
COV434细胞(人卵巢颗粒肿瘤细胞)
- 来源:肾;用腺病毒5(Ad5)DNA转化;用腺病毒前区4质粒DNA转染
- 细胞特征:贴壁细胞(有聚团) , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+ 2mM Glutamine+10% FBS+1% P/S
- 其他:COV434细胞在FSH刺激下表现出增殖增加和17β-雌二醇分泌增加
COV434细胞系源自一名27岁女性患有转移性颗粒细胞癌患者的卵巢肿瘤。然而,后续研究表明,COV434细胞系可能实际来源于高钙血症型卵巢小细胞癌。
COV434细胞系的建立来自于患者的实体原发性肿瘤。COV434细胞系保留了许多天然颗粒细胞的特征和功能,包括二倍体、小卵泡样聚集体的生长特性,以及与天然卵丘细胞共培养时形成的细胞间缝隙连接。
COV434细胞特性特征
COV434细胞表达完整的FSH受体、缺乏LH受体、表达特定的凋亡分子标志物、表达TLR(toll样受体)
COV434细胞能分泌17β-雌二醇,并在FSH刺激下增加分泌、对FSH刺激有增殖反应、无黄体生成能力、保留了天然颗粒细胞的许多特征
可能携带p53基因的R248Q热点突变
COV434细胞应用研究
17β-雌二醇对颗粒细胞瘤生长、迁移和侵袭的影响
如果突变型p53(失活R248Q热点突变)作为癌症特异性药物靶点发挥作用
TLR(toll样受体)在细胞系中的表达及其功能
COV434细胞参数表
细胞名称 | COV434细胞(人卵巢颗粒肿瘤细胞) |
别称 | COV-434; COV 434 |
种属来源 | 人;卵巢 |
细胞类型 | 肿瘤细胞(卵巢颗粒瘤) |
疾病类型 | 卵巢颗粒瘤(可能为高钙血症型卵巢小细胞癌) |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样,多边形和纺锤形 |
保藏机构编号 | ECACC; 07071909 |
培养基 | DMEM + 10%胎牛血清 + 1%双抗 |
培养条件 | 37℃,5% CO2,95%空气,70-80%湿度 |
换液/传代 | 换液:2-3天;传代:4-6天;比例:1:2或1:3-1:5 |
消化时间 | 3-5分钟 |
倍增时间 | 每周2-3次 |
冻存液配方 | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 或 90%FBS + 10%DMSO |
安全等级 | BSL-1 |
用途限制 | 仅供科研使用 |
支原体检测 | 阴性 |
内毒素含量 | ≤3 EU/mL |
细胞描述 | 从实体原发肿瘤建立的卵巢颗粒瘤细胞系 |
应用领域 | 17β-雌二醇影响研究;突变型p53研究;TLR表达研究 |
培养教程
COV434人卵巢颗粒肿瘤细胞培养教程
COV434细胞的复苏
将COV434细胞在37℃水浴中快速解冻1-2分钟。
将细胞悬液转移到含预热培养基的离心管中。
以1000rpm离心5分钟,去除冻存液。
弃去上清液,用新鲜培养基重悬COV434细胞。
将细胞转移到培养瓶中,并放入培养箱中培养。
日常培养
换液频率: 每2-3天更换一次培养基。
观察: 观察COV434细胞的生长状态和形态(多边形和纺锤形)。
COV434细胞传代
传代周期: 4-6天;传代比例: 1:3 - 1:5
弃去旧培养基,用PBS洗涤COV434细胞1-2次。
加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液。
将培养瓶置于37℃培养箱中消化3-5分钟。
显微镜下观察COV434细胞变圆并开始脱落。
加入含血清的培养基终止消化。
轻轻吹打COV434细胞,制成单细胞悬液。
按照1:3 - 1:5的比例将细胞接种到新的培养瓶中。
COV434细胞冻存
冻存液配方: 基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS
细胞密度: 1-2 × 10^6 cells/mL
缓慢降温,将COV434细胞置于-80℃冰箱中过夜。
次日转入液氮中长期保存。
注意事项
支原体检测: 定期检测COV434细胞,确保结果为阴性。
内毒素控制: 内毒素含量应控制在≤3 EU/mL。
细胞生长控制: 避免COV434细胞过度生长,保持在对数生长期。
无菌操作: 在所有操作过程中保持无菌条件。
细胞形态观察: 定期观察COV434细胞形态,确保细胞生长状态良好。
细胞特性观察
小卵泡样聚集体: 关注COV434细胞是否形成小卵泡样聚集体。
细胞间缝隙连接: 观察与天然卵丘细胞共培养时是否形成细胞间缝隙连接。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D3S1358 | 15,19 |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 8 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 8,12 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 10,15 |
D21S11 | 28 |
FGA | 24,25 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 12 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 9,11 |
vWA | 16,18 |