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HT3细胞系（人子宫颈癌细胞系）货号：STM-CL-5179 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

HT3细胞系（人子宫颈癌细胞系）

  • 来源：宫颈癌
  • 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基：生长培养基：McCoy's 5A＋10% FBS＋1%P/S
  • 其他：肿瘤基因：p53+，pRB+ ； 基因表达：血型A，Rh+
Tags： 子宫颈癌细胞    
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HT-3细胞是一种上皮样细胞，是从一名58岁的白人女性宫颈癌患者的淋巴结中分离。

HT-3细胞属于亚三倍体至超三倍体范围（+A，+B，+C，+D，+F，-E），其模态数在65至66之间。HT3细胞系中存在双心核、端心核碎片、分钟、易位、环、二次收缩、断裂、粉碎以及大的近心核和大的近中心核标记等异常结构。

HT3细胞系特性

  • HT-3 细胞HT-3细胞是上皮样细胞，可用于癌症研究

  • HT-3 细胞的超微结构特点包括大量微绒毛、突出的核仁、稀疏的粗面内质网（RER）以及发育良好的高尔基体

  • HT-3 细胞表达视网膜母细胞瘤蛋白（pRB），但大小异常；P53 表达升高，存在密码子245处的点突变（Gly -> Val）

  • HT-3 细胞检测：人乳头瘤病毒 DNA 和 RNA 均为阴性、未观察到病毒颗粒

  • HT-3 细胞在裸鼠体内形成低分化表皮样癌（III级）、在类固醇治疗的仓鼠中也能形成肿瘤

  • 肿瘤基因：p53+，pRB+

  • 基因表达：血型A，Rh+

  • 同工酶包括 AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，1

  • HT-3 细胞在1965年发现并消除了支原体污染

HT3细胞系参数表

细胞名称HT3细胞系（人子宫颈癌细胞系）
英文名称HT-3 Cells；HT3
中文名称人子宫颈癌细胞
组织来源宫颈癌；女性；58岁
细胞形态上皮细胞样
生长特性贴壁细胞
生物安全等级BSL-1
倍增时间2.48 天 (PubMed=29156801)
致瘤性是，在裸鼠身上；形成低分化表皮样癌（III级）；在类固醇治疗的仓鼠中也会形成肿瘤
视网膜母细胞瘤蛋白 (pRB)存在，但大小异常
p53表达升高，密码子245处有一个点突变，导致Gly -> Val取代
人乳头瘤病毒DNA和RNA阴性
支原体检测阴性
超微结构微绒毛多，核仁突出，粗面内质网（RER）稀疏，高尔基体发育良好
运输方式常温运输（T25方瓶）或干冰运输（冻存管）
完全培养基McCoy's 5A + 10% FBS + 1% P/S
培养环境37℃，5% CO2，饱和湿度
推荐传代比例1:2 - 1:5
推荐换液频率2-3 次/周
冻存条件冻存液：55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，储存于液氮中
基因表达血型 A；Rh+，p53+，pRB+
同工酶AK-1,1；ES-D,1；G6PD,B；GLO-I,1-2；Me-2,1；PGM1,1；PGM3,1
保藏机构ATCC；HTB-32

培养教程

HT3人子宫颈癌细胞系培养教程

培养前准备

  • 用75%酒精喷洒整个HT-3 细胞培养瓶消毒

  • 将HT-3 细胞培养瓶平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲

  • 置于无菌操作台，打开HT-3 细胞培养瓶瓶口，将其中的培养液去掉

  • 加入5-6mL新鲜培养基（以T25培养瓶为例），置于细胞培养箱中培养

  • 根据HT-3 细胞生长状况及培养基颜色变化进行换液及传代，一般2到3天换一次液

HT-3细胞传代

  • 当HT-3 细胞长满瓶底面积80%-90%时，进行传代。传代比例为1:3到1:8。

  • 将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热

  • 倒掉HT-3 细胞培养瓶中的培养基，加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去

  • 加入1-2 ml预热好的胰酶，置于37℃孵育消化

  • 显微镜下观察消化情况，HT-3 细胞触角回收变圆且轻拍瓶壁见HT-3 细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间以便下次消化

  • 消化好后加入3ml完全培养基终止消化

  • 用移液枪轻轻吹打瓶壁上的HT-3 细胞，使之完全脱落，收集HT-3 细胞悬液

  • 1200rpm离心3分钟，弃上清，加入完全培养基重悬HT-3 细胞，进行传代

HT-3细胞冻存细胞的复苏

  • 将含有1mL HT-3 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻

  • 加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀

  • 在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液，用完全培养基重悬HT-3 细胞

  • 将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中，37℃培养过夜

  • 第二天显微镜下观察HT-3 细胞生长情况和细胞密度

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D3S135815
D5S81810,13
D7S8208,10
D8S117913,14
D13S31712
D16S53912,13
D18S5115
D19S43314
D21S1129
FGA21,22
Penta D12
Penta E11,12
TH016,7
TPOX8
vWA15,18

参考文献

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