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OV90细胞系(人卵巢癌细胞)货号:STM-CL-5286 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

OV90细胞系(人卵巢癌细胞)

  • 来源:卵巢 转移部位:腹水
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:蛋白表达:HER2/neu阳性、表达角蛋白
Tags: 卵巢癌细胞    
价格:¥ 2,300.00
提供STR鉴定报告

OV-90细胞系源自一位64岁女性患者的卵巢(恶性乳头状浆液腺癌)。OV-90细胞系来源于一位没有卵巢癌家族史的法国白人患者,并于1992年建立。

OV90细胞系的核型为46,XX,具有特征性染色体异常,包括der(1)t(1;10)(p36;p15)、hsr(3)(p11)和der(9;17)(q10;q10)。

OV90细胞系特性特征

  • 基因突变:p53基因突变:外显子6的Ser→Arg突变(密码子215);3p24染色体区域存在缺失

  • 蛋白表达:HER2/neu阳性、表达角蛋白

  • ov90细胞呈现上皮样细胞、贴壁生长、在软琼脂中能形成集落

  • 致瘤性:ov90细胞在裸鼠体内具有致瘤性

  • 转移特征:ov90细胞表现出腹水转移的特征

  • 与其他细胞系的比较:与TOV-21G细胞系相似,在3p24染色体上存在缺失、与TOV-112D细胞系不同,后者在3p24染色体上没有缺失

OV90细胞系参数表

细胞名称OV90细胞系(人卵巢癌细胞)
细胞别称OV90;OV-90;人卵巢癌细胞
来源信息组织:卵巢,腹水转移灶;疾病类型:恶性乳头状浆液性腺癌
患者背景64岁女性,III期,法裔加拿大血统,无卵巢癌家族史;建立时间:1992年8月
细胞特性形态:上皮细胞样;生长方式:贴壁生长;倍增时间:~50小时
致瘤性和转移在裸鼠体内具有致瘤性;表现出腹水转移特征
基因状态HER2/neu:阳性;p53:突变(外显子6的Ser→Arg突变,密码子215)
蛋白表达表达角蛋白
培养基首选:42% MCDB 105 + 42% M199 + 15% FBS + 1% GA;替代:DMEM/F12 + 15% FBS
培养环境温度:37°C;气相:5% CO2;液体高度:不超过3mm
传代与换液传代比例:1:3,消化4分钟;换液频率:每周2-3次
培养容器T25培养瓶:6-8ml培养基,1×10^6 cells;T75培养瓶:15ml培养基
冻存液配方基础培养基 + 5% DMSO + 15-20% FBS
安全与使用生物安全等级:1级;推荐代数:10代以内
特殊注意事项细胞对氧气、密度和养分敏感,需定期换液;建议平躺培养以增大空气交换面积

培养教程

OV90人卵巢癌细胞系培养教程

OV90细胞冻存与复苏

冻存

  • 冻存液配方:基础培养基 + 5% DMSO + 15-20% FBS。

  • 储存条件:液氮中长期保存。

复苏

  • 在37°C水浴中快速解冻。

  • 加入4 ml预热的培养基稀释OV90细胞悬液。

  • 1000 rpm离心3分钟,弃去上清。

  • 用1-2 ml新鲜培养基重悬OV90细胞。

  • 将OV90细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶中,第二天换液并检查细胞状态。

传代步骤

  • 弃去培养上清。

  • 用不含钙、镁离子的PBS润洗OV90细胞1-2次。

  • 加入适量胰酶消化4分钟。

  • 加入等体积培养基终止消化。

  • 1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用新鲜培养基重悬OV90细胞。

  • 按1:3比例接种到新的培养瓶中。

注意事项

  • 氧气、密度和养分敏感性:OV90细胞对氧气、密度和养分非常敏感,需要勤换液。

  • 操作小心:避免过度吹打和离心,以免影响OV90细胞状态。

  • 细胞代次:推荐使用10代以内的OV90细胞以保证实验结果的稳定性。

常见问题及OV90细胞健康检查

  • 细胞污染:

  • 支原体感染:可能改变细胞膜状态、细胞生长习性,导致实验结果不可靠。

  • 细菌或真菌污染:迅速消耗培养基养分,导致OV90细胞死亡。


    细胞状态不佳:

  • 形态异常:OV90细胞变圆或脱落,可能由于培养条件不适或污染。

  • 生长缓慢:可能由于培养基老化、传代过度或OV90细胞密度过低。


    传代问题:

  • 消化不完全或过度消化:影响OV90细胞贴壁和生长。

  • 传代比例不当:影响OV90细胞生长状态。


    培养基问题:

  • 培养基老化:叶酸不稳定,建议现配培养基,两周内用完。

  • 换液不及时:需定期换液以保证OV90细胞健康


    OV90细胞健康检查:

  • 显微镜观察:观察OV90细胞形态和密度,健康细胞应贴壁生长,形态均一。

  • 活力染色:使用台盼蓝染色,检查OV90细胞活力。

  • 支原体检测:定期检测支原体感染。

  • 增殖速率:监测OV90细胞倍增时间,健康的细胞倍增时间约为50小时。

  • 培养基颜色和浑浊度:变黄或浑浊可能指示代谢旺盛或污染。健康培养基应保持澄清。

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10,10.1 (ATCC=CRL-3585; PubMed=25230021; PubMed=25877200)
10.1 (PubMed=30485824)
D8S117912,14
D13S31711,12
D16S53911
D18S5112
D21S1130,30.2
FGA21,22
Penta D12,13
Penta E11,13
TH019.3
TPOX8,10
vWA16,17

参考文献

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