LS1034细胞（人结肠腺癌细胞）

LS1034细胞系是一种人结肠腺癌上皮细胞系，于1989年从一名54岁高加索男性的盲肠癌活检中分离，患者被诊断为Dukes C型中度至低分化的结肠癌，表明肿瘤已侵入周围组织但未转移，患者没有表现出家族性腺瘤性息肉病（FAP），正常组织没有APC基因缺失。

LS1034细胞在癌症研究中具有重要意义，特别是在癌胚抗原（CEA）表达和生物学特性研究方面。LS1034细胞的遗传特征显示模态号为77，涉及1、7、14、X及18号染色体的7个标记。LS1034细胞广泛应用于结直肠癌的基础研究和药物筛选等领域。

LS1034细胞特性特征

• 染色体标记：LS1034细胞涉及1、7、14、X和18号染色体的标记。具体表现为单体7和单体14的存在，而正常的5号或18号染色体未被观察到。

• 致瘤性：在裸鼠体内能够形成肿瘤，表明其具有较强的致瘤能力。

• 癌症基因：p53+（突变，245位Gly-->Ser突变）；APC（突变、缺失，GAAAAGATT-->密码子1309处的GATT）

• 表达癌胚抗原（CEA），超过90%的LS1034细胞表面表达CEA。

• LS1034细胞表达主要组织相容性（MHC）I类抗原和β2微球蛋白，但未检测到II类抗原（HLA-DR、DQ和DP）。
  

• 生长因子：未检测到可测量量的潜在转化生长因子β-1（TGF-β-1）分泌。皮摩尔浓度的TGF-β-1、TGF-β-2和TGF-β-3对LS1034细胞的增殖有抑制作用。

• LS1034细胞具有多药耐药性（MDR），能够在无血清培养基中增殖，显示出其对药物治疗的抵抗能力。
  

• LS1034细胞在含有5%胎牛血清的甲基纤维素培养基中，集落形成效率为3%。与含有血清的半固体培养基相比，无血清甲基纤维素的集落形成能力提高了600%

LS1034细胞参数表

LS1034人结肠腺癌细胞培养教程

细胞复苏

• 检查冻存管是否完好，确保无漏液现象。
  

• 将冻存管置于37℃水浴中迅速解冻，轻轻摇晃以混匀含有1 mL LS1034细胞的悬液。

• 解冻后，加入4 mL RPMI-1640培养基（含10%胎牛血清和1%抗生素），混合均匀。
  

• 在1000 rpm条件下离心3分钟，弃去上清液。
  

• 加入1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打均匀以重悬LS1034细胞。
  

• 将LS1034细胞悬液转移至T25培养瓶或10 cm培养皿中，加入适量培养基，培养过夜。
  

• 第二天检查LS1034细胞状态并更换培养基。
  

细胞传代

• 当LS1034细胞密度达到80%-90%时进行传代。
  

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗LS1034细胞1-2次。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），确保液体覆盖所有LS1034细胞。
  

• 弃去消化液，放置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态，若细胞变圆并脱落，轻轻敲击瓶壁并加入少量培养基终止消化。

• 补加6-8 mL新鲜培养基，轻轻混匀后转移至无菌离心管中，在1000 rpm条件下离心4分钟，弃去上清液。
  

• 加入1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打均匀。

• 将LS1034细胞悬液按1:2比例分配到新的T25瓶或其他合适容器中，放置于37℃培养箱继续培养。
  

细胞冻存

• 收集状态良好的LS1034细胞及其培养液，装入无菌离心管中，在1000 rpm条件下离心4分钟，弃去上清液并用PBS清洗一次。
  

• 计数LS1034细胞，并调整至5×10⁶至1×10⁷/mL的浓度，加入无血清冻存液（如90%胎牛血清+10% DMSO），轻轻混匀。
  

• 清晰标识冻存管，将其放入-80℃冰箱冷冻24小时后转入液氮储存，并记录位置以便日后取用。