
NIH:OVCAR-3人卵巢癌细胞
- 来源:卵巢腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+20% FBS+10μg/mL Insulin+1% P/S
- 其他:激素受体表达:雄激素受体阳性;雌激素受体阳性;孕酮受体阳性(可被17β-雌二醇诱导)
NIH:OVCAR-3是一种重要的人卵巢癌细胞系,于1982年从一名60岁高加索女性患者的恶性腹水中建立。患者患有进展性卵巢腺癌,经环磷酰胺、顺铂和阿霉素(多柔比星)联合化疗后仍出现恶化。
OVCAR-3细胞呈上皮样特征,以鹅卵石状单层贴壁生长,局部可形成多层。
OVCAR-3细胞具有异常核型,染色体数目在亚三倍体至近三倍体范围内。多个正常染色体(11、13、14、15、16、17和22号)明显缺失,取而代之的是大量标记染色体和其他结构异常。细胞间还存在染色体的随机丢失和增加。
OVCAR-3人卵巢癌细胞特征
致瘤性:在裸鼠中致瘤(21天内100%形成肿瘤)
同工酶表达:AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1; PGM1,1; PGM3,1
激素受体表达:雄激素受体阳性;雌激素受体阳性;孕酮受体阳性(可被17β-雌二醇诱导)
耐药性:对阿霉素(多柔比星)、美法仑和顺铂耐药
转染性能:适用于转染实验
研究应用:药物耐受性研究,激素治疗评估
应用领域:药物筛选,分子靶点识别,卵巢癌生物学研究
OVCAR-3人卵巢癌细胞参数表
细胞名称 | NIH:OVCAR-3人卵巢癌细胞 |
细胞别称 | NIH:OVCAR-3 (OVCAR-3, OVCAR3); Ovcar-3; NIH:Ovcar-3; NIH:OVCAR3; NIH-OVCAR-3; NIHOVCAR3; OVCAR.3;OVCAR3; Ovcar3 ATCC编号: HTB-161 |
来源 | 人源卵巢; 高级别浆液性卵巢腺癌 |
建立背景 | 60岁高加索女性患者恶性腹水; 1982年建立 |
患者治疗史 | 环磷酰胺、顺铂和阿霉素(多柔比星)联合化疗 |
生长特性 | 贴壁生长,鹅卵石状单层,局部可多层; 多边形,上皮样 |
增殖指标 | 倍增时间约34-69小时; 饱和密度约1-1.5 x 10^5 cells/cm^2 |
致瘤性 | 软琼脂克隆形成阳性; 裸鼠中21天内100%形成肿瘤 |
培养基 | RPMI-1640 + 20% FBS + 10 μg/mL 胰岛素 + 1% 青霉素/链霉素 |
培养环境 | 37°C, 5% CO2 |
传代方法 | 胰蛋白酶-EDTA消化; 推荐接种密度 2-4 x 10^4 cells/cm^2 |
染色体 | 异常,亚三倍体至近三倍体; 染色体数51-63 |
基因状态 | 微卫星稳定型 (MSS); P53突变型 |
受体表达 | 雄激素受体+; 雌激素受体+; 孕酮受体+; HER2/neu- |
标志物 | CA125+; CD44+; CD133+ |
同工酶 | AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1; PGM1,1; PGM3,1 |
敏感性 | 对阿霉素、美法仑和顺铂耐药; 对紫杉醇敏感 |
已完成分析 | 全基因组测序; DNA甲基化; 转录组; 蛋白质组; 代谢组 |
其他分析 | GPI锚定蛋白; 糖基化谱; 外泌体蛋白质组 |
细胞功能 | 适用转染; 分泌IL-6, IL-8, VEGF等 |
安全检测 | 细菌、真菌、支原体均阴性; 内毒素≤3 EU/mL |
保存条件 | 液氮长期保存; 复苏后存活率>85%; 干冰运输 |
用途 | 药物筛选; 分子靶点识别; 卵巢癌生物学研究 |
培养教程
OVCAR-3人卵巢癌细胞培养教程
细胞传代
传代时机:当OVCAR-3细胞汇合度达到80-90%时进行传代。
传代比例:通常为1:3到1:6,适用于OVCAR-3细胞。
传代频率:大约每2-3天传代一次,OVCAR-3细胞的倍增时间约为18小时。
传代步骤
移除OVCAR-3细胞的旧培养基。
用PBS清洗细胞单层。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育2-5分钟。
轻拍培养瓶,使细胞脱离。
加入含血清的新鲜培养基以终止消化。
将细胞悬液转移到离心管中,1000rpm离心5分钟。
弃上清,用新鲜培养基重悬细胞。
将细胞按所需比例接种到新的培养瓶中。
细胞冻存
冻存培养基:使用90% FBS + 10% DMSO来冻存OVCAR-3细胞。
降温步骤:缓慢降温(约1°C/分钟)至-80°C,然后转移到液氮中长期保存。
细胞复苏
快速解冻(37°C水浴,1-2分钟)复苏OVCAR-3细胞。
将细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中。
离心去除DMSO,重悬细胞并接种到培养瓶中。
OVCAR-3细胞适用于多种转染方法,包括:
脂质体转染法:如Lipofectamine等商业试剂。
钙磷酸盐共沉淀法。
电穿孔法。
病毒介导的转染:如慢病毒、腺病毒等。
聚合物介导的转染:如PEI (聚乙烯亚胺)。
核酸转染试剂:如FuGENE。
转染成功的标志
报告基因表达:如GFP荧光观察或荧光素酶活性测定。
目的蛋白表达:通过Western blot或免疫荧光检测。
mRNA水平增加:通过RT-PCR或Northern blot检测。
细胞表型改变:如形态变化或生长特性改变。
功能性改变:如特定信号通路的激活或抑制。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D1S1656 | 12,17.3 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 17,21 |
D3S1358 | 17,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 10,15 |
D10S1248 | 13,15 |
D12S391 | 22 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 16.2 |
D21S11 | 29,31.2 |
D22S1045 | 16 |
FGA | 21 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 7,13 |
TH01 | 9 (Technion Genomics Center BCF; Millipore=SCC257) |
9,9.3 (ATCC=HTB-161; CCRID; CLS=300307; COG; Cosmic-CLP=905933; KCLB=30161; PubMed=19372543; PubMed=25230021; PubMed=25877200; RCB=RCB2135; TKG=TKG 0602) | |
9.3 (PubMed=30485824) | |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |
参考文献
上一篇:OV90细胞系(人卵巢癌细胞)