
MS1小鼠胰岛内皮细胞系
- 来源:常胰岛内皮;SV40转染
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+5% FBS+1% P/S
- 其他:基因表达:生物活性基质金属蛋白酶组织抑制剂(高水平)
MS1小鼠胰岛内皮细胞源自小鼠郎格汉斯胰岛的内皮细胞。构建MS1细胞系时,首先利用温度敏感的SV40大T抗原(tsA-58-3)对原代胰岛内皮细胞进行转染,筛选出对G418抗性的细胞群。其次,通过克隆环分离出抗性克隆,并进一步筛选出对diI-Ac-LDL(一种乙酰化低密度脂蛋白)具有摄取能力的细胞。
MS1细胞保留了内皮细胞的重要特性,包括乙酰化LDL的摄取能力,对因子VIII相关抗原和血管内皮生长因子(VEGF)受体的表达。MS1细胞表达高水平的生物活性基质金属蛋白酶组织抑制剂,使该细胞系的行为更像一些常用小鼠株的正常巨噬细胞。
MS1细胞呈现出典型的上皮细胞样形态,能够贴壁生长。
MS1细胞系产品参数表
细胞名称 | MS1小鼠胰岛内皮细胞 |
别称 | MILE SVEN 1; Mile Sven 1; MILE SVEN1 |
种属 | 小鼠 |
细胞来源 | 小鼠郎格汉斯胰岛内皮 |
转染方法 | 使用温度敏感的SV40大T抗原(tsA-58-3)对原代胰岛内皮细胞进行转染 |
抗性选择 | G418抗性筛选 |
克隆方法 | 克隆环分离 |
克隆筛选标记 | diI-Ac-LDL的摄取 |
表达标记 | 血管内皮生长因子(VEGF) |
基因表达 | 生物活性基质金属蛋白酶组织抑制剂(高水平) |
生物安全等级 | BSL-2 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
建议传代比例 | 1:2至1:4 |
建议换液频率 | 2-3次/周 |
培养基 | DMEM(高糖)+ 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5% |
培养温度 | 37℃ |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS + 10% DMSO |
应用领域 | 血管生成因子的信号转导研究;血管瘤研究;组织抑制基质金属蛋白酶研究等 |
保藏机构 | ATCC; CRL-2279 |
培养教程
MS1小鼠胰岛内皮细胞培养
培养基与培养容器准备
高糖的DMEM培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素(P/S)。
无菌技术将培养基分装至培养瓶中,确保培养瓶表面干净。
MS1细胞解冻与传代
从液氮罐中取出冻存管,快速置于37°C的水浴中进行解冻。
解冻后,将MS1细胞转移至15mL离心管中,用DMEM培养基离心洗涤并去除DMSO。
将MS1细胞悬浮于DMEM培养基中,计算细胞数并按1:2至1:4的比例传代。
MS1细胞接种与培养
在含有预热DMEM培养基的细胞培养瓶中接种MS1细胞,使其形成单层。
将培养瓶放置于37°C、5% CO2的细胞培养箱中培养。
每两天进行一次培养基更换,以保持MS1细胞的生长环境稳定。
MS1细胞检测与观察
每天观察MS1细胞的形态和生长情况,确保细胞呈现正常的上皮细胞样形态。
定期使用普通显微镜或倒置显微镜检查MS1细胞的密度和健康状况。
MS1细胞传代与冻存
当MS1细胞密度达到80%-90%时,进行传代操作,以避免细胞过度生长和不良形态改变。
MS1细胞传代后,将一部分细胞用90%FBS和10% DMSO的冻存液进行冻存,存放于液氮罐中。
MS1细胞存储与维护
MS1细胞应定期检测是否受到细菌、真菌或支原体等污染。
定期检查冻存的MS1细胞的状态和细胞数量,确保冻存条件符合要求。
MS1细胞培养注意事项
所有操作应在无菌条件下进行,避免细胞污染。
MS1细胞培养过程中应严格遵守相关实验室安全操作规程。
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STR鉴定及相关
STR点位信息
18-3 | 16 |
6-7 | 16,17 |
5-5 | 17 |
X-1 | 27 |
1-2 | 19 |
7-1 | 26.2 |
8-1 | 16 |
1-1 | 17 |
19-2 | 13 |
15-3 | 22.3 |
12-1 | 17 |
6-4 | 18 |
4-2 | 20.3 |
3-2 | 14 |
2-1 | 16 |
13-1 | 17.1 |
11-2 | 16 |
17-2 | 15,16 |
