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货号：STM-CE-3004 规格：5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
大鼠外周血中性粒细胞（原代细胞）
- 来源：外周血
- 细胞特征：悬浮 , 圆形
- 培养基：原代细胞专用培养基
- 其他：在非特异性免疫中发挥重要作用，是机体抵御微生物病原体，特别是化脓性细菌入侵的第一道防线
原代大鼠外周血中性粒细胞是从大鼠外周血中分离出的细胞，通过密度梯度离心法获得，是白细胞中的一类，在免疫系统中扮演着关键角色。外周血中性粒细胞具有趋化、吞噬和杀菌等重要功能，能够迁移至感染或损伤部位，并吞噬和消化病原体和细胞碎片。
大鼠外周血中性粒细胞在瑞氏染色血涂片中呈现：胞质呈无色或淡红色，含有许多细小的颗粒；细胞核呈杆状或分叶状。
大鼠外周血中性粒细胞特征
大鼠外周血中性粒细胞来源于大鼠的外周血，通过密度梯度离心法从外周血中分离得到。
中性粒细胞是白细胞中的一类，主要通过趋化、吞噬和杀菌等机制参与免疫反应。
中性粒细胞胞质呈无色或极浅的淡红色，含有许多细小的浅红或浅紫色颗粒，细胞核呈杆状或分叶状。
中性粒细胞具有趋化作用，可以迁移至感染或损伤部位；具有吞噬作用，能够吞噬并消化病原体和细胞碎片；具有杀菌作用，通过溶酶体酶分解吞噬的病原体和组织碎片。
大鼠外周血中性粒细胞应用在研究免疫反应、药物筛选、疾病模型和细胞生物学等方面。
在临床上，外周血是指除骨髓之外的循环血液，通过某些方法可将骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再从血液中提取分离得到造血干细胞，称为外周血干细胞。
中性粒细胞是人体内寿命最短的细胞，一般体外培养12-24h内活性稳定，48h活性下降，96h基本死亡。
大鼠外周血中性粒细胞参数表
| 细胞类型 | 大鼠外周血中性粒细胞（原代细胞） |
| 来源 | 大鼠外周血，通过密度梯度离心法分离得到 |
| 细胞类型 | 白细胞中的中性粒细胞 |
| 染色特性 | 瑞氏染色（Wright staining），胞质无色或极浅淡红色，含许多细小（0.2~0.4微米）的浅红或浅紫色特有颗粒 |
| 细胞核形态 | 杆状或2~5分叶状，叶与叶之间有细丝相连 |
| 生长特性 | 悬浮 |
| 细胞形态 | 圆形 |
| 培养基 | 原代细胞专用培养基 |
| 培养环境 | 95%空气，5%二氧化碳，温度37℃ |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 传代特性 | 不增殖，不传代，建议在细胞活性最佳期内使用 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶用于细胞处理 |
| 细胞鉴定 | CD11b/Integrin alpha M+、CD15+、CD45+或CD18+免疫荧光染色阳性，细胞纯度高于90% |
| 支原体检测 | 确保细胞不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
| 功能 | 趋化作用、吞噬作用和杀菌作用 |
| 胞浆颗粒 | 中性细颗粒，多为溶酶体，内含髓过氧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶和酸性水解酶等酶类 |
| 免疫作用 | 在机体抵御微生物病原体（特别是化脓性细菌）过程中起重要作用，具有很强的吞噬活性，可吞噬细菌、衰老红细胞、抗原-抗体复合物和坏死细胞 |
| 应用领域 | 免疫反应研究、药物筛选、疾病模型和细胞生物学研究 |
| 形态学特征 | 在瑞氏染色血涂片中，胞质无色或极浅淡红色，有许多细小的浅红或浅紫色特有颗粒，细胞核呈杆状或2~5分叶状，叶与叶之间有细丝相连 |
| 吞噬能力 | 吞噬细菌、衰老红细胞、抗原-抗体复合物和坏死细胞等，吞噬数十个细菌后细胞自身解体，释放的溶酶体酶类能溶解周围组织，形成脓液 |
| 生命特征 | 在非特异性免疫中扮演重要角色，抵御微生物病原体特别是化脓性细菌入侵 |
| 细胞分布 | 骨髓、血液和结缔组织中分布比例为28：1：25 |
| 白细胞比例 | 在成年人大鼠血液中，中性粒细胞占白细胞总数的55%-70% |
| 培养条件 | 体外培养12-24小时内活性稳定，48小时活性下降，96小时基本死亡 |
| 胞浆酶类 | 含有髓过氧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶和酸性水解酶等酶类，这些酶类与细胞的吞噬和消化功能密切相关 |
| 特殊功能 | 在非特异性免疫中发挥重要作用，是机体抵御微生物病原体，特别是化脓性细菌入侵的第一道防线 |
培养教程
大鼠外周血中性粒细胞处理
收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，并用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液。
进行离心（1200-1500rpm，3分钟），弃去上清，收集细胞沉淀。
向细胞沉淀中加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。调整合适密度的细胞接种至培养器皿中，置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散，可添加0.25%胰蛋白酶消化液2ml，37℃温浴2-3分钟后终止消化，进行细胞分散。
细胞状态稳定后，进行培养观察。按照换液频率每2-3天更换新鲜的完全培养基。
大鼠外周血中性粒细胞传代
当细胞达到80%汇合时，准备进行传代培养。
用PBS清洗细胞一次，添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml至培养瓶中，37℃温浴1-3分钟后终止消化。
吹打混匀后按1:2-1:3适当的比例进行细胞传代接种，补充新鲜的完全培养基至5ml，置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
待细胞完全贴壁后，进行培养观察，每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
注意事项
培养基于4℃条件下可保存3-6个月，保持无菌操作。
传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，避免影响细胞贴壁及生长状态。
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参考文献
- 重症急性胰腺炎大鼠外周血中性粒细胞蛋白质组学及中性粒细胞凋亡调控机制的研究 苏州大学
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