HEY-T30人卵巢癌细胞

HEY-T30细胞是一种具有紫杉醇抗性的人类卵巢癌细胞系，源自于亲代细胞系HEY。通过将HEY细胞在培养基中逐步暴露于增加的紫杉醇浓度中养护六个月形成，并持续在含有30nmol/L紫杉醇的培养基中维持。

HEY-T30细胞系于2006年由Jurriaan Brouwer-Visser研究所分离，成为研究紫杉醇抗性和其他治疗耐药性机制的重要工具。

HEY-T30人卵巢癌细胞

• HEY-T30细胞具有紫杉醇（Taxol）抗性
  

• HEY细胞在培养基中逐步暴露于逐渐增加的紫杉醇浓度，历时6个月后，继续在含30nmol/L紫杉醇的培养基中维持获得HEY-T30细胞

• HEY-T30细胞在半固态培养和免疫缺失的小鼠体内表现出异种移植物生长能力的差异

• HEY-T30细胞对顺铂（一种烷基化剂）显示一定程度的抗性

• HEY-T30细胞用于癌症研究、微管稳定剂、其他化疗耐药性机制

HEY-T30人卵巢癌细胞

HEY-T30人卵巢癌细胞

拿到细胞后

• 解冻 HEY-T30 细胞小瓶并尽快开始培养，以确保获得最高的活力。 如果收到细胞后需要继续储存冷冻培养物，则应将其储存于液氮蒸汽相中，而不是 -70°C。 在 -70°C 储存会导致 HEY-T30 细胞活力丧失。

• 在接种 HEY-T30 细胞时将紫杉醇添加到含 FBS 的 RPMI-1640 培养基中。

• 将 HEY-T30 小瓶通过在 37°C 水浴中轻轻摇动解冻。 为降低污染可能性，请将 O 型圈和盖子放在水外。 解冻应迅速进行（大约 2 分钟）。

• 从水浴中取出 HEY-T30 小瓶（当内容物解冻后立即取出），并通过浸入或喷洒 70% 乙醇进行消毒。 从这一点开始的所有操作都应在严格无菌条件下进行。

• 将 HEY-T30 小瓶内容物转移到含有 9.0 mL 完全培养基的离心管中，并以约 125 x g 的速度旋转 5-7 分钟。

• 用推荐的完全培养基 (有关 HEY-T30 培养物推荐稀释比例，请参见特定批次信息) 重新悬浮细胞沉淀，并分配到 25 cm2 或 75 cm2 培养瓶中。 在细胞恢复过程中避免培养基过度碱化很重要。 建议在加入 HEY-T30 小瓶内容物之前，将含有完全培养基的培养容器放入培养箱中至少 15 分钟，使培养基达到正常 pH 值 (7.0 至 7.6)。

• 将 HEY-T30 培养物置于 37°C 的合适培养箱中培养。 如果使用本产品描述的培养基，则建议使用 5% CO2 in air 的气氛。

传代步骤

• 取出并丢弃 HEY-T30 培养基。 用 1.0 至 2.0 mL 无 Ca++/Mg++ 的 Dulbecco's 磷酸盐缓冲液 (D-PBS)  或 0.25% (w/v) 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA 溶液短暂冲洗细胞层，去除所有含有胰蛋白酶抑制剂的血清痕迹。

• 向培养瓶中加入 1.0 至 2.0 mL 胰蛋白酶-EDTA 溶液，并在倒置显微镜下观察 HEY-T30 细胞，直至细胞层分散（通常在 5 至 15 分钟内）。 注意：为避免 HEY-T30 细胞团聚，请勿在等待细胞脱落时敲击或摇晃培养瓶。 难以脱落的 HEY-T30 细胞可以置于 37°C 下以促进分散。

• 加入 6.0 至 8.0 mL 完全培养基，并通过轻轻 pipet 吸取 HEY-T30 细胞悬液。

• 将 HEY-T30 细胞悬液转移到离心管中，并以约 125 x g 的速度旋转 5-10 分钟。 丢弃上清液。

• 用 10mL 新鲜培养基重新悬浮 HEY-T30 细胞沉淀。

• 向新的培养容器中加入适量的 HEY-T30 细胞悬液。

• 将 HEY-T30 培养物置于 37°C 培养箱中培养。

• 传代比例：建议使用 1:3 到 1:12 的传代比例。