
OV90细胞系(人卵巢癌细胞)
- 来源:卵巢 转移部位:腹水
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:蛋白表达:HER2/neu阳性、表达角蛋白
OV-90细胞系源自一位64岁女性患者的卵巢(恶性乳头状浆液腺癌)。OV-90细胞系来源于一位没有卵巢癌家族史的法国白人患者,并于1992年建立。
OV90细胞系的核型为46,XX,具有特征性染色体异常,包括der(1)t(1;10)(p36;p15)、hsr(3)(p11)和der(9;17)(q10;q10)。
OV90细胞系特性特征
基因突变:p53基因突变:外显子6的Ser→Arg突变(密码子215);3p24染色体区域存在缺失
蛋白表达:HER2/neu阳性、表达角蛋白
ov90细胞呈现上皮样细胞、贴壁生长、在软琼脂中能形成集落
致瘤性:ov90细胞在裸鼠体内具有致瘤性
转移特征:ov90细胞表现出腹水转移的特征
与其他细胞系的比较:与TOV-21G细胞系相似,在3p24染色体上存在缺失、与TOV-112D细胞系不同,后者在3p24染色体上没有缺失
OV90细胞系参数表
细胞名称 | OV90细胞系(人卵巢癌细胞) |
细胞别称 | OV90;OV-90;人卵巢癌细胞 |
来源信息 | 组织:卵巢,腹水转移灶;疾病类型:恶性乳头状浆液性腺癌 |
患者背景 | 64岁女性,III期,法裔加拿大血统,无卵巢癌家族史;建立时间:1992年8月 |
细胞特性 | 形态:上皮细胞样;生长方式:贴壁生长;倍增时间:~50小时 |
致瘤性和转移 | 在裸鼠体内具有致瘤性;表现出腹水转移特征 |
基因状态 | HER2/neu:阳性;p53:突变(外显子6的Ser→Arg突变,密码子215) |
蛋白表达 | 表达角蛋白 |
培养基 | 首选:42% MCDB 105 + 42% M199 + 15% FBS + 1% GA;替代:DMEM/F12 + 15% FBS |
培养环境 | 温度:37°C;气相:5% CO2;液体高度:不超过3mm |
传代与换液 | 传代比例:1:3,消化4分钟;换液频率:每周2-3次 |
培养容器 | T25培养瓶:6-8ml培养基,1×10^6 cells;T75培养瓶:15ml培养基 |
冻存液配方 | 基础培养基 + 5% DMSO + 15-20% FBS |
安全与使用 | 生物安全等级:1级;推荐代数:10代以内 |
特殊注意事项 | 细胞对氧气、密度和养分敏感,需定期换液;建议平躺培养以增大空气交换面积 |
培养教程
OV90人卵巢癌细胞系培养教程
OV90细胞冻存与复苏
冻存
冻存液配方:基础培养基 + 5% DMSO + 15-20% FBS。
储存条件:液氮中长期保存。
复苏
在37°C水浴中快速解冻。
加入4 ml预热的培养基稀释OV90细胞悬液。
1000 rpm离心3分钟,弃去上清。
用1-2 ml新鲜培养基重悬OV90细胞。
将OV90细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶中,第二天换液并检查细胞状态。
传代步骤
弃去培养上清。
用不含钙、镁离子的PBS润洗OV90细胞1-2次。
加入适量胰酶消化4分钟。
加入等体积培养基终止消化。
1000 rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬OV90细胞。
按1:3比例接种到新的培养瓶中。
注意事项
氧气、密度和养分敏感性:OV90细胞对氧气、密度和养分非常敏感,需要勤换液。
操作小心:避免过度吹打和离心,以免影响OV90细胞状态。
细胞代次:推荐使用10代以内的OV90细胞以保证实验结果的稳定性。
常见问题及OV90细胞健康检查
细胞污染:
支原体感染:可能改变细胞膜状态、细胞生长习性,导致实验结果不可靠。
细菌或真菌污染:迅速消耗培养基养分,导致OV90细胞死亡。
细胞状态不佳:
形态异常:OV90细胞变圆或脱落,可能由于培养条件不适或污染。
生长缓慢:可能由于培养基老化、传代过度或OV90细胞密度过低。
传代问题:
消化不完全或过度消化:影响OV90细胞贴壁和生长。
传代比例不当:影响OV90细胞生长状态。
培养基问题:
培养基老化:叶酸不稳定,建议现配培养基,两周内用完。
换液不及时:需定期换液以保证OV90细胞健康
OV90细胞健康检查:
显微镜观察:观察OV90细胞形态和密度,健康细胞应贴壁生长,形态均一。
活力染色:使用台盼蓝染色,检查OV90细胞活力。
支原体检测:定期检测支原体感染。
增殖速率:监测OV90细胞倍增时间,健康的细胞倍增时间约为50小时。
培养基颜色和浑浊度:变黄或浑浊可能指示代谢旺盛或污染。健康培养基应保持澄清。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 |
D3S1358 | 18 |
D5S818 | 11,15 |
D7S820 | 10 (Cosmic-CLP=1240197; Direct_author_submission) |
10,10.1 (ATCC=CRL-3585; PubMed=25230021; PubMed=25877200) | |
10.1 (PubMed=30485824) | |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 12 |
D21S11 | 30,30.2 |
FGA | 21,22 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 11,13 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 16,17 |
参考文献
上一篇:IOSE80人正常卵巢上皮细胞