胞广泛用于与子宫内膜异位症相关的基因功能研究、疾病标志物的鉴定以及潜在治疗靶点的探索,具有重要的科研价值。

12z细胞特性特征

  • 基因表达:12Z细胞系表达多种与子宫内膜异位症相关的基因和标志物,包括雌激素受体α和β、孕激素受体、N-钙粘蛋白等。

  • 细胞标志物:12Z细胞表现出体内可见的子宫内膜异位症病变标志物的表达,包括SV40T抗原和其他上皮细胞特征。

12z永生化人子宫内膜异位症细胞参数表

细胞名称12z细胞(永生化人子宫内膜异位症细胞系)
细胞别称12Z
来源37岁女性患者的子宫内膜组织
细胞类型转化细胞系,上皮样细胞
倍增时间约31小时
组织来源子宫内膜异位症
生物安全等级BSL-2
培养基DMEM/F12 + 10% 胎牛血清 + 1% P/S
培养条件37°C,5% CO₂
pH值7.2-7.4
气体组成95%空气 + 5%二氧化碳
培养瓶规格T25、T75等
培养基更换频率每2-3天更换一次
传代比例1:2至1:4(首次传代建议1:2)
消化方法使用0.25%胰蛋白酶(含EDTA)消化1-2分钟
冻存条件基础培养基60% + 胎牛血清30% + DMSO10%
冻存液推荐使用无血清冻存液
储存方式液氮中长期保存
支原体检测阴性
冻存有效期长期保存,建议每3个月检测一次
细胞形态上皮细胞样
生长特性贴壁生长
侵袭能力标志物N-钙粘蛋白阳性

培养教程

12z细胞(永生化人子宫内膜异位症细胞)培养教程

12Z细胞解冻

  • 准备预热至37°C的完全培养基(如DMEM/F12)以及T25培养瓶。

  • 使用37°C水浴快速解冻12Z细胞冻存管,避免细胞长时间暴露在非理想环境中。

  • 将冻存的12Z细胞冻存管从液氮中取出,迅速放入37°C水浴中,轻轻摇晃,直至细胞完全解冻(约1-2分钟)。

  • 将解冻后的细胞悬液转移到盛有9 mL预热培养基的离心管中,以125 × g离心7分钟,去除冷冻保护剂。

  • 弃去上清液,将细胞重悬于5 mL完全培养基中,转移至T25培养瓶,放置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

  • 每天通过显微镜观察12Z细胞的形态、贴壁及汇合情况,确保其逐步恢复到健康状态。

12Z细胞培养

  • 采用DMEM/F12培养基,加入10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素(P/S)。

  • 在37°C、5% CO₂的恒温培养箱中培养12Z细胞。

  • 每2-3天更换一次培养基,去除代谢废物并补充营养,保持12Z细胞的生长状态。

12Z细胞传代

  • 当12Z细胞汇合度达到80%-90%时进行传代操作。

  • 去除旧的培养基,用无钙镁PBS缓冲液洗涤12Z细胞,去除残余血清。

  • 添加2-4 mL胰蛋白酶-EDTA溶液,置于37°C培养箱中消化2-5分钟。

  • 观察细胞间隙变大时,终止消化,加入完全培养基中和胰蛋白酶。

  • 轻轻吹打瓶壁使12Z细胞脱落,制成细胞悬液。

  • 使用血球计数板计数细胞后,根据1:3至1:5的比例将细胞接种至新培养瓶中。

12Z细胞冻存

  • 配制含5% DMSO和95%完全培养基的冷冻保存液,确保细胞在低温下的存活率。

  • 收集对数生长期的12Z细胞,以125 × g离心7分钟,弃去上清液。

  • 将细胞重悬于冷冻培养基中,调整细胞浓度为2-5 × 10⁶个/mL。

  • 分装1 mL细胞悬液至冻存管,逐步降温(如使用程序降温盒)后,存放于-80°C过夜,最终转移至液氮中长期保存。

注意事项

  • 无菌操作:操作过程中全程保持无菌环境,避免12Z细胞污染。

  • 记录观察:定期记录12Z细胞的形态、贴壁状态及生长速率。

  • 培养基质量:确保使用优质胎牛血清和培养基,以提供充足营养。

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参考文献

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