
ID8细胞系(小鼠卵巢上皮癌细胞)
- 来源:卵巢
- 细胞特征:贴壁细胞, 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:ID8细胞系在分子生物学上与人类上皮性卵巢癌非常相似,常用作人类卵巢癌的同基因小鼠模型
ID8细胞系是从晚期传代的C57BL/6小鼠卵巢表面上皮细胞(MOSEC)中建立的10个克隆系之一。这些克隆系中的任何一个通过腹膜内注射至C57BL/6小鼠体内都会导致腹膜肿瘤和腹水的形成。ID8细胞在这10个克隆系中表现出最高的肿瘤负荷,被广泛应用于卵巢癌研究。
ID8细胞系因其生理和生物学特性与人类上皮性卵巢癌的高度相似性,常被用于同基因小鼠模型研究。
ID8细胞系特性特征
自发永生化: ID8细胞系具有自发永生化的特性。
肿瘤形成: ID8细胞通过腹膜内注射到C57BL/6小鼠中会导致腹膜肿瘤和腹水的形成。
生物发光成像: 有些ID8细胞系通过慢病毒转染的方式携带Luc基因(ID8-Luc),可用于生物发光成像研究。这些细胞稳定表达萤火虫荧光素酶,用于活体动物成像实验。
基因表达: ID8细胞系在基因表达上与人类上皮性卵巢癌非常相似,适用于研究卵巢癌的发生、发展和转移。
ID8细胞系参数表
细胞名称 | ID8细胞系(小鼠卵巢上皮癌细胞) |
来源 | C57BL/6小鼠卵巢表面上皮细胞(MOSEC) |
细胞类型 | 上皮细胞样 |
形态生长 | 贴壁生长 |
描述 | 高度公开且特征明确的细胞系;常用作卵巢癌的同系小鼠模型 |
质量控制 | 无污染(支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性);自发永生化 |
培养条件 | 培养基:DMEM(高糖)+ 10% 胎牛血清(FBS);37°C,5% CO₂ |
传代信息 | 比率:1:3 至 1:5;周期:2-3天;培养器皿:T25瓶 |
肿瘤形成 | 腹膜内注射到C57BL/6小鼠中会导致腹膜肿瘤和腹水的形成 |
生物发光 | ID8-Luc细胞系通过慢病毒转染携带Luc基因,用于生物发光成像 |
分子特征 | 生理和生物学上与人类上皮性卵巢癌非常相似; |
应用 | 用于研究卵巢癌的发生、发展和转移; |
培养教程
ID8小鼠卵巢上皮癌细胞系培养教程
细胞复苏
将冻存的ID8细胞迅速从液氮中取出,立即放入37°C水浴中快速解冻(约1-2分钟)。
解冻后用75%酒精消毒冻存管外壁,然后在无菌操作台上打开冻存管,将ID8细胞悬液转移到含有10mL完全培养基的离心管中。
1000rpm离心5分钟,弃去上清,加入新鲜培养基重悬ID8细胞,转移到T25培养瓶中。
细胞培养
将ID8细胞培养瓶放入37°C,5% CO₂培养箱中培养。
每天观察ID8细胞生长状态,及时更换培养基(一般每2-3天更换一次)。
细胞传代
当ID8细胞汇合度达到80-90%时,进行传代。
吸去旧培养基,用PBS缓冲液洗涤ID8细胞一次。
加入适量的0.25%胰蛋白酶消化液,37°C消化1-2分钟,轻轻敲打培养瓶底部使ID8细胞脱落。
加入完全培养基终止消化,轻轻吹打ID8细胞使其分散均匀。
按照1:3至1:5的比例进行传代,将ID8细胞悬液分装到新的T25培养瓶中,加入新鲜培养基。
注意事项
细胞污染:收到ID8细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与供应商联系;在每次操作前后都要进行严格的无菌操作,防止ID8细胞污染。
细胞状态观察:每次传代前后都要在显微镜下观察ID8细胞状态,确保ID8细胞生长良好。记录ID8细胞的形态变化和生长情况,确保实验的可重复性。
培养基更换:定期更换培养基,避免ID8细胞因营养不足或废物积累而影响生长。
培养基和试剂:使用新鲜配制的完全培养基(DMEM+10%FBS+1%P/S)。确保所有使用的试剂和培养基都是无菌的。
细胞观察:每天观察ID8细胞生长状态,及时发现异常;使用低倍镜(4或5X物镜)判断ID8细胞传代密度,10X和20×物镜观察细胞形态。
传代操作:当ID8细胞汇合度达到80-90%时进行传代;传代过程中要注意无菌操作,避免引入污染。
细胞复苏:复苏后24小时观察ID8细胞贴壁情况,及时更换新鲜培养基。
培养条件:保持正确的培养条件:37°C,5% CO₂。
定期检测:定期进行支原体、细菌、酵母和真菌检测,确保ID8细胞无污染。
记录保存:保存ID8细胞状态的照片和记录,以便追踪ID8细胞生长情况。
及时处理异常:如发现污染,立即隔离受污染的ID8细胞,并对培养环境进行彻底消毒。
培养瓶处理:收到ID8细胞后,用75%酒精消毒培养瓶表面。
试剂预热:使用前将培养基等试剂预热至室温或37°C。
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