Hela229细胞（人宫颈癌细胞）

HeLa229细胞是从亲本HeLa细胞系衍生出的宫颈腺癌细胞，最初来源于一名叫亨丽埃塔·拉克斯（Henrietta Lacks）的女性宫颈肿瘤。她于1951年在约翰·霍普金斯医院接受宫颈癌治疗时，其肿瘤组织被采样，成为研究界广泛使用的细胞系之一。值得注意的是，当时的采样并未征得她的同意。

Hela229细胞特性特征

• 对脊髓灰质炎病毒的抗性：Hela229细胞对脊髓灰质炎病毒具有相对的抵抗力。
  

• 易感病毒：Hela229细胞对人腺病毒7和水疱性口炎病毒表现出易感性。

• 基因表达：通过免疫过氧化物酶染色，Hela229细胞的角蛋白呈阳性，表明其上皮细胞特征。
  

• 同工酶：检测到G6PD（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶）和A同工酶的存在。

• 乳头瘤病毒DNA：通过PCR技术证实，Hela229细胞系携带有乳头状瘤病毒的DNA序列

• HeLa229细胞能够轻松适应悬浮培养环境
  

Hela229细胞参数表

Hela229人宫颈癌细胞培养教程

HeLa 229细胞复苏

• 从液氮中取出含有1mL HeLa 229细胞悬液的冻存管，迅速放入37°C的水浴中解冻，期间轻轻摇动。

• 解冻后，加入4mL含10%胎牛血清（FBS）的Minimum Essential Medium（MEM）培养基，轻轻混合均匀，确保HeLa 229细胞得到充分复苏。

• 在1000rpm离心4分钟，弃去上清液，保留HeLa 229细胞。

• 用1-2mL新鲜培养基重悬HeLa 229细胞，轻轻吹打均匀后，将细胞加入到培养瓶中，并置于37°C、5% CO₂的培养箱中过夜培养。

• 第二天换液并检查HeLa 229细胞的生长情况和密度。

HeLa 229细胞常规传代

• 当HeLa 229细胞密度达到80%-90%时，可以进行传代培养。

• 弃去培养基，使用无钙镁的PBS缓冲液冲洗HeLa 229细胞1-2次，以去除残留的培养基。

• 加入0.25%胰酶-0.53mM EDTA消化液，置于37°C培养箱中消化1-2分钟，观察HeLa 229细胞是否脱落。

• 当HeLa 229细胞脱落后，加入培养基终止消化，轻轻吹打使细胞均匀悬浮。

• 在1000rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 加入1-2mL培养基重悬HeLa 229细胞，并按1:2至1:5的比例分种至新的培养瓶中，继续培养。

HeLa 229细胞冻存

• 弃去培养基，使用PBS缓冲液冲洗HeLa 229细胞1-2次，去除残留培养基和废物。

• 加入1mL胰酶消化HeLa 229细胞，待细胞变圆并脱落后，加入2mL完全培养基终止消化。

• 在1000rpm离心5分钟，弃去上清液，保留HeLa 229细胞沉淀。

• 用含8%DMSO和20%FBS的培养基重悬HeLa 229细胞。

• 按每1mL分装HeLa 229细胞至冻存管中，并放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱2小时以上后转移至液氮保存。

HeLa 229细胞分离与纯化

• 细胞培养准备：使用适合HeLa 229细胞的培养基，如MEM或RPMI-1640，加入10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（P/S），在37°C、5% CO₂的条件下培养HeLa 229细胞。

• HeLa 229细胞传代：当HeLa 229细胞密度达到80%-90%时，按标准传代步骤进行细胞消化、重悬并传代，确保HeLa 229细胞的健康生长。

  
  

• HeLa 229细胞纯化方法：

• 密度梯度离心：使用Ficoll或Percoll密度梯度介质分离HeLa 229细胞，获得均一的细胞群体。

• 流式细胞术：通过特定的细胞表面标志物，进行HeLa 229细胞的分选和纯化。

  
  

• HeLa 229细胞重悬：在新鲜培养基中重悬HeLa 229细胞，确保均匀分散，并使用血球计数板测定细胞浓度。