HeLa-S3细胞系（人宫颈癌细胞系）

HeLa S3细胞是从HeLa细胞系克隆衍生出的人宫颈癌细胞。helas3细胞克隆在哺乳动物细胞的克隆分析中对研究染色体变异、细胞营养需求和斑块形成能力非常有用。helas3细胞是转染实验的理想宿主。helas3细胞含有人乳头瘤病毒18型（HPV-18）序列。HeLa S3 细胞系于1955年由 Puck TT、Marcus PI 和 Cieciura SJ 从宫颈癌组织中建立。

HeLa S3 细胞中均存在中等大小的稳心标记物，其标记包括一个 M1 拷贝，一个 M2 拷贝，两个 M3 拷贝和一个 M4 拷贝。helas3细胞系存在一定的细胞遗传不稳定性。

HeLa-S3细胞系特性特征

• 病毒序列：含有人乳头瘤病毒18型（HPV-18）序列.

• 角蛋白表达：通过免疫过氧化物酶染色，细胞角蛋白呈阳性.
  

• 同工酶表达：G6PD 和 A

• 转染宿主：helas3细胞适合作为转染宿主
  

• 研究应用：用于染色体变异研究、细胞营养研究、斑块形成能力相关的哺乳动物细胞群克隆分析.

• helas3细胞对以下病毒具有易感性：水疱性口炎病毒（格拉斯哥株和奥赛株）、脑心肌炎病毒、人腺病毒5型

HeLa-S3细胞系参数表

HeLa-S3人宫颈癌细胞系培养教程

HeLa S3 细胞复苏

• 将冻存的 HeLa S3 细胞从液氮中取出，在37°C水浴中快速解冻。

• 将 HeLa S3 细胞悬液转移到含有预热培养基的T25培养瓶中。

• 将培养瓶置于37°C、5% CO2的培养箱中静置培养2-4小时，让 HeLa S3 细胞贴壁。

HeLa S3 细胞常规培养

• 培养基：DMEM或F12K，添加5-10%胎牛血清和1%双抗。

• 培养条件：37°C，5% CO2，70-80%湿度。

• 每2-3天更换 HeLa S3 细胞的培养基。
  

• 定期观察 HeLa S3 细胞状态，确保细胞健康和适当的密度。

HeLa S3 细胞传代

• 当 HeLa S3 细胞密度达到80-100%时进行传代。
  

• 用PBS清洗 HeLa S3 细胞，然后加入胰酶消化细胞。

• 收集消化后的 HeLa S3 细胞，900rpm离心5分钟。

• 按1:2至1:5的比例传代到新的培养瓶中，继续培养 HeLa S3 细胞。

HeLa S3 细胞悬浮培养驯化（如需要）

• 将贴壁培养的 HeLa S3 细胞消化后，用EX-Cell®293培养基重悬。
  

• 转入125ml摇瓶中，初始密度约5×10^5 HeLa S3 cells/ml。

• 培养条件：37°C，5% CO2，110rpm振荡培养。

• 每3天传代一次，维持 HeLa S3 细胞密度在4×10^6 cells/ml左右。

HeLa S3 细胞悬浮培养扩大

• 培养基：VirusPro®CD HeLa 和 EX-Cell®293 1:1组合。

• 将 HeLa S3 细胞悬浮培养扩大至50L一次性生物反应器。
  

• 接种密度约为1.0×10^6 HeLa S3 cells/ml。

HeLa S3 细胞病毒扩增（如适用）

• 最佳接毒密度：3-4×10^6 HeLa S3 cells/ml。
  

• 最佳MOI：0.02-0.1 pfu/HeLa S3 cell。

HeLa S3 细胞冻存

• 收集对数生长期的 HeLa S3 细胞。
  

• 使用90%血清和10% DMSO的冻存液。

• HeLa S3 细胞密度调整至5×10^6至1×10^7 HeLa S3 cells/ml。

• 将 HeLa S3 细胞悬液分装到冻存管中，每管1ml。

• 放入-80°C冰箱24小时后转入液氮长期保存 HeLa S3 细胞。

HeLa S3 细胞培养注意事项

• 定期检查 HeLa S3 细胞形态和生长状况：

• 使用倒置显微镜观察 HeLa S3 细胞形态和密度，确保健康状态。

• 健康的 HeLa S3 细胞应呈上皮样，贴壁良好，形态均一。

  
  

• 避免 HeLa S3 细胞过度生长或密度过高：

• 及时传代 HeLa S3 细胞，保持细胞在适当的密度范围内。

• 传代比例一般为1:2至1:5。

  
  

• 无菌操作，预防 HeLa S3 细胞污染：

• 确保所有操作在无菌环境下进行。

• 定期检查培养基和 HeLa S3 细胞状态，及时发现和处理污染。

  
  

• HeLa S3 细胞鉴定：

• 定期进行 HeLa S3 细胞鉴定，确保细胞特性稳定。

• HeLa S3 细胞应显示角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性，含有 HPV-18 序列。

HeLa S3 细胞常见问题

• 污染问题：定期检查 HeLa S3 细胞培养基和细胞状态，及时发现和处理污染。

• 细胞过度生长：HeLa S3 细胞密度过高会影响细胞健康，需及时传代。

• 培养基更换：HeLa S3 细胞培养基营养耗尽时需及时更换，通常每2-3天更换一次。

• 细胞贴壁不良：复苏后 HeLa S3 细胞可能贴壁不良，需静置培养2-4小时以稳定细胞状态。

• 悬浮培养驯化：从贴壁生长转换为悬浮生长时，需逐步适应，避免 HeLa S3 细胞应激。