
A673细胞(横纹肌肉瘤细胞系)
- 来源:尤因肉瘤
- 细胞特征:贴壁细胞 , 多边形
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:A673细胞能产生致癌潜力的生长因子,同时也分泌生长抑制因子
A673人横纹肌肉瘤细胞是从一名患有尤因肉瘤的15岁女性患者的肌肉中分离出来的呈现多边形形态的细胞系。
A673细胞的显著特征之一是能够产生几种具有致癌潜力的生长因子。同时还分泌生长抑制因子,为细胞生长调节提供平衡的环境。
A673细胞特性
A673细胞是源自15岁女性患者尤因肉瘤的肌肉中分离出的肿瘤细胞系。
A673细胞呈多边形,贴壁生长
最初被认为是横纹肌肉瘤细胞系,后证实来自Ewing肉瘤。
在软琼脂上可形成克隆,具有四个以上的标志染色体、一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。
A673细胞能产生致癌潜力的生长因子,同时也分泌生长抑制因子,维持细胞生长的平衡环境。
具有致瘤性,在免疫抑制的小鼠中可诱导肿瘤形成。
A673细胞参数表
细胞名称 | A-673(人横纹肌肉瘤细胞) |
别称 | A673; RMS 1598; RMS1598 |
种属 | 人 (Homo sapiens) |
来源 | 患者:15岁女性;疾病:尤因肉瘤 |
组织来源 | 肌肉 |
细胞形态 | 多边形 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 约28小时 |
生物安全等级 | BSL-1 |
染色体特征 | 四个以上的标志染色体,一个额外的F染色体和两个异常的B染色体 |
克隆形成能力 | 在软琼脂上形成克隆 |
致瘤性 | 能在免疫抑制的小鼠中成瘤 |
生长因子 | 产生多种具有致癌潜力的生长因子;分泌生长抑制因子,提供平衡的生长环境 |
培养基 | DMEM (高糖) + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 95%空气 + 5% CO2,37℃ |
推荐传代比例 | 1:3至1:4 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
传代方法 | 消化2分钟,每2至3天换液一次 |
冻存液配方 | 配方一:基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO 配方二:DMEM (高糖) + 10% FBS + 10% DMSO |
储存温度 | 液氮 |
活力 | 95%(通过台盼蓝排除法检测) |
支原体检测 | 无支原体污染 |
其他检测 | 不含HIV-1、HBV、HCV、细菌、酵母和真菌 |
保藏机构 | ATCC (CRL-1598); ECACC (85111504) |
应用 | 用于研究肿瘤促进因子和肿瘤抑制因子之间的相互作用 |
培养教程
A673人横纹肌肉瘤细胞培养
A673细胞传代步骤
当A-673细胞密度达到80%-90%时,可进行传代培养。
弃去培养上清,使用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
在培养瓶中加入2ml消化液(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA),37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察细胞消化情况,大部分细胞变圆并脱落后,加入适量培养基终止消化,轻敲几下培养瓶。
补加6-8ml/瓶培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
首次传代时,将A-673细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或瓶中,建议冻存备用。
A673细胞冻存步骤
弃去培养基后,用PBS润洗一遍细胞,加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化。
以4min 1000rpm离心去掉上清,加入1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,细胞密度不低于1x10^6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液。
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2小时后转入液氮灌储存。记得标识冻存管位置。
A673细胞培养注意事项
收到A-673细胞后,请检查产品包装状况,如有破损、溢出或污染,请及时联系。
在75%酒精处理A-673细胞培养瓶表面后,先不打开培养瓶盖,静置2-3小时以稳定细胞状态。
静置完成后,确认A-673细胞生长状态并拍照记录。
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 16,21 |
D3S1358 | 14 |
D5S818 | 11,12 (ATCC=CRL-1598; CCRID=3101HUMTCHu223; CLS=300454; Cosmic-CLP=684052; ECACC=85111504; KCLB=21598; PubMed=24312454; PubMed=25010205; PubMed=25877200; PubMed=30879952) |
12 (PubMed=19787792) | |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 8,13 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29,30.2 |
FGA | 19,20 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 10,13 |
SE33 | 30.2,32.2 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 15,18 |
参考文献
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