BV2小胶质细胞（小鼠小胶质细胞系）

BV2细胞是一种源自C57BL/6小鼠的小胶质细胞系，经过携带v-raf和v-myc癌基因的J2逆转录病毒的感染永生化。bv2细胞表达细胞核v-myc和细胞质v-RAF癌基因，以及其表面的env-gp70抗原，其独特的特征包括保留了原发性小胶质细胞的形态和功能特征，使其成为研究神经退行性变和大脑炎症的理想模型。

在神经退行性变、毒理学和免疫学中，特别是在像阿尔茨海默病等疾病中，小胶质细胞的作用已成为生物医学研究的关注焦点。BV2细胞作为一种小胶质细胞样细胞系，通过提供连续和可重复的小胶质细胞来源，为研究提供了一个有前景的替代方案。其表达的v-raf/v-myc基因使得BV2细胞表现出增强的代谢和生长能力，是研究小胶质细胞活化和炎症的理想选择。

最近的研究对BV2细胞作为原代小胶质细胞替代品的适用性进行了重新评估。尽管在体外和体内环境中，BV2细胞对脂多糖的反应与小胶质细胞的反应略有差异，但它们仍表现出对一氧化氮的正常调节和对IFN-γ的功能反应。BV2细胞还能有效刺激其他神经胶质细胞，导致星形胶质细胞产生白细胞介素-6（IL-6）。这些特性使得BV2细胞在神经科学研究中被广泛应用，并为深入了解神经系统疾病的发病机制提供了有力工具。

BV2细胞优点：

• 原代小胶质细胞特征：BV2细胞表达原代小胶质细胞的关键生物标志物，如F4/80、CD11b和Iba1，使其成为研究小胶质细胞功能和反应的理想模型之一。

• 永生化：BV2细胞是永生化的细胞系，能够持续生长，为长期细胞培养实验提供了便利。

BV2细胞局限性：

• 小鼠来源：作为小鼠源性细胞系，BV2细胞在人类疾病研究中的适用性可能受到限制。

• 体外模型的局限性：尽管BV2细胞是体外模型的理想选择，但其可能无法完全复制体内大脑中小胶质细胞的复杂特征，因此在解释结果时需谨慎考虑。

BV2细胞在神经科学研究中具有多种应用：

• 神经退行性疾病研究：BV2细胞被广泛用于研究帕金森病、阿尔茨海默病和多发性硬化症等神经退行性疾病。

• 炎症反应研究：BV2细胞适用炎症反应研究。

• 信号通路研究：BV2细胞可用于研究与神经系统相关的细胞信号通路。

• 神经保护机制研究：利用BV2细胞模型，研究人员可以评估不同化合物对神经保护机制的影响。

BV2小胶质细胞参数表

BV2细胞培养与传代详细说明

培养基和培养条件：

• 使用MEM培养基，含有10% FBS（胎牛血清）、1% P/S（青霉素/链霉素）、1% Sodium Pyruvate 100 mM Solution。

• 在37摄氏度、5% CO2的培养箱中培养。

• 定期检查培养基的酸碱度，确保细胞处于适宜的环境中生长。

传代比例和频率：

• 传代比例通常为1:3至1:6之间。

• 每2-3天进行一次换液和传代，以保持细胞的良好状态和生长活力。

传代步骤：

1. 使用移液器将培养瓶中的培养基吸出，转移到无菌离心管中。

• 用PBS润洗细胞，然后将PBS吸出并与前一步的培养基混合。

1. 向培养瓶中加入胰酶，轻轻晃动使其均匀分布，然后将培养瓶放回培养箱中，在37摄氏度下静置消化1-2分钟。

2. 观察细胞的消化情况，当绝大多数细胞变圆并开始脱落时，用手掌心拍打瓶底，然后立即将培养瓶取出，加入适量含血清的培养基终止消化。

3. 将细胞悬液转移至离心管中，以1200 rpm的速度离心3分钟。

4. 弃去上清液，加入新鲜培养基重新悬浮细胞沉淀，并根据传代比例将细胞分装到新的培养瓶或皿中。

5. 最后，轻轻吹几下培养瓶，使细胞均匀分散，然后将其放回培养箱中继续培养。

BV2细胞培养的难点和注意事项：

形态不均一：

• BV2细胞呈半贴壁生长，形态不规则，同时存在贴壁和悬浮细胞。圆形细胞的数量和状态变化可能影响细胞的生长速度和健康程度，因此需要及时调整培养条件。

生长速度快：

• BV2细胞生长速度较快，对培养基的消耗也较快。需要密切关注细胞状态，及时换液和传代，以避免细胞过度生长或停滞不长。

对pH敏感：

• BV2细胞对培养基的pH敏感，过酸或过碱的培养基可能导致细胞状态变差。需要定期检查培养基的酸碱度，并根据需要进行调整。

细胞状态变化：

• BV2细胞容易出现形态和状态的变化，如分化、聚团等。需要及时调整培养条件，避免细胞状态的不稳定影响实验结果。

传代技巧：

• BV2细胞传代过程中需要注意细胞的分离和收集技巧，以避免细胞损伤或污染，影响细胞的生长和健康。