
INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞
- 来源:INS-1细胞是一种来源于大鼠胰岛细胞瘤的细胞系,广泛应用于胰岛β细胞功能研究领域
- 细胞特征:贴壁细胞,不规则形状
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+50μmol/L β-mercaptoethanol+1% P/S
- 其他:胰岛素阳性;可合成胰岛素原I和II
INS-1细胞最初源自X射线照射的移植胰岛瘤的大鼠,是一种肿瘤细胞系。其特征包括不规则形态和贴壁生长的生长特性。
INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞与NIT-1小鼠β细胞系高度相关,从患有胰岛素瘤的10周龄雌性小鼠的Langerhans胰岛中分离出来,应用于胰岛β细胞功能研究领域。INS-1细胞具有胰岛素阳性特征,能够合成胰岛素原I和II,在研究胰岛素分泌、胰岛素信号传导、胰岛素受体功能等方面具有重要价值。
这些小鼠是通过在大鼠胰岛素启动子控制下转基因SV40大T抗原来自发发展成β腺瘤。在第18代中,大多数NIT-1细胞显示阳性胰岛素染色,而胰高血糖素阳性细胞不到5%,没有观察到生长抑素或胰腺多肽呈阳性。胰岛素分泌对NIT-1细胞培养基中的葡萄糖浓度有反应。MHC I类、II类和ICAM-1 mRNA的组成型表达较低,但干扰素γ治疗后两者的表达均显著增加。I类信使RNA刺激伴随着I类抗原表达和H-2.39特异性神秘I类产物诱导的增加。尽管诱导了信使RNA,但MHC II类抗原未被诱导。NIT-1细胞显示了分化的小鼠β细胞的超微结构特征,包括发育良好的粗糙内质网、广泛的高尔基体和β颗粒。细胞会脱落一种成熟的回归型C型逆转录病毒。这种逆转录病毒能够感染其他Fv-1n小鼠细胞系,因此需要注意避免交叉感染。
注意:NIT-1细胞不会形成融合的单层,但它们会以相当密集的阵列形成漂亮的单层细胞集落。
INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞参数表
参数 | INS-1细胞 | NIT-1细胞 ( 与INS-1细胞高度相关) |
名称 | INS-1 (大鼠胰岛细胞瘤细胞) | NIT-1 (小鼠β细胞系) |
别称 | INS1 | NIT1 |
细胞来源 | 胰岛素瘤;雄性;NEDH;666日龄 | 胰岛素瘤;10周龄雌性小鼠的 Langerhans胰岛 |
细胞形态 | 不规则形 | 不规则多角形 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 | β细胞系 |
生长特性 | 贴壁细胞 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | 1 | N/A |
培养环境 | 空气,95%;CO2,5% | 空气,95%;CO2,5% |
培养条件 | RPMI-1640+10% FBS+50μmol/L β-mercaptoethanol+1% P/S | RPMI-1640+10%FBS+50μmol/L β-mercaptoethanol+1%P/S |
细胞组织来源 | 大鼠胰腺 | N/A |
冻存条件 | 55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO; 液氮 | 60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO; 液氮 |
收录 | LONZA | N/A |
细胞特性 | 胰岛素阳性;可合成胰岛素原I和II | 胰岛素阳性;可合成胰岛素原I和II |
细胞描述 | 来源于X射线照射的移植胰岛瘤的大鼠; 不规则形态 | 来源于患有胰岛素瘤的小鼠; 不规则多角形 |
注意事项 | N/A | 注意避免逆转录病毒交叉感染 |
生长方式 | 贴壁生长 | N/A |
细胞简介 | 胰岛素阳性,可用于胰岛β细胞功能研究 | 胰岛素阳性,可用于胰岛β细胞功能研究 |
培养液 | RPMI-1640+20% FBS+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S | N/A |
传代比例 | N/A | 1:3-1:6,每2-3天换液一次 |
传代周期 | N/A | 48-72 h |
冻存温度 | N/A | 液氮 |
培养教程
细胞培养
从冻存细胞中迅速取出所需数量的细胞。
快速解冻细胞,并将其转移至预热的培养基中。
将细胞培养在37°C、5% CO2的培养箱中。
注意避免用力敲击或摇晃培养瓶,以防止细胞团形成。
细胞分裂与传代
细胞在适宜的培养条件下会逐渐增殖。
当细胞达到80-90%的密度时,可进行细胞分裂和传代。
使用无菌技术将细胞转移到新的培养瓶中。
细胞冻存
使用含有10% DMSO的冻存液将细胞冻存于液氮罐中。
快速降温至-80°C,然后转移至液氮罐中长期保存。
注意事项
细胞培养过程中对胎牛血清质量要求高,推荐使用优质胎牛血清。
在培养基中添加β-巯基乙醇。
PUMC细胞贴壁能力较弱,换液时不需冲洗细胞。
在细胞消化时,避免用力敲击或摇晃培养瓶,以免形成细胞团。
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参考文献
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